薛柯 作品数:7 被引量:22 H指数:3 供职机构: 西北大学生命科学学院西部资源生物与生物技术教育部重点实验室 更多>> 发文基金: 陕西省科技攻关计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
白藜芦醇的生物技术研究 2008年 白藜芦醇作为一种重要的植物抗毒素,具有多种医疗保健生理活性作用,被喻为继紫杉醇后的第二大抗癌药物。因此,对于白藜芦醇的研究特别是应用研究具有非常重要的现实意义。对白藜芦醇的生物合成、代谢机制以及白藜芦醇的生物技术应用研究等方面进行了综述。 姬婧媛 张展鹏 张变玲 薛柯 荆二勇 尉亚辉关键词:白藜芦醇 基因工程 细胞工程 代谢机制 转HBsAg基因樱桃番茄组培苗叶片总蛋白双向电泳体系的建立 被引量:4 2012年 建立转乙肝表面抗原(HbsAg)基因樱桃番茄组培苗叶片的蛋白质组双向电泳体系,为转基因番茄的蛋白质组学研究提供技术参数。比较转HBsAg基因的樱桃番茄与野生型在不同蛋白裂解液、不同蛋白上样量及不同等电聚焦程序下,叶片总蛋白的双向电泳结果差异。以裂解液Ⅲ制备叶片总蛋白,采用一向13cm、pH3-10L IPG胶条,二向12.5%的SDS-PAGE凝胶,单次上样120μg叶片总蛋白,聚焦程序Ⅲ,银染时,可以得到最理想的双向电泳分析结果。在此操作程序下,野生型樱桃番茄叶片蛋白双向电泳最多可识别699个蛋白点,而转基因型樱桃番茄叶片蛋白双向电泳最多可识别545个蛋白点,其中有368个点匹配,选取丰度百分比差异2倍以上蛋白点25个进行质谱鉴定,16个蛋白点成功鉴定。本研究建立的转HBsAg基因番茄植株叶片总蛋白的双向电泳体系可为以番茄试管苗为材料进行的蛋白质组学研究提供技术支持。 张超 郭斌 祁洋 孙杰 薛柯 戴佳锟 关正君 尉亚辉关键词:双向电泳 蛋白组 组培苗 重叠延伸PCR法克隆人脂联素基因及其在毕赤酵母中表达 被引量:3 2008年 利用重叠延伸PCR法克隆出人脂联素基因,连接至克隆载体pGEM-T中,转化大肠杆菌DH5α,通过测序对其进行序列分析后,进一步构建毕赤酵母表达载体pPIC3.5K-ADPN,通过电击法转化毕赤酵母GS115,转化的重组酵母菌用甲醇诱导外源基因表达。经PCR、Southern blotting鉴定,获得了重组毕赤酵母菌株;经甲醇诱导人脂联素基因表达,Western blotting杂交鉴定证明人脂联素基因已经在毕赤酵母中成功表达。结果表明重叠延伸PCR法准确方便克隆出人脂联素基因,在30oC,1%甲醇诱导48h,人脂联素基因在巴斯德毕赤酵母中的表达最佳。 张变玲 张儒 姬婧媛 薛柯 荆二勇 张展鹏 尉亚辉关键词:重叠延伸PCR 巴斯德毕赤酵母 BLOTTING BLOTTING 植物口服疫苗及其安全性研究进展 被引量:1 2008年 随着生物技术的不断进步,人们利用转基因技术定向改造现有植物品种的研究已经取得可喜的成绩。其中利用植物材料作为生物反应器生产口服疫苗更是近年来的热点。主要介绍了植物口服疫苗的研究进展,对于存在的问题提出了解决方法。 薛柯 尉亚辉 张变玲 荆二勇 姬婧媛 张展鹏关键词:转基因 安全性 转基因番茄表达口服乙肝疫苗 被引量:13 2007年 将构建好的植物表达载体pCAMBIA1301/HB转化到根癌农杆菌LBA4404中,并通过农杆菌介导转化番茄。所得再生植株经PCR和Southern杂交鉴定确认成功整合了HBsAg(hepatitis B surface antigen)基因,SDS-PAGE显示蛋白表达与非转化植株相比有明显差异,ELISA检测和Western blotting证实HBsAg已在转化植株中表达,分子量约为24kD。 郝浩永 尉亚辉 朱剑光 孙杰 王娅宁 荆二勇 张变玲 薛柯关键词:口服疫苗 乙型肝炎表面抗原 番茄 转基因植物 基因插入导致番茄表型变异及其蛋白质组差异分析 本实验将整合有乙肝表面抗原(HBsAg)基因的樱桃番茄无菌苗,拣苗后移栽到FR间种植,通过适当的管理,获得了转基因番茄植株。主要取得了以下进展:1.通过PCR鉴定,HBsAg基因仍保留在转化植株中,初步说明外源基因HBs... 薛柯关键词:蛋白质组 转基因番茄 番茄植株 樱桃番茄 文献传递 营养基因组学及其对食品产业的影响 2008年 生命科学已进入后基因组时代,营养科学也试图从分子学的角度找出食物中的某些化学物质怎样通过改变基因表达和个体的基因组结构而对人类的健康产生影响,因此营养基因组学的发展将对食品开发产生巨大影响。 荆二勇 王慧芳 张变玲 薛柯 尉亚辉关键词:营养基因组学 基因多态性 食品产业