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藏振林
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1
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湖南省人民医院
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发文基金:
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相关领域:
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彭建强
湖南省人民医院
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彭建强
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藏振林
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2010
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rAAV1-Luc病毒制备及体外转染大鼠心肌细胞的研究
2010年
【目的】制备携带萤火虫荧光素酶基因的重组AAV1病毒(rAAV1-Luc),观察该病毒载体体外转染大鼠心肌细胞培养细胞。【方法】通过“一株载体细胞/一株辅助病毒”的双因素包装策略制备出rAAV1-Luc,AAV1-Luc按转染复数(MOI)1×10^2、1×10^3、1×10^4、1×10^5、1×10^6、2×10^6v.g./cell转染大鼠心肌细胞(H9C2细胞)96h后,检测荧光素酶的表量,并在光镜下观察转染后细胞生长形态。【结果】成功的制备了重组AAV1-Luc;rAAV1-Luc能有效地转染H9C2细胞,转染后,细胞生长及形态正常;一定范围内,随着rAAV1-Luc转染细胞的MOI(即每个细胞感染的病毒基因组数)值增高,荧光素酶的表达水平也增高,MOI为1×10^6但表达量达到最高,更高的MOI(大于10^7)反而使荧光素酶的表达水平下降。【结论】本研究为开展rAAV1载体介导转移心肌细胞的基因治疗打下了良好的基础。
彭建强
藏振林
曹晖
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