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范里: 作品数：35 被引量：65H指数：5; 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学语言文字更多>>

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金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响被引量：7: 2016年; 旨在深入认识金属离子在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培养生产单克隆抗体过程中所发挥的作用。综合考察了不同铜离子和锌离子浓度下CHO细胞的生长、抗体的表达以及抗体的电荷分布情况。结果显示,一方面,当培养基中铜离子浓度为120 nmol/L、锌离子浓度为50μmol/L时,最有利于CHO细胞的生长和抗体的表达。过高或过低的铜离子和锌离子均对细胞的生长和活性的维持产生了不利影响。另一方面,作为碱性羧肽酶抑制剂和辅因子的铜离子和锌离子对抗体的电荷分布有着重要的影响。当培养基中铜离子浓度为50 nmol/L、锌离子浓度为50μmol/L时,最有利于减少抗体的电荷变体,提高主峰含量。过高或过低的铜离子和锌离子均导致了电荷变体的增加,主峰含量的降低。且两者的浓度和比例影响了抗体C末端赖氨酸的酶切过程,进而影响了碱性变体的含量。此外,对铜、锌离子的操作空间进行了初步的研究。金属离子在CHO细胞培养过程中对细胞的生长、抗体的表达以及抗体的电荷分布等方面都发挥着重要的作用。; 张鑫涛唐红萍赵亮范里刘旭平缪仕伟谭文松; 关键词：动物细胞培养电荷分布金属离子

适于NSO细胞大规模培养及抗体生产的无蛋白培养基: 本发明适于NSO细胞大规模培养及抗体生产的无蛋白培养基为一种化学成分明确的无蛋白培养基，其组合物中包括21种氨基酸、13种维生素、8种盐类、4种脂类、6种微量元素，以及孕酮、碳酸氢钠、Hepes、葡萄糖、柠檬酸、牛磺酸、...; 牛红星赵亮范里周燕谭文松; 文献传递

适于动物细胞高密度培养和产物表达的营养物添加剂: 本发明涉及现代生物技术领域，是适于动物细胞高密度培养和产物表达的营养物添加剂，其组分包括葡萄糖和8种氨基酸，在一升无热源超纯水中各成分的含量为：葡萄糖360～600、谷氨酰胺30～90、天冬酰胺2～8、脯氨酸10～20、...; 谭文松赵亮范里刘旭平周燕孙亚婷; 文献传递

MOI对HEK293细胞感染病毒后的生长代谢和腺病毒扩增效率的影响被引量：8: 2010年; 分别在方瓶贴壁和转瓶悬浮二种培养模式下,考察了感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)对HEK293细胞感染病毒后的生长代谢和腺病毒扩增效率的影响。通过实验发现,感染病毒后的细胞跟未感染病毒相比较,其细胞生长受到严重限制,但仍然保持着旺盛的代谢活动。结果表明:MOI对细胞感染病毒后的生长代谢和腺病毒扩增效率有显著影响。随着MOI增加,细胞死亡速率增加,其代谢速率也普遍上升。同时,MOI增加能有效地提高病毒感染率和单位细胞病毒颗粒数扩增效率,但过高的MOI亦会降低病毒滴度扩增效率,从而影响病毒包装质量。; 刘旭平范里朱明龙张旭谭文松; 关键词：HEK293细胞腺病毒

适于动物细胞表达产品大规模生产的化学成分明确培养基: 本发明公开一种适于动物细胞表达产品大规模生产的化学成分明确培养基，其成分至少包括14种氨基酸、8种维生素、10种无机盐、2种核酸类化合物、1种激素及生长因子、2种抗氧化剂、1种剪切保护剂、1种螯合剂和2种其他营养物。本发...; 谭文松孙亚婷赵亮范里刘旭平唐红萍; 文献传递

基于单纯型设计和部件搜索方法的CHO细胞无血清培养基的高通量优化被引量：5: 2014年; 氨基酸的浓度与配比对细胞生长和产物表达有重要作用。在自主研发无血清培养基的基础上,通过单纯型格子实验设计优化氨基酸浓度及配比后发现,优化的无血清培养基明显促进了细胞生长。生物反应器批式培养中,最高活细胞密度达52.6×105 cells·mL-1,抗体融合蛋白产量52.2 mg·L-1,相对于商业培养基Ex-cell 302,分别提高了26.7%和11.5%。在此基础上,通过部件搜索的方法确认具有显著正影响的氨基酸为谷氨酰胺、脯氨酸和甲硫氨酸。基于上述研究工作,在2 L反应器采用自主研发的优化无血清培养基,以葡萄糖为关键控制参数,进行两阶段动态流加培养过程,CHO细胞最大活细胞密度达94.6×105 cells·mL-1,抗体融合蛋白终产量600 mg·L-1,相对于商业培养基Ex-cell 302批式培养,分别提高了2.75倍和11.8倍。本研究工作为抗体融合蛋白的高效工业化生产奠定了基础。; 李晓璐范里赵亮陈飞谭文松; 关键词：CHO细胞无血清培养基

基于脂类代谢的DHFR-CHO细胞培养过程开发与优化被引量：1: 2016年; 通过对抗体高产(HP)、低产(LP)2个细胞培养过程进行研究发现,2个过程中脂类代谢差异明显。结果表明,HP中脂类干质量远大于LP过程,且其增速也较快,HP中最大脂类干质量达到(83.70±0.04)×10-9mg/cell,是LP的2.35倍;进一步通过细胞磷脂尼罗红荧光染色检测细胞磷脂含量发现,HP、LP细胞培养过程中细胞磷脂差异显著;随后对3种重要磷脂——磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)的合成前体A(氯化胆碱)、B(乙醇胺)、C(丝氨酸)、D(胞苷)4种因子通过2水平全析因试验设计进行分析,发现组分A对细胞生长、抗体表达影响极显著(P<0.01);最后通过正交试验对培养基中组分A进行浓度优化,以找出基础培养基和流加培养基中组分A的最适浓度。结果发现,基础培养基中组分A最优浓度为95.38 mg/L,流加培养基中最优浓度为189 mg/L;最终活细胞密度对时间累积积分(IVCC)达到79.16×109cells·d/L,提高了74.29%;抗体产量为2.04 g/L,增加了1.83倍;抗体比生成速率为34.07 mg/(109cells·d),提高了18.71%。基于脂类代谢分析,建立了高效经济的细胞培养过程,并为培养基的优化提供了依据,可为后续大规模单克隆抗体工业化生产奠定基础。; 蒋金龙范里谭文松; 关键词：脂类细胞生长单克隆抗体中国仓鼠卵巢细胞

培养过程对CHO细胞表达的单克隆抗体片段化的影响: 动物细胞培养技术是目前工业化生产许多高附加值产品,如疫苗、激素、单克隆抗体以及其它重组蛋白质药物的关键技术之一。基于动物细胞大规模培养技术生产的抗体类药物是当今治疗性生物技术产品的主流。单克隆抗体是一类糖基化蛋白,其完整...; 张理想谭文松范里

半乳糖流加对CHO细胞生长代谢及其表达的Fc融合蛋白糖基化的影响被引量：5: 2019年; 旨在深入认识补料分批培养过程中,以半乳糖替代葡萄糖作为碳源,对CHO细胞生长、代谢和产物表达的影响。通过将补料培养基中的葡萄糖用等摩尔的半乳糖进行替换,综合考察了不同比例替换条件下CHO细胞的生长代谢和Fc融合蛋白的产物合成特性。结果显示:摇瓶的数据表明60%比例以上半乳糖的替代对细胞的生长造成了不利影响,培养后期的pH出现了大幅上升。同时随着半乳糖替代比例的增加,虽然代谢副产物乳酸的浓度有明显下降,但氨的生成却显著增多;此外,培养过程中谷氨酸和丙氨酸的浓度也随着替代比例的增加而增加。产物表达方面,在较低替代比例内(0%-40%),Fc融合蛋白的表达量和总唾液酸含量都随着替代比例的增加而升高,而随着替代比例的进一步升高(60%-100%),两者都逐渐降低。最后,在反应器内通过对培养pH的稳定控制,40%半乳糖替代过程的产物表达量和总唾液酸含量分别提高了43%和37%。补料培养基中以半乳糖替代葡萄糖进行补料的方式,有效地提高了最终Fc融合蛋白的表达量和总唾液酸含量,有助于建立高产高质的CHO细胞培养过程。; 肖政范里谭文松; 关键词：半乳糖糖基化 FC融合蛋白

温度对CHO细胞表达抗体唾液酸含量和生物学活性的影响: 在CHO细胞培养过程中,适当降低培养温度能够显著提高抗体的比生产速率,有利于抗体的累积,但温度对抗体质量(包括唾液酸含量和生物学活性)的影响却知之甚少.本文采用反应器批培养方式,详细研究了温度对CHO 细胞表达抗体的唾液...; 寇天赐赵亮范里刘旭平周燕谭文松; 关键词：唾液酸生物学活性细胞培养细胞活性; 文献传递

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