蒋禄峰
- 作品数：8 被引量：43H指数：4
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- 牛病毒性腹泻病毒E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5对犊牛的免疫保护作用被引量：3
- 2019年
- 将构建的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,观察其对犊牛抗BVDV感染的免疫保护效果。选取1月龄犊牛,随机挑选20头分成4组,每组5只。1~3组为免疫组,分别口服接种1,5,10 mL重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5(1010 CFU/mL),共免疫3次,每次连续免疫3 d,每次免疫间隔1周;第4组为空白对照组。分别于免疫后0,10,20,30 d检测血清IgG和粪便sIgA的水平和白细胞介素-12(IL-12)表达水平。三免后7 d用BVDV攻毒,5 mL/只(105.5/mL TCID50),观察免疫犊牛对BVDV感染的免疫保护效果。结果显示,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛体内血清IgG抗体和粪便sIgA抗体含量、血清IL-12表达水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且对BVDV感染的保护率明显高于对照组。结果表明,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,可诱生血清IgG和粪便sIgA类抗体,提高机体IL-12表达水平,有效抵抗BVDV的感染。本试验为研制用于预防BVDV感染的嗜酸乳杆菌活载体疫苗提供依据。
- 陈颖彬李林夏颖王紫嫣刘义磊蒋禄峰包永占秦建华赵月兰
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E0基因嗜酸乳杆菌免疫保护
- 猪附红细胞体病流行病学调查及不同药物治疗效果被引量：12
- 2012年
- 对保定市猪附红细胞体病进行流行病学调查,并对感染附红体断奶仔猪进行药物治疗试验。选择保定市6个县区30个不同规模的猪场和20个散养户,随机采集不同年龄阶段猪血液样品2 040份,进行直接压片镜检、血液涂片染色镜检和碘制动试验等病原学检测;选择阳性断奶仔猪进行药物治疗试验。结果保定市猪附红细胞体感染率为74.25%,不同年龄阶段的猪不同季节均可感染附红细胞体;临床治疗及体外药敏试验结果表明,贝尼尔、咪唑苯脲、盐酸多西环素、磺胺间甲氧嘧啶和土霉素对断奶仔猪附红细胞病的治疗具有较好的效果,尤以盐酸多西环素效果最佳。
- 赵驻军蒋禄峰秦建华
- 关键词：猪附红细胞体流行病学疗效
- 河北省部分地区柔嫩艾美耳球虫野外分离株耐药性检测被引量：9
- 2015年
- 将柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)石家庄、沧州、保定、唐山分离株感染14日龄罗曼蛋公雏,每个地区设立5个用药组、1个感染不用药对照组和1个不感染不用药对照组,以POAA、RLS、ROP、ACI作为评定指标对该虫株对氯羟吡啶、莫能菌素、地克珠利、妥曲珠利、磺胺喹噁啉5种常用抗球虫药的抗药性进行了综合评定,分析了该地区球虫的抗药性及用药对策。结果表明:E.tenella石家庄分离株对氯羟吡啶呈完全抗药性,对莫能菌素、妥曲珠利、磺胺喹噁啉呈重度抗药,对地克珠利表现轻度抗药;E.tenella沧州分离株对氯羟吡啶、莫能菌素、地克珠利呈完全抗药性,对妥曲珠利、磺胺喹噁啉呈中度抗药;E.tenella保定分离株对氯羟吡啶呈完全抗药性,对妥曲珠利呈重度抗药,对莫能菌素、地克珠利、磺胺喹噁啉呈中度抗药;E.tenella唐山分离株对莫能菌素、妥曲珠利呈完全抗药性,对氯羟吡啶、地克珠利呈中度抗药,对磺胺喹噁啉呈轻度抗药。
- 蒋禄峰常丽云张晶张梦茜秦建华赵月兰包永占
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫抗球虫药耐药性
- 牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0的构建与免疫原性分析被引量：3
- 2014年
- 利用SacⅠ、HindⅢ限制性内切酶分别对pMG36e与pMD19-T-E0进行双酶切,将目的基因E0整合入穿梭表达载体pMG36e,构建牛病毒性腹泻病毒E0基因重组表达质粒pMG36e-E0。提取重组质粒pMG36e-E0,进行双酶切鉴定及PCR鉴定。将阳性重组质粒pMG36e-E0转化到大肠杆菌DH5α中进行表达,对表达产物进行SDSPAGE和Western-blotting鉴定。用表达的E0蛋白二次免疫家兔,间接ELISA法检测其血清抗体水平。结果,重组质粒经双酶切得到大小分别约为3 600、691bp的2个片段,PCR扩增出691bp的片段,双酶切与PCR鉴定结果表明目的基因E0正确插入到载体pMG36e中。SDS-PAGE电泳结果表明E0基因在大肠杆菌获得了表达,表达产物相对分子质量大小约为27 000。Western-blotting分析结果证明表达产物能被BVDV阳性血清所识别。ELISA检测结果证明表达的E0融合蛋白能刺激动物产生抗体,具有天然蛋白的免疫原性。
- 蒋禄峰赵月兰李苏楠吉星煜张晶张月王建永包永占秦建华
- 关键词：免疫原性
- 堆型艾美耳球虫3-1E重组质粒微球的制备及体外释放试验
- 2012年
- 用聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)将鸡堆型艾美耳球虫重组表达质粒pcDNA3.1-3-1E包封,采用水包油包水(W/O/W)双重乳化方法制备pcDNA3-3-1E/PLGA微球。通过正交试验设计优化PLGA微球制备工艺,考察PLGA浓度、聚乙烯醇(PVA)浓度、超声功率、复乳搅拌时间对评价指标(即微球粒径大小、包封率、载药量)的影响,确定制备微球的最佳工艺条件。测定微球的形态、粒径、完整性、质粒DNA包封率、载药量和释放程度;进行体外模拟鸡胃液和肠液试验,观察微球体外释药效果。结果显示,当PLGA浓度为8%、PVA浓度为1.5%、超声功率为60W、复乳搅拌6h为微球制备的最佳工艺参数,在光镜下呈散在圆形,粒径小于12μm。微球的包封率、载药量分别为84.25%和4.46%,裸质粒与微球中质粒超螺旋比例差距不显著,这表明在包被过程中的超螺旋质粒未发生明显的降解。在模拟鸡的胃肠液累积释放试验中,它的累积释放能力依次为pH 3.0>pH 7.4,载药微球在模拟鸡的胃肠液中24h释放26.8%,模拟肠液中24h释放11.2%,30d时体外累积释放率为81.7%,表明微球具有一定的缓释效果。
- 刘义伟常丽云蒋禄峰孟令慧赵月兰包永占秦建华
- 关键词：PLGA微球正交试验体外释药
- 牛病毒性腹泻病毒E0基因重组乳酸菌的制备及其免疫效果检测
- 牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒引起的临床上以发热、黏膜糜烂、溃疡、白细胞减少、腹泻、母畜流产或产畸型胎儿为主要特征。近年来我国乳牛进口数量急剧增加，该病已成为当前严重危害我国养殖业的传染病之一，给畜牧养殖业造成极为巨大...
- 蒋禄峰
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒嗜酸乳杆菌免疫效果
- 牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株E0基因的克隆与抗原表位预测被引量：4
- 2013年
- 根据GenBank上发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)Oregon C24V株E0基因的核苷酸序列设计1对特异性引物,应用PCR技术扩增BVDV HB-DCZ株E0基因。将PCR产物克隆到pMD18-T载体,克隆产物进行序列测定与分析。结果显示,HB-DCZ cDNA体外扩增获得特异性条带,约为687bp。序列测定结果表明,HB-DCZ株E0基因由681个核苷酸组成,编码227个氨基酸。与已公开发表的BVDV其他毒株核苷酸和推导氨基酸序列同源性相似顺序依次为:CCSYD 99%和98.7%、QHZK10 98.4%和97.8%、VEDEVAC 98.2%和97.8%、Oregon C24V80.9%和89.9%、Yak 74.2%和81.1%。HB-DCZ与CCSYD、QHZK10以及VEDEVAC株的遗传距离较近,与国际标准毒株C24V、Yak株的遗传距离较远。运用Kyte-Doolittle方案预测氨基酸的亲水性,采用Karplus-Schulz方案预测蛋白质的柔性区域,按Jameson-Wolf方案预测抗原指数,利用Emini方案预测蛋白质的表面可及性。对预测结果综合分析,推测最有可能的B细胞表位位于N-端6～17、23～29、47～53、59～68、70～81、97～109、114～122、127～134、137～143、165～172、186～198和213～220。
- 蒋禄峰赵月兰李苏楠常丽云张梦茜包永占秦建华
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E0基因克隆抗原表位预测
- 两种中药方剂对奶牛感染性腹泻的治疗效果被引量：11
- 2013年
- 为探讨两种中药方剂对奶牛感染性腹泻的治疗效果,选择河北省保定市某奶牛场人工感染轮状病毒(RV)和牛病毒性腹病毒(BVDV)的成年牛和犊牛为治疗对象。试验犊牛和成年牛均随机分为治疗组和对照组,各治疗组分别用两种中药方剂进行治疗,采用煎汤灌服,犊牛100g/次～150g/次,成年牛300g/次～500g/次,每天1次,连用3d～5d。对照组按牛场常规使用病毒唑及庆大霉素进行治疗。结果两种中药方剂对犊牛腹泻治愈率为70%～76%,有效率为90%～94%;成年病例治愈率为74%～80%,有效率为92%～96%。两种中药方剂对犊牛及成年牛感染性腹泻治疗效果明显优于临床上常用的抗病毒化药或抗生素(P<0.05)。
- 蒋禄峰秦建华张梦茜弓素梅包永占赵月兰
- 关键词：奶牛中药感染性腹泻疗效
