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应用显微注射法建立转基因小鼠被引量：2: 1998年; 应用显微注射法建立转基因小鼠谢卫兵陈汉源曾位森罗琛（第一军医大学组胚教研室广州５１０５１５）转基因动物是研究基因表达调控及表达产物生物学效应的最佳体系之一，同时作为一种新型的生物反应器，在医学、农、林、畜牧业等领域有着广泛的应用前景。目前采用基因转移...; 谢卫兵陈汉源曾位森罗琛; 关键词：转基因小鼠显微注射法

利用GFP示踪细胞内源性P53活性检测DNA损伤被引量：2: 1999年; ＤＮＡ损伤的检测对预防癌症和遗传病等非常重要。采用分子克隆技术，将报告基因—绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）置于ＳＶ４０基本启动子调控下，构建成对照载体ｐＳＶ－ＧＦＰ。在ＳＶ４０基本启动子上游插入寡核苷酸Ｐ５３ＲＥ，构建成示踪载体ｐ５３ＲＥ－ＧＦＰ。转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以ＧＦＰ示踪细胞内源性Ｐ５３的转录激活活性。紫外线照射或Ｈ２Ｏ２处理转化细胞使ＤＮＡ损伤，诱导细胞内源性Ｐ５３的表达。用激光扫描共聚焦成像系统（ＬＳＣＩＳ）对细胞进行红、绿、蓝三色光融合成像，并测定ＧＦＰ经４８８ｎｍ激发后发出的绿色荧光光密度，验证ＧＦＰ示踪Ｐ５３的特异性。ｐ５３ＲＥ－ＧＦＰ转化细胞３Ｔ３－ＲＥＧ经紫外线照射或Ｈ２Ｏ２处理后，ＧＦＰ的表达增高，处理后１ｈｒ光密度即达到最高水平，随后逐渐降低。血清“饥饿”—非ＤＮＡ损伤处理的３Ｔ３－ＲＥＧ细胞，以及经紫外和Ｈ２Ｏ２处理的对照载体ｐＳＶ－ＧＦＰ转化细胞３Ｔ３－ＳＶＧ，ＧＦＰ的表达无明显增强。实验表明：ＧＦＰ示踪内源性Ｐ５３转录激活活性用于检测ＤＮＡ损伤有很高的灵敏度和特异性，适宜推广应用。; 曾位森夏宁邵罗琛罗琛丁亮谢卫兵曾定; 关键词：绿色荧光蛋白 P53 DNA损伤

myc和ras癌基因共整合转基因小鼠的建立被引量：7: 1998年; MMTV－H3－c－myc和MMTV－v－Ha－ras癌基因DNA混合显微注射到小鼠受精卵中，并移植到假孕母鼠输卵管内，获得出生后断奶健康小鼠95R（♀55，♂40）。经过斑点杂交显示myc正反应小鼠17只（♀12，♂5），ras正反应小鼠12只（♀7，♂5）。在全部25只癌基因正反应小鼠中，有4只为myc＋ras双重正反应，均为雌性。继续进行Soutnern印迹分析，确认myc正反应小鼠为“建成者”转基因小鼠。许多转基因小鼠发生各种肿瘤。; 陈汉源陆荣华余焱林徐国江曾位森傅江南谢卫兵蒋霞罗琛; 关键词：转基因动物小鼠 MYC基因 RAS基因

分析myc小鼠的转基因复本和肿瘤发生: 原癌基因突变和过量表达影响细胞生长分化和癌变。我们建成MMTV-H3-c-myc和MMTV-v- Ha-ras转基因小鼠,并繁殖后代,分析myc和ras 的致癌潜能和作用原理,阐明肿瘤生物学特性。在存活326-907天的...; 陈汉源曾位森谢卫兵罗琛; 文献传递

Ce(NO_3)_3对不同细胞DNA的损伤作用研究被引量：7: 1999年; 以体外培养３Ｔ３细胞和ｌｏｖｏ细胞为研究对象，运用单细胞凝胶电泳技术，探讨了Ｃｅ（ＮＯ３）３对这２种细胞ＤＮＡ的损伤作用．结果表明Ｃｅ（ＮＯ３）３对２种细胞均有损伤作用：低浓度（１ｍｍｏｌ／Ｌ）时，ｌｏｖｏ细胞的ＤＮＡ损伤率要明显高于３Ｔ３细胞ＤＮＡ的损伤率，高浓度（５ｍｍｏｌ／Ｌ）时，则２种细胞的损伤率几近相同，提示较低浓度Ｃｅ（ＮＯ３）对正常细胞和癌细胞存在着不同的作用，稀土对癌细胞具有选择性杀伤作用；Ｃｅ（ＮＯ３）; 杨维东罗琛田雪梅雷衡毅杨燕生; 关键词：DNA 3T3细胞 LOVO细胞

冷冻保存对人类附睾精子功能的影响被引量：4: 1999年; 目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后，每例冷冻标本均见活动精子，但精子活动率显著降低，精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降，头膜损伤－尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子）显著升高，精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本，采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１）冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响，造成精子功能减弱；（２）冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选，有可能拾取到的是尾膜完整，但头膜损伤的精子；（３）建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。; 朱伟杰姚汝华梁蔚波罗琛; 关键词：附睾精子冷冻保存不育症精子功能检测

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罗琛

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