罗燕 作品数:131 被引量:645 H指数:14 供职机构: 四川农业大学 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 四川省教育厅青年基金 四川省应用基础研究计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
黑曲霉N25植酸酶phyA基因在巴斯德毕赤酵母中高效表达的研究 被引量:46 2001年 从黑曲霉N25(A.niger China strain)中提取出染色体DNA,根据已经测定出的植酸酶phyA基因全序列设计了一对引物,采用高保真度的聚合酶Advangage-HF扩增到了去除信号肽和内含子后约1.4kb片段,对该片段进行了克隆及序列测定。将该序列与植酸酶phyA基因全序列进行了比较。以此片段构建成功了pPIC9K-phyA载体(命名为pPNP-1),并转化毕赤巴斯德酵母。经G418抗性筛选、酶活性测定、Southern印迹和Western印迹,获得了高效表达的转化子PP-NP-1(23869.4u/ml)、PP-NP-2(20533.0u/ml)、PP-NP-3(35646.7u/ml),其酶活性分别是出发菌株的酶活(513.4u/ml)的46.46倍、39.99倍和69.46倍,且转化子具有很好的遗传稳定性。 王红宁 马孟根 吴琦 刘世贵 罗燕关键词:黑曲霉 植酸酶 PHYA基因 毕赤酵母 转化子 大凉疣螈形态学观察及消化、呼吸系统解剖 被引量:5 2012年 利用大凉疣螈的浸渍标本观察其外部形态,测定其身体全长、躯干、头部、吻端、鼻孔、眼睛、口裂及尾部的长度和宽度,并对大凉疣螈的消化系统和呼吸系统进行解剖观察。结果表明,大凉疣螈的犁骨齿排列方式呈"V"字形,消化道可以分为口腔、咽、食道、胃、十二指肠、回肠和直肠,消化腺有肝脏和胰腺,肝被软膜分隔为不能实际分开的纵向狭长的左右两叶,两叶大小无明显差异。喉部没有软骨,气管直接连接两肺,无支气管。本文对大凉疣螈做了形态学描述及组织结构观察,为更深入了解疣螈及其保护提供了基础资料。 李蓓 邹立扣 王朋 龙梅 郭放 马炳存 罗燕 刘晓琳关键词:大凉疣螈 一株林麝肺源创口博德特氏杆菌全基因组及细胞致死性肿胀毒素分析 被引量:1 2021年 【目的】为探究林麝的死亡原因,本研究无菌采集1只死亡林麝肺脏后进行细菌的分离鉴定。【方法】通过细菌分离纯化、生化试验和16S rRNA序列分析,对分离菌株进行鉴定;然后通过药敏试验、全基因组测序与分析以及细胞致死性肿胀毒素(cytolethal distendin toxin subunit B,CDTB)分析,对分离菌株耐药性和致病性进行研究。【结果】在死亡林麝肺脏中分离出1株革兰阴性菌,经鉴定为创口博德特氏杆菌,命名为ZL0001。经过细胞培养观察和CDTB分析表明该菌为胞内寄生菌,含有细胞致死性肿胀毒素,能导致细胞凋亡。药敏结果表明该分离株对氨苄西林、亚胺培南、链霉素和四环素等药物敏感;对氨曲南、林可霉素、克林霉素和呋喃妥因耐药。全基因组测序分析结果表明,该菌株与其他创口博德特氏杆菌的平均核苷酸一致性(average nucleotide identity,ANI)值均>97%,基因组大小为4350644 bp,共发现22个耐药相关基因。此外,该菌株基因组包含63个毒力相关基因,其参与鞭毛蛋白、脂多糖、铁摄取、抗血清蛋白以及细胞致死性肿胀毒素等毒力因子的合成。【结论】本研究首次在动物呼吸道中分离出创口博德特氏杆菌,并证明其为胞内寄生菌,对林麝肺炎的发病机理研究具有重要意义。 曾红梅 赵位 王翔 晏仕强 杨泽晓 罗燕 程建国 程建国 王印关键词:林麝 全基因组序列 微胶囊疫苗的研究进展 2020年 微胶囊技术作为一种保护技术,可以将抗原包裹以避免不良环境的影响完成投递过程,并增强机体的免疫效果。大量研究表明,疫苗进入体内后易受到酸碱、生物酶的影响导致蛋白高级结构被破坏,使疫苗的效力降低。而微胶囊疫苗是一种运用可降解生物材料和微胶囊化技术改进现有疫苗的剂型和投递方式,从而保护抗原、简化接种程序、增强免疫效果的新型可控缓释疫苗,对疫苗成功进入动物机体,产生生物学作用上,具有重要的作用。此外,微胶囊疫苗具有靶向性与控释性,大大提高了疫苗的生物利用率,令机体可以长期地产生高效抗体。本文对微胶囊疫苗的壁材选择、制备工艺、优点特性、成囊后的效果评价进行综述,并对疫苗微胶囊化过程中存在的问题进行探讨。 周游 马文澳 赵位 喻东 杨威 姚学萍 罗燕林麝腿部神经纤维瘤病例 2010年 罗燕 程建国 蔡永华 王建民关键词:纤维瘤 林麝 病例 腿部 皮下组织 裂褶菌培养、鉴定及氨基酸组成分析 被引量:8 2011年 目的:获得裂褶菌的纯培养物,鉴定培养菌丝,并分析子实体及菌丝氨基酸含量。方法:利用孢子分离法、组织分离法培养菌丝,扫描电镜观测其菌丝特征,结合ITS区序列分析,并利用出菇试验分析其菌丝体,全自动氨基酸分析仪分别测定裂褶菌子实体、菌丝体氨基酸组成。结果:菌丝体ITS区序列与子实体完全一致,出菇试验亦表明裂褶菌菌丝体培养成功,子实体及菌丝体均含有丰富的氨基酸成分,两者氨基酸种类及含量相当,菌丝体总氨基酸含量14.01%,子实体总氨基酸含量15.59%,其中菌丝体必需氨基酸的含量(38.60%)比子实体稍高(37.95%)。结论:裂褶菌菌丝亦具有丰富的营养价值,可作为重要的氨基酸来源及功能性食品。 潘欣 邹立扣 岳爱玲 张悦 姚琼 罗燕 李蓓关键词:裂褶菌 氨基酸 氮肥种类对多花黑麦草产量与品质的影响 被引量:8 2017年 为充分利用西南地区牧草资源,完善牧草营养施肥技术,本试验以‘长江2号’、‘特高’、‘F4N’3个品种多花黑麦草(Lolium multiflorum L.)为材料,研究不同氮肥种类对其产量和品质的影响。结果表明:施用尿素的多花黑麦草的株高和产量均为最高,其中尿素处理的多花黑麦草第2茬鲜草产量为7 023kg·hm^(-2),显著高于碳铵和硝基复合肥处理(P<0.05);硝基复合肥处理的前3茬多花黑麦草的粗蛋白(CP)含量均最高,但施用尿素的多花黑麦草的蛋白质产量(2 054.10kg·hm^(-2))显著高于碳铵和硝基复合肥处理(P<0.05);尿素处理前3茬多花黑麦草的中、酸性洗涤纤维(NDF、ADF)含量均显著低于碳铵和硝基复合肥处理(P<0.05);施用尿素和碳铵的多花黑麦草粗脂肪(EE)含量差异不显著,但均显著高于硝基复合肥处理(P<0.05)。碳铵处理的多花黑麦草的可溶性碳水化合物(WSC)含量显著高于硝基复合肥和尿素(P<0.05),但硝基复合肥和尿素处理间差异不显著。因此从产量和品质综合考虑,3个品种多花黑麦草均以施用尿素较好。 李小梅 陈天峰 彭安琪 罗燕 张新全 闫艳红关键词:氮肥种类 多花黑麦草 林麝肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及其kp05372基因的生物信息学分析 被引量:8 2017年 【目的】对1株疑似肺炎克雷伯氏菌进行分离鉴定及全基因测序分析,并对发现的新基因kp05372编码产物进行生物信息学分析。【方法】采用传统的细菌鉴定方法和分子生物学方法,分别对采自麝粪便的1株病原菌的生理生化特征及16SrRNA序列进行测定;以小鼠感染试验和半数致死量(LD50)测试该病原菌的致病性;用全基因组测序方法对病原菌基因组进行测序分析,并对发现的新基因编码产物进行生物信息学分析。【结果】经生理生化试验和16SrRNA序列分析发现,分离菌株为肺炎克雷伯氏菌,命名为GPKP,其对小鼠致死的LD50为6.3×107CFU/mL。该菌基因组大小为4 879 707bp,包含5 490个开放阅读框,共注释到22组COG功能。kp05372基因编码产物由302个氨基酸组成,无信号肽,是一种不稳定的、在细胞内发挥生理作用的亲水性蛋白。【结论】分离的细菌为肺炎克雷伯氏菌,kp05372基因编码产物属于典型的LysR家族转录因子(LTTR)。 赵位 王吴优 程建国 田青 罗燕关键词:林麝 肺炎克雷伯氏菌 生物信息学分析 含绿色荧光蛋白基因的猪细小病毒病-伪狂犬病重组病毒的构建 将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因插入转移载体质粒pPI-2.EGFP中,构建了含PPV VP2基因及其EGFP报告基因的PRV基因缺失转移载体质粒pPI-2.EGFP.VP2.采用磷酸钙转染系统,将pPI-2.E... 罗燕 郭万柱 徐志文 刘艳丽 殷华平关键词:伪狂犬病毒 猪细小病毒 VP2基因 EGFP 重组病毒 文献传递 一株山羊源2型溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及全基因组序列分析 被引量:4 2021年 【目的】分离鉴定四川某规模化山羊场引起山羊大规模呼吸道疾病和死亡的病原菌,并分析其致病和耐药机制。【方法】将病原分离纯化后,依次进行生化试验、小鼠致病性试验、药敏试验、16S rRNA序列分析及荚膜血清分型,并通过全基因组测序对分离菌株进行物种分型以及基因功能分析。【结果】从病死山羊鼻液、气管、肺脏和肝脏中分离出同一种菌,经鉴定为荚膜血清2型的溶血性曼氏杆菌,命名为MHLB002;对小鼠的LD50值为4.4×10^(7) CFU/mL;药敏试验结果表明:该溶血性曼氏杆菌对头孢类、β-内酰胺类、磺胺类和喹诺酮类药物敏感,对部分大环内酯类和氨基糖苷类药物耐药;全基因组序列分析显示该菌基因组大小为2580488 bp,序列类型为ST-43,与MH1475菌株同源性最近,且2菌株基因组ANI值达98.60%;MHLB002菌株全基因组中共有19个ORF编码与致病性相关的基因,9个ORF编码耐药基因。【结论】本试验所分离出的荚膜血清2型溶血性曼氏杆菌,是引起该养殖场山羊大规模呼吸道疾病和死亡的致病菌,同时为预防和治疗山羊溶血性曼氏杆菌病提供理论依据。 芦彪 张保海 罗梓丹 姚学萍 王印 杨泽晓 罗燕 曹随忠关键词:山羊 全基因组序列分析 药敏试验