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王静娜

作品数：4 被引量：0H指数：0
供职机构：西北农林科技大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 4篇农业科学

主题

  • 3篇真核
  • 3篇真核表达
  • 3篇免疫
  • 3篇克隆
  • 3篇核表达
  • 2篇猪免疫
  • 1篇电子克隆
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇原核表达
  • 1篇实时荧光
  • 1篇实时荧光定量
  • 1篇实时荧光定量...
  • 1篇脐静脉血管
  • 1篇组织化学
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇流感
  • 1篇流感病毒
  • 1篇流感病毒感染

机构

  • 4篇西北农林科技...

作者

  • 4篇王静娜
  • 3篇张德礼
  • 2篇李登云
  • 2篇张洋
  • 2篇华琳琳
  • 2篇亢展展
  • 1篇温俊歌
  • 1篇徐瑶
  • 1篇钟瑜
  • 1篇蒋鹏飞
  • 1篇张淑霞
  • 1篇陈新雨
  • 1篇胡健
  • 1篇孙岩
  • 1篇蒋朋飞

传媒

  • 1篇遗传
  • 1篇西北农林科技...
  • 1篇西南大学学报...

年份

  • 3篇2013
  • 1篇2011
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
H3N2和H1N1甲型流感病毒感染对猪CDK9基因表达的影响
2013年
【目的】研究H3N2和H1N1甲型流感病毒感染对仔猪肺脏CDK9基因表达的影响,揭示流感发病机制与CDK9基因的相关性。【方法】以接种PBS的仔猪为空白对照,利用实时荧光定量PCR技术和半定量免疫组织化学法,检测H3N2和H1N1甲型流感病毒接种感染7d后,仔猪肺脏CDK9的mRNA和蛋白表达的变化,并在电子显微镜下观察CDK9阳性细胞的定位。【结果】实时荧光定量PCR检测表明,H3N2和H1N1甲型流感病毒感染仔猪7d后,肺脏组织内CDK9基因mRNA的相对表达量分别为0.42和0.36,与对照(1.0)相比显著降低(P<0.05)。半定量免疫组织化学检测结果显示,仔猪受到H3N2和H1N1流感病毒感染后,肺脏组织内CDK9蛋白的相对表达水平分别为31.4和38.7,较正常组织(61.4)显著降低(P<0.05)。电子显微镜观察发现,H3N2和H1N1甲型流感病毒感染仔猪后,肺脏细胞界限不明显,CDK9阳性细胞散在分布于终末细支气管和肺泡内,且胞核着色较深,但是细胞整体着色变浅。【结论】受到流感病毒感染后,仔猪肺脏组织内CDK9表达量降低,可能是RNApolⅡ磷酸化水平降低的原因之一。
李登云孙岩蒋鹏飞亢展展王静娜华琳琳张洋张德礼
关键词：流感病毒实时荧光定量PCR免疫组织化学
猪免疫抑制因子MNSFβ的克隆、表达与组织分布
2013年
MNSFβ(Monoclonal nonspecific suppressor factorβ)是一种天然免疫抑制因子,参与机体免疫反应、应激反应、细胞分裂、细胞凋亡和核转运等生物过程,但其功能在猪中鲜有报道。文章通过电子克隆得到猪MNSFβ的全长序列,利用RT-PCR首次从猪脾脏中克隆了包含完整开放阅读框的MNSFβcDNA(GenBank登录号:KF77642500)片段,测序正确后分析猪MNSFβ的核酸序列和蛋白质序列。将猪MNSFβ基因编码区序列插入表达载体pEGFP-C1,构建真核表达载体pEGFP-MNSFβ;用脂质体将重组质粒转染到猪脐静脉内皮细胞(SUVEC)中,利用荧光检测、Western blot和激光共聚焦分析SUVEC中猪MNSFβ的表达;并用实时荧光定量PCR对猪MNSFβ在不同组织的表达丰度进行分析。结果表明:猪MNSFβ基因全长402 bp,编码133个氨基酸,含一个外显子。生物信息学分析表明,猪MNSFβ为无信号肽的稳定蛋白,由泛素样结构域与核糖体蛋白S30组成。对猪MNSFβ与已发现的18个物种的MNSFβ氨基酸序列进行相似性分析和进化树分析,显示其蛋白相似度均在91%以上,且进化距离都小于0.05,说明MNSFβ在各物种间高度保守。荧光检测和Western blot结果显示,猪MNSFβ在SUVEC中成功表达,激光共聚焦显示其在细胞质与细胞核内均有分布。组织表达谱分析表明,猪MNSFβ在各免疫相关组织广泛表达,但在肺脏中未检测到表达,说明其在机体免疫反应中发挥重要作用。
王静娜蒋朋飞亢展展李登云华琳琳张洋张淑霞张德礼
关键词：真核表达
猪PDCD5基因的克隆与真核表达
2011年
用RT-PCR方法从猪肝组织中扩增出猪PDCD5(programmed cell death 5)编码序列,TA克隆至pMD-19T载体中,软件分析猪PDCD5基因的核算序列和蛋白序列,进行染色体定位.构建真核表达载体,将PDCD5基因编码区序列插入绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-C1中.通过脂质体转染法将重组载体瞬转入猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVECs)进行瞬时表达.结果表明:该序列编码125个氨基酸,猪PDCD5基因定位于猪6号染色体,含有6个外显子,与人PDCD5基因高度同源.双酶切鉴定和测序表明:重组真核表达载体构建成功,荧光检测和Western blot检测显示PDCD5融合蛋白表达.研究结果为探讨猪PDCD5基因在细胞凋亡调控中的功能提供了基础数据.
胡健王静娜陈新雨温俊歌徐瑶钟瑜张德礼
关键词：CELL克隆真核表达
猪免疫抑制因子MNSFβ的克隆、表达与组织分布
MNSFβ是一个天然免疫抑制因子，通过共价结合到其蛋白受体上发挥生物功能，包括免疫反应，细胞分裂，应激反应、细胞凋亡和核转运。在小鼠肝脏和吞噬细胞中，MNSFβ可以与endophilinII C端Gly74和Lys294...
王静娜
关键词：电子克隆真核表达原核表达
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