韩建永
- 作品数：71 被引量：253H指数：11
- 供职机构：中国农业大学生物学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 雷帕霉素通过促进自噬提高小鼠iPSCs诱导效率
- 2017年
- 【目的】雷帕霉素(Rapamycin)可以激活和促进细胞的自噬过程。探明在体外培养系统中添加雷帕霉素,检测是否可以通过促进自噬过程提高iPSCs诱导效率。【方法】在iPSCs诱导过程的1~3d和4~6d分别加入雷帕霉素,检测自噬现象,同时对iPSCs诱导过程中多能性基因表达进行检测,统计原代iPSCs克隆数等,评价雷帕霉素对iPSCs重编程的影响;在iPSCs的培养过程中分别加入50nM/L和100nM/L的雷帕霉素处理。【结果】使用浓度为50nM/L和100nM/L的雷帕霉素处理,可以提高iPSCs的诱导效率。50nM/L浓度处理,重编程效率较高【结论】雷帕霉素在iPSCs重编程过程中可以促进自噬,提高Nanog表达水平,抑制p53表达,进而提高iPSCs诱导效率。
- 梁浩然曹安韩建永曹素英
- 关键词：自噬重编程
- 兔胚胎细胞核移植重组胚的发育力
- 2002年
- 以兔为模型 ,对影响胚胎细胞核移植重组胚发育力的电融合与激活参数、体外培养系统进行了探索性研究。结果表明 ,有利于重组胚发育力的适宜电融合与激活参数为 2 0 0 V/ m m的电场强度、10 0μs的脉冲宽度 ;在不同的体外培养系统中 ,TCM- 199培养液内于兔胎儿成纤维细胞饲养层 (REF feeder)上共同培养的重组胚获得了最高的 2～ 4-细胞发育率和桑椹胚或囊胚的发育率 ,分别为 6 5 .7%和 2 2 .9%;移植 111枚重组胚给 9只假孕母兔 ,其中 2只妊娠 ,1只完成足月妊娠产出 2只克隆仔兔 ,另 1只在妊娠 2 2 d流产 1只克隆死胎。
- 桑润滋韩建永常万存仲跻峰
- 关键词：兔胚胎细胞核移植克隆体外发育
- 影响波尔山羊胚胎移植妊娠效果因素研究
- 本文就波尔山羊胚胎质量、胚胎发育阶段、胚胎数量、受体卵巢黄体数与卵泡数、供受体发情同期化程度、胚胎移植的方向以及术者熟练程度等因素与受体移植妊娠率的关系进行了研究。结果表明,囊胚较桑椹胚妊娠率高;胚胎质量以A级桑椹胚妊娠...
- 李俊杰桑润滋金东航田树军韩建永李铁栓
- 关键词：波尔山羊胚胎移植妊娠率
- 文献传递
- 山羊PGCs用于分离与克隆类ES细胞被引量：22
- 2002年
- 选择健康成年本地白山羊 ,自然发情、配种后 4 4 d取胎儿 ,以传统的原始生殖细胞 (PGCs)分离与克隆的方法和PGCs与其胎儿生殖嵴周围组织细胞共同培养的方法获得类胚胎干细胞 (类 ES细胞 ) ,并对山羊类 ES细胞在不同饲养层上进行培养。结果表明 ,采用传统方法和共培养的方法并添加细胞因子均能分离获得类 ES细胞。分离获得的类ES细胞在同源 (山羊 )胎儿细胞饲养层上生长效果较好 ,可传 4代或 5代 ,而在小鼠原代成纤维细胞饲养层上类 ES细胞仅传 3代。另外 ,共培养不添加细胞因子组仅获 1个类 ES细胞集落 。
- 韩建永桑润滋孙国杰王志刚李俊杰
- 关键词：克隆山羊胚胎干细胞原始生殖细胞
- 影响山羊胚胎干细胞分离克隆效果的因素研究
- 本试验就胚龄、饲养层、生长因子及培养系统等因素对山羊胚胎干细胞分离克隆效率的影响进行研究,结果表明,在2种不同饲养层上,囊胚的脱带时间均短于桑椹胚,囊胚的脱带率均高于桑椹胚,而饲养层的种类对胚胎的脱带时间以及脱带率影响不...
- 桑润滋韩建永孙国杰金东航王志刚李俊杰
- 关键词：山羊胚胎干细胞
- 文献传递
- 波尔山羊胚胎移植受体妊娠后期能量和蛋白质营养需要研究
- 波尔山羊是世界上著名的肉用山羊品种。我国从1995年开始引进,但受体母羊和胎儿来自不同品种,妊娠期胎儿和哺乳期羔羊的生长发育强度与纯种繁育时有较大差别,受体营养水平直接影响着波尔山羊诸多优点的发挥。本研究是在舍饲条件下,...
- 曹素英李建国韩建永
- 关键词：妊娠后期消化能瘤胃降解蛋白瘤胃非降解蛋白
- 文献传递
- 山羊类ES细胞的分离与克隆被引量：12
- 2003年
- 采集山羊交配后 6～ 8d的桑椹胚、囊胚和孵化囊胚 ,将桑椹胚和囊胚分别放在小鼠原代胎儿成纤维细胞(PMEF)饲养层和同源原代胎儿成纤维细胞 (PGEF)饲养层上比较其脱带时间及脱带率。脱带后 ,将各自一半胚胎切割 ,把含 ICM的半胚分别放在相应饲养层上进行培养 ,另一半整胚在各自饲养层上继续培养 ,而孵化囊胚直接于PGEF饲养层上培养。当 ICM增殖一定程度时进行传代 ,以比较其类 ES细胞分离与克隆的效果。结果表明 ,在 2种不同饲养层上 ,囊胚的脱带时间均短于桑椹胚 ,囊胚的脱带率均高于桑椹胚 ,而饲养层的种类对胚胎的脱带时间以及脱带率影响不大。脱带切割囊胚不论在 PMEF还是在 PGEF饲养层上 ,其贴壁时间均短于脱带整胚及孵化囊胚 ,而贴壁率高于脱带整胚 ,与孵化囊胚相似。脱带整胚及脱带切割胚在 PMEF饲养层上所获类 ES细胞只能维持 3代 ,而在PGEF饲养层上 ,脱带切割半胚和孵化囊胚所获类 ES细胞传至 5代。由此认为 ,对脱带后的胚胎进行切割处理 ,有利于 ICM的贴壁和增殖 ;应用同源原代胎儿成纤维细胞饲养层培养系统 ,有利于类
- 桑润滋韩建永孙国杰金东航田树军
- 关键词：山羊克隆饲养层胚胎干细胞
- 基于不同方法的微量细胞全基因组遗传变异检测和比较分析
- 2024年
- 旨在用不同方法对微量细胞全基因组遗传变异进行检测和比较分析。本研究首先以3、5、7、10个猪耳缘成纤维细胞为试验材料,利用不同方法提取微量细胞基因组,进行全基因组测序(whole genome sequencing,WGS),比较不同细胞数及不同提取方法之间的遗传变异检测性能。随后利用牛囊胚的5个和7个滋养外胚层细胞获得的基因组进行全基因组测序和SNP芯片技术的比较分析,每组均进行3次重复。结果表明,针对不同细胞数,基于全基因组扩增技术(whole genomic amplification,WGA)的MDA(multiple displacement amplification)方法均比其他方法的DNA产物浓度、测序质量及SNP检出性能效果更优。使用REPLI-g^((R)) Single Cell Kit扩增7、10细胞数的DNA浓度显著高于3、5细胞数,但质量评估的各项性能基本无显著差异,且不同细胞数检测到的SNP位点数量相似。5、7细胞数的Illumina Bovine GGP芯片SNP位点call rate分别为74.09%和81.52%。全基因组测序相较于芯片可以获得更丰富的遗传变异信息,但两种检测手段共同检测到的SNP以及基因型相同的位点数占比较低。综上所述,本研究系统比较了不同细胞数下不同微量细胞基因组提取方法以及不同全基因组遗传变异检测技术的各项性能,结果显示利用REPLI-g^((R)) Single Cell Kit扩增7细胞进行二代测序可得到较为准确且稳定的结果,本研究建立了一套较为可靠的家畜胚胎微量细胞样品基因组提取和遗传变异检测方案,为将来实现准确的胚胎基因组选择和胚胎质量评估具有重要的意义和价值。
- 石庆珍徐鸿洋张燕张毅王雅春韩建永姜力
- 关键词：胚胎全基因组扩增
- 外源基因不依赖的猪诱导多能干细胞的制备方法及应用
- 本发明涉及制备猪诱导多能性干细胞的方法，所述方法能够从猪体细胞中产生稳定的、具备长期培养和自我更新能力的无基因修饰的猪诱导多能性干细胞，在临床前评价、种质资源保存、新品种培育、生物培养肉制品制备等诸多领域具备应用潜力。
- 韩建永 朱倩倩 高登峰
- 应用生殖激素对小尾寒羊同期发情效果研究被引量：25
- 2004年
- 应用羊用孕酮栓、孕马血清促性腺激素和氯前列烯醇相结合的方法对 99只空怀小尾寒羊和 36只哺乳母羊 (产后 2 5～ 35d)进行同期发情试验研究。结果表明 ,99只空怀母羊在 2 4h内的同期发情率达到 81 8% ,4 8h内为 89 9%。孕酮栓在空怀母羊阴道内埋置不同时间 (12d与 14d)的同期发情率无显著差异 (P >0 0 5 ) ;对空怀母羊注射不同剂量 (330IU/只和 2 5 0IU/只 )孕马血清促性腺激素对羊的同期发情率的影响无显著差异 (P >0 0 5 )。 36只哺乳母羊在 2 4h与 4 8h内的同期发情率均为 80 6 % (2 9/36 ) ,对哺乳母羊注射孕马血清促性腺激素 2 5 0IU/只的同期发情率为 90 0 % (18/2 0 ) ,优于注射 330IU/只的同期发情率 6 8 8% (11/16 )。
- 田树军桑润滋李俊杰金东航李铁栓贾日东韩建永赵俊肖
- 关键词：生殖激素小尾寒羊同期发情发情效果
