肖长纪
- 作品数：13 被引量：57H指数：4
- 供职机构：北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 活性氧介导P62蛋白激活参与甲氨蝶呤耐药绒癌发病机制研究
- 2014年
- 目的探讨甲氨蝶呤(MTX)耐药绒癌的发生机制。方法 2012年5月至2013年1月于北京协和医院以人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的MTX耐药绒癌JEG-3/MTXR细胞为研究对象,采用免疫印迹、RTPCR法检测MTX处理后细胞内P62的变化。流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR细胞内活性氧(ROS)变化,采用ROS清除剂Mn Tm Py P检测MTX作用后JEG-3/MTXR细胞内P62蛋白水平的变化。RNA干扰法沉默P62基因免疫印迹法和流式细胞仪检测MTX诱导后JEG-3/MTXR耐药细胞内PARP蛋白的表达和凋亡率的变化。结果 MTX可诱导耐药绒癌P62蛋白和m RNA表达水平呈时间依赖性上调。MTX可诱导耐药绒癌ROS表达水平升高,Mn Tm Py P降低P62蛋白的表达。P62-si RNA可促进JEG-3/MTXR细胞内MTX诱导的凋亡反应蛋白PARP的切割和激活,流式细胞仪检测RNA干扰联合药物组细胞凋亡率(14.4±1.02)%,高于单纯药物应用组(9.1±1.34)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ROS介导P62蛋白激活参与MTX耐药绒癌发生机制,为耐药绒癌临床靶向治疗提供新思路。
- 沈芸肖长纪于珊宫美轩赵静向阳
- 关键词：绒癌耐药氧化应激反应P62
- 耐药性妊娠滋养细胞肿瘤治疗的研究进展被引量：8
- 2015年
- 妊娠滋养细胞疾病（gestational trophoblastic disease， GTD）是一组源于胎盘滋养细胞异常增殖的疾病，包括良性病变与恶性病变。良性病变即葡萄胎，包括完全性葡萄胎和部分性葡萄胎；而恶性病变又称为妊娠滋养细胞肿瘤（gestational trophoblastic neoplasm，GTN），包括侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌（绒癌）、胎盘部位滋养细胞肿瘤（placental site trophoblastic tumor，PSTT）和上皮样滋养细胞肿瘤（epithelial trophoblastic tumor，ETT）[1]。GTN发生于育龄期妇女，因其对化疗高度敏感，而且可以通过检测血清hCG水平来监测疾病的进展以及对治疗的反应，迄今几乎100%的低危型患者和80%～90%的高危型患者通过化疗达到治愈[2]，但是仍有一部分患者对一线化疗耐药或者病情缓解后复发。研究表明，无转移低危型、有转移低危型以及高危型GTN患者，对一线化疗耐药的发生率分别为10%～20%、30%～50%和20%～30%，从而需要接受补救性化疗[3]。目前，世界范围内已报道了多种补救性化疗方案，但是各种化疗方案的有效性和副反应仍需要进一步研究，本文就耐药性GTN治疗的研究进展作一综述。
- 肖长纪向阳
- 关键词：妊娠滋养细胞肿瘤耐药性GESTATIONAL胎盘部位滋养细胞肿瘤妊娠滋养细胞疾病上皮样滋养细胞肿瘤
- 下调FoxMl基因表达对子宫颈癌细胞增殖能力的影响被引量：1
- 2013年
- 宫颈癌是常见的女性生殖系统恶性肿瘤,在所有女性恶性肿瘤中其发病率仅次于乳腺癌,居第2位,且近年来其发病呈现年轻化趋势.叉头框转录因子（Fox） M1属于Fox蛋白超家族的一员,是典型的与增殖相关的转录因子,对多种细胞的细胞周期依赖性基因的表达有重要作用.有研究发现,FoxM1蛋白的表达在多种肿瘤中均显著升高,且对这些恶性肿瘤的发生、发展起促进作用.本课题组的前期研究显示,FoxM1蛋白在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织,在低分化宫颈癌组织中的表达显著高于高、中分化宫颈癌组织.提示,FoxM1蛋白的过度表达可能与宫颈癌的发生及病理分化程度相关.因此,本研究采用RNA干扰技术下调宫颈癌细胞系HeLa、C33A、Siha细胞中FoxM1基因的表达,探讨其对宫颈癌细胞增殖能力的影响,并探讨其作用机制.
- 肖长纪陈红陈慧君曾委王红艳邹阳
- 关键词：基因表达子宫颈生殖系统恶性肿瘤宫颈癌组织女性恶性肿瘤
- 腹腔镜手术治疗子宫内膜癌的系统评价被引量：20
- 2014年
- 目的系统评价腹腔镜与开腹手术在子宫内膜癌治疗中的疗效及安全性。方法检索Cochrane Library、PubMed、EMbase、Ovid、CBM、万方、维普及CNKI等数据库1990年1月至2013年9月比较腹腔镜和开腹手术治疗所有期别的子宫内膜癌的随机对照试验，采用RevMan5．1软件进行Meta分析。结果最终纳入13个随机对照试验，共7317例患者。Meta分析结果：两组术后随访3～5年子宫内膜癌患者总生存率、复发率以及清扫盆腔淋巴结数目无明显差别。与开腹手术相比，腹腔镜手术治疗子宫内膜癌术中出血量更少（P=0．0001），住院时间更短（P〈0．00001），总并发症（P〈0．00001）、术后并发症（P〈0．00001）发生率更低。但腹腔镜组的术中并发症发生率高于开腹组（p=0．03）、手术时间较开腹组长（P=0．004）。结论与开腹手术相比，腹腔镜在子宫内膜癌的治疗中更有优势，尤其在总并发症和住院时间等方面优势更明显。
- 肖长纪赵静郭朋向阳
- 关键词：子宫内膜癌腹腔镜手术开腹手术随机对照试验
- 子宫内膜息肉宫腔镜下电切术与刮除术的疗效比较被引量：9
- 2012年
- 目的:探讨宫腔镜下子宫内膜息肉电切术(TCRP)与宫腔镜定位下刮除术(HPCP)治疗子宫内膜息肉(EP)临床疗效。方法:对2008年2月至2011年8月行TCRP及HPCP患者152例进行分析,其中行TCRP 67例,行HPCP 85例,比较两种治疗方式术后复发情况,不孕患者妊娠情况及临床症状改善情况,随访6-42个月。结果:两种手术方法均能明显改善临床症状,TCRP术后不孕患者11例,妊娠7例;HPCP术后不孕患者8例,妊娠3例,比较无统计差异(χ2=1.27,P>0.05);TCRP术后复发5例,复发时间(15.6±7.6)月,HPCP术后复发16例,复发时间(7.1±3.3)月,比较均有统计学差异(χ2=4.06,P<0.05;t=3.41,P<0.01)。结论:TCRP术和HPCP术均能明显改善临床症状,采用TCRP术可降低EP复发率,延缓复发时间。
- 王红艳陈红肖长纪曾委
- 关键词：子宫内膜息肉宫腔镜不孕
- 下调FoxM1基因表达对宫颈癌细胞侵袭能力的影响被引量：8
- 2015年
- 目的:研究靶向FoxM1基因的小分子干扰RNA(siRNA)下调宫颈癌Hela、C33A及Siha等细胞系FoxM1基因表达后细胞侵袭和迁移能力的改变,寻找新的宫颈癌治疗靶点。方法:设计靶向FoxM1基因小分子干扰RNA(siFoxM1)并分别转染宫颈癌细胞系Hela、C33A和Siha,实时定量RT-PCR和Western blot技术分别检测siFoxM1对细胞内源性FoxM1表达的影响;采用Transwell小室试验检测细胞迁移和侵袭能力改变。结果:1转染siFoxM1可特异高效地下调宫颈癌细胞FoxM1mRNA水平和蛋白表达水平,Hela、C33A和Siha细胞FoxMl mRNA分别下降92.29%,87.65%和95.82%;2细胞迁移试验显示3株细胞的平均OD值较对照组分别降低40.61%,49.65%和50.87%(P<0.05)。细胞侵袭试验显示3株细胞的平均穿膜细胞数较对照组分别降低86.67%,71.77%和72.48%(P<0.01)。结论:FoxM1基因表达下调可显著降低多株宫颈癌细胞侵袭和迁移能力,有可能成为有效的宫颈癌治疗靶点。
- 肖长纪陈红陈慧君邹阳杨红王晶晶
- 关键词：宫颈癌FOXM1RNA干扰
- 内质网应激介导的凋亡耐受在甲氨蝶呤耐药绒癌发生机制中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的:初步探讨内质网应激介导的凋亡耐受在甲氨蝶呤耐药绒癌发生机制中的作用。方法:以人绒毛膜上皮癌JEG-3细胞及本课题组前期构建的甲氨蝶呤耐药绒癌细胞(JEG-3/MTXR)为研究对象。采用WST法评估甲氨蝶呤处理后JEG-3/MTXR和JEG-3亲本细胞的细胞活力,Western blot法测定两种细胞中caspase-9激活、GRP78和GADD153蛋白的表达。RNA干扰法沉默JEG/MTXR细胞中GADD153基因,Western blot法测定caspase-9蛋白激活的情况。结果:不同浓度梯度的甲氨蝶呤诱导后,JEG-3亲本细胞系的细胞生存率显著降低。相同浓度甲氨蝶呤作用后,JEG-3/MTXR细胞内切割caspase-9无增加,JEG-3亲本细胞内caspase-9激活并切割。JEG-3/MTXR和JEG-3细胞中GRP78表达水平呈时间依赖性上调;JEG-3/MTXR细胞中GADD153蛋白水平无显著上调,而JEG-3亲本细胞内出现显著上调。沉默GADD153基因可抑制MTX引起的切割caspase-9蛋白水平上调。结论:内质网应激介导的凋亡耐受可能参与甲氨蝶呤耐药绒癌发生机制。
- 沈芸向阳赵静肖长纪
- 关键词：耐药绒癌内质网应激甲氨蝶呤
- 大鼠生殖道沙眼衣原体感染后C3a、γ干扰素和白血病抑制因子在子宫蜕膜的表达及其意义被引量：1
- 2010年
- 目的观察生殖道沙眼衣原体(CT)初次感染后妊娠大鼠在胚胎着床窗口期子宫蜕膜C3a,γ干扰素(IFN-γ)和白血病抑制因子(LIF)表达量的变化。方法选择成年健康状况良好的雌性SD大鼠35只(除去不符合标准的雌鼠5只,最终以30只作统计学分析),随机均分为实验组和对照组两组。实验组通过阴道接种沙眼衣原体D型株,对照组阴道注射等量生理盐水。分别在大鼠妊娠后第5、第6和第7天(即胚胎着床窗口期)处死大鼠,并从子宫取材,通过免疫组织化学法定量检测在胚胎着床窗口期子宫蜕膜C3a、IFN-γ和LIF表达量。结果 30只大鼠子宫蜕膜组织均有C3a、IFN-γ和LIF表达。实验组C3a和IFN-γ表达量均低于对照组(P<0.01);实验组在妊娠第5天和第6天LIF比对照组低表达(P<0.01),妊娠第7天两组表达量无显著差异(P>0.05)。实验组中IFN-γ和C3a在子宫蜕膜中的表达呈正相关(r=0.9965),IFN-γ与LIF的表达无相关性(r=0.2331)。结论生殖道感染CT后,子宫局部C3a、IFN-γ和LIF表达量有变化并与着床有密切联系。
- 王菲菲吴求吉谢哲肖长纪孟运莲
- 关键词：C3AΓ干扰素白血病抑制因子沙眼衣原体蜕膜
- 米非司酮对宫颈癌亲代和耐药细胞抗肿瘤作用及耐药逆转作用机制的研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨米非司酮(RU486)对宫颈癌亲代细胞株(Hela)和耐药细胞株(Hela/MMC)抗肿瘤作用及耐药逆转作用的机制。方法培养Hela细胞及Hela/MMC细胞株后分为4组:空白对照组、单用RU486组、单用MMC组及联用组。采用流式细胞术检测各组细胞周期和细胞凋亡率变化;蛋白印迹法(Western blotting)检测各组p-糖蛋白(p-gp)的表达。结果 (1)Hela细胞及Hela/MMC细胞,单用RU486组较空白对照组G_0/G_1期比例均明显升高,S期比例明显降低,细胞凋亡率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);联用组较单用MMC组G_0/G_1期比例均明显升高,S期比例均明显降低,细胞凋亡率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);(2)Hela/MMC细胞p-gp表达显著高于Hela细胞(P<0.01);Hela/MMC及Hela细胞,其单用RU486组与空白对照组相比,p-gp的表达均显著降低(P<0.05),Hela/MMC细胞系,单用MMC组与空白对照组相比,p-gp的表达无明显变化(P>0.05),在联用组,p-gp的表达显著低于单用MMC组和空白对照组(P<0.01)。结论米非司酮可通过调节细胞周期、促进细胞凋亡、降低p-gp的表达发挥抗肿瘤及耐药逆转作用。
- 曾委陈红邹阳肖长纪潘虹王红艳
- 关键词：宫颈癌米非司酮多药耐药逆转P-糖蛋白
- 转录因子c-Jun对甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌细胞内自噬标志蛋白LC3的调节作用被引量：1
- 2014年
- 目的：初步探讨转录因子c-Jun对甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌细胞内自噬标志蛋白--微管相关蛋白1轻链3（LC3）的调节作用。方法以人绒毛膜癌细胞株JEG-3及前期构建的甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌细胞株JEG-3/MTXR为研究对象，采用蛋白印迹法检测甲氨蝶呤药物处理后细胞内磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）和磷酸化c-Jun（p-c-Jun）的表达变化，以及JNK抑制剂SP600125对p-c-Jun蛋白表达的影响。RNA干扰技术沉默c-Jun基因检测甲氨蝶呤处理后JEG-3/MTXR细胞内LC3 mRNA和蛋白的表达。染色质免疫共沉淀（ChIP）法结合实时荧光定量PCR技术测定甲氨蝶呤药物作用后JEG-3/MTXR细胞内c-Jun蛋白结合于LC3启动子上的相对富集量。结果（1）甲氨蝶呤作用后JEG-3/MTXR细胞内p-JNK和p-c-Jun蛋白的相对表达量呈时间依赖性上调，作用72 h时相对表达量分别为1.16±0.18、1.99±0.20，较0 h升高（分别为0.41±0.05、0.20±0.06），分别比较，差异均有统计学意义（P〈0.05）；SP600125抑制了甲氨蝶呤作用后JEG/MTXR细胞内p-c-Jun蛋白表达的上调，甲氨蝶呤作用后JEG/MTXR细胞内p-c-Jun蛋白的相对表达量为1.11±0.20，高于SP600125联合甲氨蝶呤者（0.30±0.04），两者比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）针对c-Jun基因的小分子干扰RNA （siRNA）--c-Jun-siRNA抑制了甲氨蝶呤诱导的JEG/MTXR细胞内LC3 mRNA和蛋白表达的上调，甲氨蝶呤联合c-Jun-siRNA作用后JEG-3/MTXR细胞内LC3 mRNA和蛋白的相对表达量分别为1.24±0.17、0.52±0.07，低于甲氨蝶呤联合无义siRNA者（分别为3.03±0.43、1.20±0.15），分别比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）甲氨蝶呤作用后JEG/MTXR细胞内c-Jun结合于LC3启动子的相对富集量是无甲氨蝶呤作用者的（2.95±0.35）倍。结论转录因子c-Jun对LC3的调节作用可能参与绒毛膜癌发生甲氨蝶呤耐药的机制。
- 沈芸向阳肖长纪赵静
- 关键词：绒毛膜癌甲氨蝶呤微管相关蛋白质类自噬
