邢燕平
- 作品数：16 被引量：14H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 双峰驼clusterin基因的克隆及功能分析
- 2015年
- 为了研究双峰驼clusterin基因真核表达载体的构建及其生理功能,试验采用深圳华大公司提供的clusterin基因片段序列设计PCR引物,以双峰驼肾脏RNA反转录获得的cDNA为模板进行PCR,结合RACE技术获得基因编码序列,将测序结果正确的序列连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体,转染海拉细胞。结果表明:PCR产物及酶切片段大小符合预期结果,测序结果与相应寡核苷酸序列一致并成功转染海拉细胞。说明双峰驼clusterin基因真核表达载体构建成功,并成功将骆驼clusterin基因转入海拉细胞,可用于进一步研究clusterin基因在体内的生理功能。
- 苏晓田邢燕平王瑞瑶王亚娟闫涛李浩天周欢敏
- 关键词：双峰驼CLUSTERINPEGFP-N1转染
- 苜蓿花叶病毒复制酶基因全长cDNA植物表达载体的构建和对烟草的转化被引量：1
- 2004年
- 将苜蓿花叶病毒中国分离株(AlfalfamosaicvirusChineseisolate,A1MV-Ch)的复制酶P2亚基(90kD蛋白)基因的全长cDNA构建到植物表达载体pROK 中,得到重组植物表达载体pAlMV-FL.用三亲融合法导入农杆菌LBA4404,并转化烟草,经PCR检测,获得了含全长cDNA的转基因烟草植株.
- 张竞秋邢燕平哈斯阿古拉
- 关键词：苜蓿花叶病毒复制酶基因植物表达载体转基因
- 苜蓿花叶病毒复制酶基因全长cDNA植物表达载体的构建
- 2005年
- 将苜蓿花叶病毒中国分离株(A lfalfa m osaic v irus Ch inese iso late,A lMV-Ch)的复制酶P2亚基(90 KD蛋白)基因的全长cDNA构建到植物表达载体pROKⅡ中,得到重组植物表达载体pA lMV-FL.
- 张竞秋邢燕平哈斯阿古拉
- 关键词：苜蓿花叶病毒复制酶基因植物表达载体
- 一种新型高强度羊毛
- 本发明公开了一种新型高强度羊毛，属于生物工程技术领域。本发明利用转基因技术和胚胎移植的方法，制备了以毛囊特异表达载体表达拟蜘蛛牵丝蛋白基因的克隆羊。将蜘蛛丝与羊毛的优点相结合，得到了平均拉伸度增加1.6倍的蛛丝毛羊。利用...
- 孟凡华张东王申元周欢敏刘羿羿张焱如刘春霞曹俊伟张立邢燕平李璐
- 文献传递
- 基于皮肤组织转录组数据研究水牛与黄牛温度适应性的差异被引量：1
- 2017年
- 为了找到与水牛和黄牛温度适应性差异相关的信号通路,本研究对3头成年水牛和3头成年黄牛的皮肤组织进行了转录组测序和生物信息学分析。结果显示,测序后水牛和黄牛皮肤组织分别得到59 369 167和69 837 009条reads,与参考基因组的唯一比对率分别为70.76%和75.55%。水牛和黄牛皮肤组织共有1 611个差异表达基因,其中801个在水牛皮肤中上调,810个在水牛皮肤中下调。GO分析结果显示,注释到细胞组分、分子功能、生物学过程的差异表达基因分别为316、263和278个。KEGG分析结果显示,差异表达基因共富集在33条信号通路上,其中神经活性配体—受体相互作用、氧化磷酸化、胆碱能突触、5-羟色胺能神经突触、GABA能突触、钙信号通路等信号通路可能与水牛和黄牛在温度适应性上的差异相关。综上所述,突触与氧化磷酸化可能与水牛和黄牛之间的温度适应性差异有关,本研究为进一步了解水牛和黄牛对温度适应性差异的分子机制和分子育种奠定基础。
- 齐昱邢燕平潘静凌宇曹宇孟凡华荆文魁
- 关键词：转录组差异表达基因皮肤水牛黄牛
- 牛偏爱密码子优化后的Beta蛋白多克隆抗体制备
- 2015年
- 本研究旨在优化λ噬菌体bet基因,使其能够在牛细胞中高效表达,通过密码子优化及全基因合成方法制备牛bet基因,并进行原核表达和多克隆抗体制备及抗体效价评估。从GenBank中获得λ噬菌体bet基因的序列,登录号为AP005153,用牛偏爱密码子对其进行优化并将其合成。根据优化后的基因序列设计引物,用PCR扩增优化后的bet基因,随后将其克隆到pET28原核表达载体,并转化入大肠杆菌BL21中进行诱导表达。表达的蛋白产物利用亲和层析的方法进行纯化,用His tag的抗体进行Western blot鉴定。用纯化后的蛋白免疫CD1小鼠,得到抗Beta蛋白的血清,通过ELISA测定该多克隆抗体的滴度。结果表明:通过双酶切和测序,成功挑选出正确的原核表达质粒pET-bet;SDS-PAGE,电泳结果显示融合蛋白表达成功;用纯化后的蛋白免疫试验鼠后得到多克隆抗体,经Western blot检测,该多克隆抗体能与His-Beta融合蛋白特异性结合;经ELISA方法检测该多克隆抗体的滴度为1∶41 700。成功地制备了Beta蛋白的多克隆抗体,为深入探索bet基因的生物学功能和在牛及大型哺乳动物中的应用奠定了基础。
- 齐昱邢燕平周欢敏房君钱呈王海涛
- 关键词：密码子优化原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 绵羊角蛋白Kap6.1启动子的克隆及活性检测被引量：2
- 2012年
- 克隆绵羊角蛋白Kap6.1启动子,为下一步构建真核毛囊特异表达载体奠定基础。以绵羊基因组为模板,利用PCR方法克隆绵羊角蛋白结合蛋白Kap6.1启动子,并用此启动子置换真核表达载体pEGFP-N1的原始启动子CMV,构建pKap-EGFP质粒,通过转染内蒙古阿尔巴斯绒山羊胎儿皮肤成纤维细胞鉴定启动子活性。结果显示:克隆所获得的启动子序列与NCBI上发表序列匹配率为99.6%,启动子的特征序列CAAT框和TATA框完整,并且分别位于序列的921位和878位,pKap-EGFP质粒转染绒山羊成纤维细胞后Kap能启动GFP的表达,与对照组相比活性良好。本研究通过克隆获得了绵羊角蛋白结合蛋白Kap6.1启动子,并观测到其能启动GFP在山羊胎儿皮肤成纤维细胞中表达。
- 孟凡华王海涛房君邢燕平周欢敏
- 关键词：启动子克隆转染
- 一种新型高强度羊毛
- 本发明公开了一种新型高强度羊毛，属于生物工程技术领域。本发明利用转基因技术和胚胎移植的方法，制备了以毛囊特异表达载体表达拟蜘蛛牵丝蛋白基因的克隆羊。将蜘蛛丝与羊毛的优点相结合，得到了平均拉伸度增加1.6倍的蛛丝毛羊。利用...
- 孟凡华张东王申元周欢敏刘羿羿张焱如刘春霞曹俊伟张立邢燕平李璐
- 文献传递
- 小麦穗发芽抗性相关基因TaAFP的原核表达、多克隆抗体制备方法及检测
- 本发明公开了小麦穗发芽抗性相关基因TaAFP基因的原核表达及多克隆抗体制备与检测。基于TaAFP的基因序列，分析并合成密码子构建到原核表达载体pET‑28a中；重组蛋白经原核表达并纯化，免疫Balb/C小鼠制备His‑T...
- 杨燕韩洋冯玉梅韩冰李淑芬邢燕平
- 蒙古绵羊肌肉生长抑制素基因敲除载体的构建被引量：1
- 2015年
- 针对蒙古绵羊肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因序列的第3外显子,选择设计并合成了含有限制性内切酶酶切位点及含有与敲除载体同源20bp碱基的2种引物。以蒙古绵羊的血液DNA为模板,利用PCR分别扩增出2套用于敲除载体的同源长短臂。将这2套同源长短臂分别连接到2个不同的基础载体pPNTⅢ和pEGFP-N1中,构建2套用于蒙古绵羊MSTN基因敲除的置换型打靶载体pPNTⅢ-S21-L32和pEGFP-N1-S0-L0,其中pPNTⅢ-S21-L32为含有正负筛选标记基因的传统敲除载体,pEGFP-N1-S0-L0为优化后正筛选标记基因为绿色荧光加强的敲除载体。经PCR、T载体连接、酶切鉴定和DNA测序证实,2套同源臂分别被正确插入到基础载体中。本研究构建的2套用于蒙古绵羊肌肉生长抑制素基因敲除的置换型打靶载体,为改善家畜产肉性状,增加肌肉质量奠定了基础。
- 赵瑞媛时培文刘春霞邢燕平苏小虎周欢敏
- 关键词：蒙古绵羊MSTN基因基因敲除
