马建 作品数:116 被引量:298 H指数:12 供职机构: 吉林农业大学 更多>> 发文基金: 吉林省科技发展计划基金 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 轻工技术与工程 更多>>
hrpZ_(Psta)在转基因大豆中定量表达与疫霉根腐病和灰斑病抗性相关研究 被引量:12 2015年 以T5转hrpZPsta基因大豆JN29-705-15和JL30-187为材料,利用实时荧光定量PCR技术(Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR)检测了目标基因在转基因大豆不同组织中的表达量,分别利用下胚轴侵染法和叶面喷施法鉴定疫霉根腐病抗性和灰斑病抗性,并分析目的基因表达量与疫霉根腐病和灰斑病抗性的相关性。结果表明:hrpZPsta基因在大豆的叶、茎、根、籽粒中均有表达,二个株系平均相对表达量分别为8.2/6.1、0.9/0.7、6.5/4.6和0.8/0.7;T5转hrpZPsta基因大豆抗疫霉根腐病和灰斑病能力与野生型相比均有所提高,JN29-705-15对疫霉根腐病抗性从感病提高到中抗,而JL30-187从中抗提高到抗病;hrpZPsta基因在叶中的表达量也与抗灰斑病能力呈正相关,与病情级别呈极显著负相关。试验结果初步证明了外源基因hrp ZPsta在大豆植株中的表达量与受体植株对疫霉根腐病和灰斑病抗性存在一定的相关性。 谷晓娜 刘振库 王丕武 张卓 马建 曲静 张君 付永平 卢实 郑成忠 刘婷婷关键词:大豆 疫霉根腐病 灰斑病 抗性 应用重组PCR技术构建大豆脂肪氧化酶基因RNA干扰表达载体 被引量:11 2008年 RNA干扰是近年来生物技术领域新兴的研究热点之一。在作物的研究中,RNA干扰被认为在作物品质改良中具有重要的应用价值,并已在水稻、小麦、玉米等作物中得到成功应用,但在大豆的研究中尚鲜有报道。在研究植物RNA干扰的实验中,构建相应的RNA干扰表达载体是常用手段,但传统构建方法较费时费力。重组PCR是一种利用重叠延伸的方法进行高效和快速的体外基因片段拼接的PCR技术。研究将重组PCR技术应用于构建大豆脂肪氧化酶基因ihpRNA干扰表达载体,一方面探索一条更简便、快捷、适应范围更广泛的大豆基因RNA干扰表达载体构建方法,另一方面所构建的载体为进一步研究RNA干扰在大豆脂肪氧化酶改良中的应用奠定了基础。结果显示应用重组PCR技术构建大豆脂肪氧化酶基因RNA干扰表达载体是可行的,相比与常规方法此方法更简便、快捷、效率更高。 马建 厉志 刘艺苓 王丕武关键词:重组PCR RNA干扰 脂肪氧化酶 乳酸乳球菌工程菌株遗传稳定性的研究 2012年 本文研究了乳酸乳球菌工程菌株的遗传稳定性。采用工程菌的遗传稳定性通过目的基因的PCR鉴定、重组质粒的酶切鉴定、SDS-PAGE检测和0、10、20、30、40和50代各代菌种发酵生产大豆异黄酮能力进行检测;通过复制平板计数法计算质粒的丢失率。结果表明:工程菌株传代50次后质粒的丢失率为6%;PCR鉴定、重组质粒的酶切鉴定结果显示,重组载体携带目的基因可以传至50代,而未发生丢失;SDS-PAGE检测表明目的基因表达稳定。工程菌株重组质粒在50代内具有良好的遗传稳定性;50代内菌株发酵生产大豆异黄酮的能力没有显著差异;乳糖的浓度对工程菌株的遗传稳定性有一定的影响,在乳糖使用量达到20g/L以上时,有利于重组质粒的稳定性。 张志发 王丕武 曲静 马建 李鲁华 姜大磊关键词:乳酸乳球菌 大豆异黄酮 工程菌株 乳糖 转hrpZpsta抗病基因大豆的研究 被引量:14 2011年 【目的】将具有广谱抗病性的hrpZpsta基因导入大豆,为培育抗灰斑病的转基因大豆新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,以大豆子叶节为受体,将具有广谱抗性的hrpZpsta基因转入大豆品种"吉林30"中,以耐盐基因badh作为筛选标记性基因,经过抗性筛选,对转基因植株进行PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测分析。【结果】确定的NaCl筛选浓度为200mmol/L。对T1、T2和T3代转基因植株进行PCR检测,得到T1代阳性植株30株,T2代45株,T3代284株,说明外源hrpZpsta基因在转基因后代中能够遗传。Southern杂交结果表明,外源目的基因hrpZpsta已经整合进大豆基因组中,且整合位点不尽相同。RT-PCR结果表明,hrpZpsta基因在受体大豆中获得表达。【结论】获得了hrpZpsta基因遗传表达的T3代转基因大豆株系。 张云月 付永平 王丕武 王鹏 李勃 马建 曲静关键词:大豆 农杆菌介导法 子叶节 菰在水稻育种中的研究进展 被引量:7 2006年 菰是水稻育种重要的野生资源。在近几十年间对菰的研究不断深入。结果表明,菰具有许多水稻所欠缺的优良性状,是扩大水稻基因库的良好材料。通过几十年的研究证明,利用菰对水稻进行改良是十分有价值的,也是可行的。并提出了“渐渗性”理论,为分子水平的远缘杂交提出新的理论依据。 王晓丽 马建 孙长占 历艳志 马景勇关键词:水稻 育种 大豆查尔酮还原酶基因CHR3及应用 本发明公开了大豆查尔酮还原酶基因CHR3及应用,CHR3基因为大豆中一个新的查尔酮还原酶基因,试验证明该基因的表达产物能够催化合成异甘草素,CHR3来源于大豆,具有适合于大豆等双子叶植物的优化密码子,其基因工程受体主要适... 王丕武 张卓 付永平 王鑫雨 马建 刘思言 张超 魏洪波 吴楠 李丹文献传递 EMS诱导水稻‘一目惚’表型变异和部分基因表达变异的比较 被引量:5 2020年 本研究利用甲基磺酸乙酯(Ethy methan sulfonate)试剂胁迫诱导粳稻品种‘一目惚’(Hitomebore),获得性状稳定遗传的水稻矮杆突变体(E58),对株高、分蘖、千粒重等表现与相同环境生长下的野生型‘一目惚’对照(E63)进行对比分析,结果表明,该突变体田间表现为植株矮化,分蘖增多,千粒重减少,且株高与对照相比呈极显著差异,分蘖呈显著差异,千粒重呈极显著差异。EMS诱导的序列变异可能对基因表达产生影响,进而引起水稻矮化的表型变异。根据前人试验结果,应用Real-time PCR对与胁迫及矮化相关的39对引物中筛选出24对引物进行Real-Time PCR扩增,结果表明:引物OsNR1、OsP5CS、OsGS1;1、OsGDH1、OsHKT1;5、OsNRT1;1、OsGDH3、OsAKT1、OsAMT2;3、OsGS1;2、OsSOS1、OsNHX2、OsNRT2;1、OHAK16、OsGS2、OsHAK1、OsGDH2、OsAMT3;3在E63、E58表达差异极显著;OsHAK10、OsNHX1、OsAMT1;1表达差异显著;OsNADHGOGAT、OsFd-GOGAT、OsGS1;3表达差异不显著。EMS诱导对部分水稻基因表达产生影响,从而影响水稻表现型,为进一步工作提供科学依据。 张安星 孟卫隆 李喆 吴楠 刘威 马建关键词:荧光定量PCR 大豆花芽mRNA差异显示技术体系反应条件的优化 被引量:2 2013年 为建立适用于大豆花芽的mRNA差异显示体系,以"吉农18"花芽突变体为材料,采用RNAiso Plus试剂盒提取了大豆花芽的总RNA,并对DDRT-PCR体系中的Mg2+、dNTP及Taq酶的用量进行了优化。试验结果表明:适合大豆花芽mRNA差异显示的PCR体系(25μL)为反转录产物用量2.0μL,锚定引物50 pmol/L,随机引物50 pmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,Taq酶1.5U。 王楠 尹俊奇 周莹 姚丹 马建 曲静 王丕武关键词:MRNA差异显示技术 大豆 花芽 EMS诱变技术在水稻育种中的应用 被引量:15 2016年 综述EMS诱变的原理和关键技术,简述一些EMS诱变技术在水稻育种中的应用。EMS对水稻成熟胚的愈伤组织的诱变、对水稻种子的诱变、对水稻幼穗的突变等;总结了EMS诱变育种技术存在缺点和不足;提出了今后EMS诱变技术应用在水稻育种方面的展望和发展方向。 邢飞 王晓雪 任旭东 杨峰 王伦 马建关键词:EMS诱变 水稻 育种 水稻新品种“吉农大858”选育及栽培技术 被引量:10 2012年 水稻新品种"吉农大858"是经有性杂交、系谱法选育而成,2008—2010年吉林省区域试验结果表明,该品种3年平均产量8 783.8 kg/hm2,比对照"通35"增产5.7%;生产试验结果:平均产量8 466.6 kg/hm2,比对照"通35"增产4.2%。该品种抗逆性强、适应性广、稻米品质达到二等食用粳稻优质米品种要求,于2011年通过吉林省农作物品种审定委员会审定。该品种适宜吉林省的吉林、长春、松原、四平、通化等中晚熟稻区种植。 李道恒 历艳志 马建 张国立 邹志国 马景勇关键词:水稻 选育 栽培技术