赵禹
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：天津医科大学天津市内分泌研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 氟中毒大鼠雌激素改变和骨病变的关系
- 目的:制备氟中毒大鼠动物模型;观察不同程度氟中毒大鼠雌激素水平和骨病变的相关性.方法:制备氟中毒大鼠动物模型:选择实验用Wistar大鼠80只,体重120～150g.随机分四组,每组雌雄各半,在同一条下正常饲料持续喂养9...
- 张墨玲乔玲陈昆明刘嘉玉赵禹
- 文献传递
- 人TRAb噬菌体抗体库的初建
- 该实验的目的是通过半套式RT-PCR扩增甲亢(Graves病)患者样品单个核细胞中抗体可变区编码基因V<,H>,V<,L>,并运用重叠伸展PCR技术将连接序列(Gly<,3>Ser)<,3>组装成单链基因(ScFv)并克...
- 赵禹
- 关键词：GRAVES病促甲状腺激素受体抗体甲状腺刺激抗体
- 文献传递
- 电转化技术在噬菌体抗体库构建中的应用被引量：4
- 2002年
- 目的 :探讨电转化技术在构建噬菌体抗体库中的应用价值。方法 :用国产电转化仪将重组噬菌粒p3 -V2转化入E.COLIXL1-Blue中。结果 :应用电转化技术构建噬菌体抗体库库容为 :3.9×107单个scFv重组子 ,其转化效率为 :107～108 转化子/μg ,本实验最佳条件为场强 (7.5kv/cm) ,电容 (21.0μF) ,细菌浓度 (XL1 -Blue :4.0×1010/ml) ,外源DNA量 (p3 -V2:0.6μg)。结论 :经优化电转化条件 。
- 赵禹侯秉璋乔玲刘嘉玉张墨玲李颖利陈昆明
- 关键词：噬菌体抗体库库容
- 人源性TRAb组合文库的构建
- 目的:TBH受体自身抗体(TRAb)是一种抗甲状腺抗体.它可与TBH受体竞争性结合,依其对甲状腺的刺激或抑制的生物学效应可分别称之为TSAb、TSBAb.为了解TRAb基因分子结构,从分子水平探讨自身免疫甲状腺疾病(AI...
- 侯秉璋赵禹刘嘉玉张墨玲乔玲陈昆明
- 文献传递
- Graves病自身免疫单链抗体库的构建及抗甲状腺单抗的筛选
- 2003年
- 目的 Graves病属于甲状腺自身免疫性疾病 (AITD) ,其患者血中存在多种抗甲状腺自身抗体 ,其中包括TGAb、TPOAb以及TRAb。单链抗体 (ScFv)是以连接肽将重链可变区基因 (VH)和轻链可变区基因 (VL)连接起来形成的单链小分子抗体。为了获得人源性抗甲状腺抗体 ,分析其基因结构 ,进一步研究AITD的发病机理 ,我们构建了人源性噬菌体ScFv库。方法 采取Graves病人静脉血 ,用淋巴细胞分层液按常规分离单个核细胞。提取淋巴细胞总RNA逆转录合成cDNA。分别扩增出全套的免疫球蛋白VL 链和VH 链基因 ,利用重叠PCR方法 ,构建ScFv基因。重组到 p3SCMH嗜菌粒中 ,电穿孔转化XL1 Blue大肠杆菌。经适当培养后 ,加入约 10 12 空斑形成单位 (PFU)的辅助噬菌体VCSM13,构建噬菌体抗体库。测定库容 ,鉴定重组率。以固相化的抗原对噬菌体ScFv库进行了 4轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选 ,富集特异性噬菌体抗体。用ELISA竞争抑制实验检测富集的噬菌体抗体。结果 以单链cDNA为模板 ,用PCR方法分别扩增VL 链和VH 链的DNA。PCR产物经 15g·L-1琼脂糖电泳检测 ,分别在 380bp和 4 2 0bp左右见到扩增带。将VL 和VH 进行重叠PCR制备ScFv ,琼脂糖电泳显示PCR产物在 80 0bp左右有扩增带。将ScFv基因纯化 ,用SacⅠ+SpeⅠ双酶消化后 ,重组到
- 侯秉璋陈昆明乔铃赵禹刘嘉玉张墨玲
- 关键词：GRAVES病基因多态性白细胞粒细胞
