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郭文文: 作品数：11 被引量：4H指数：1; 供职机构：广西医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西中医学院课题更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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卵巢癌细胞中OY-TES-1基因启动子CpG位点甲基化状态分析: 2011年; 目的：了解卵巢癌SKOV3细胞中OY-TES-1启动子区域CpG位点的甲基化状态。方法：运用免疫细胞化学法检测SKOV3细胞中OY-TES-1蛋白表达；通过硫化测序PCR法，分析SKOV3细胞中OY-TES-1启动子区域CpG位点的甲基化状态，并与睾丸组织相比较。结果：免疫细胞化学法检测结果显示，SKOV3细胞中OY-TES-1蛋白呈阳性反应；在检测的OY-TES-1启动子区域（转录起始点-127bp-＋110bp，含24个CpG位点）中，CpG位点的甲基化频率为80．21％，其甲基化状态明显高于睾丸组织。结论：SKOV3细胞中OY-TES-1启动子CpG位点处于高甲基化状态，进一步可探讨甲基化抑制剂氮杂脱氧胞嘧啶对OY-TES-1甲基化状态及其表达水平的影响。; 范蓉黄巍郭文文王炜炜罗彬宋慧肖绍文谢小薰; 关键词：癌-睾丸抗原卵巢癌 CPG 甲基化 OY-TES-1

人骨髓间充质干细胞的体外连续传代及鉴定被引量：1: 2012年; [目的]将成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)进行体外连续传代并对其进行干细胞特性的鉴定。[方法]采用不连续密度梯度离心法进行人骨髓间充质干细胞的分离,使用含10%胎牛血清的L-DMEM进行体外培养,经胰蛋白酶和EDTA联合消化法体外连续传代至P5代后,对其进行生长曲线的测定、细胞周期和表面分子标志物的检测以及多向分化潜能的观察。[结果]本实验可将hMSCs体外连续传至P5代,P5代hMSCs在保持良好的分裂增殖能力的同时,表达hMSCs的表面分子标志物及保持多向分化潜能。[结论]本实验成功地将人hMSCs进行体外连续传代并保持其干细胞的特性。; 岑妍慧何国珍郭文文陈芳肖燕子玉光强; 关键词：HMSCS 体外培养连续传代

OY-TES-1诱导的树突状细胞对T淋巴细胞的增殖活化作用: 2011年; 目的通过癌-睾丸抗原OY-TES-1致敏树突状细胞(DC),研究其对T淋巴细胞的增殖活化作用。方法体外诱导培养人外周血DC,观察其细胞形态并经流式细胞仪进行表型鉴定;分别用OY-TES-1融合蛋白(OY-MBP)、麦芽糖结合蛋白(MBP)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)致敏DC,与T淋巴细胞共同培养。CCK-8法检测不同蛋白致敏DC后T淋巴细胞的增殖,ELISA检测致敏DC与T淋巴细胞共同培养后上清液IFN-γ的含量。结果诱导出高表达HLA-DR、CD86、CD83和CD80并具有典型细胞特征的DC。经不同蛋白致敏的DC均能促进T淋巴细胞的增殖活化,其中OY-MBP致敏的DC促进T淋巴细胞增殖的能力明显强于其他各组(P<0.05),IFN-γ分泌量也明显高于其他各组(P<0.05)。结论 DC在体外经OY-TES-1融合蛋白致敏后,可显著促进T淋巴细胞的增殖活化。; 李静郭文文罗彬陈芳王炜炜肖绍文谢小薰; 关键词：树突状细胞 OY-TES-1 T淋巴细胞

睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析: 2011年; 目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法(BSP)分析目的基因CpG位点的甲基化状态。结果免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白。对ACRBP启动子序列(转录起始点-127～+110 bp)进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67%。结论生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关;ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关。; 黄巍范蓉李希圣郭文文罗彬宋慧肖绍文谢小薰; 关键词：睾丸甲基化

体外诱导胰腺干细胞向胰岛样细胞团的分化被引量：1: 2012年; 背景:目前由于胰岛来源匮乏,使得胰岛细胞移植治疗糖尿病无法满足临床需求,故体外将胰腺干细胞诱导分化为胰岛成为研究焦点。目的:于体外将小鼠胰腺干细胞诱导成胰岛样细胞团并对其进行相关检测,探寻一种胰腺干细胞体外诱导分化成胰岛及鉴定的技术和方法。方法:体外获得纯化的小鼠胰腺干细胞,采用联合诱导剂对其进行成胰岛方向的诱导分化,并对诱导形成的胰岛样细胞团进行形态学观察、双硫腙染色、RT-PCR和Western blot检测。结果与结论:实验通过细胞形态学和细胞生长特性的观察以及免疫细胞化学染色证实体外成功获得了小鼠胰腺干细胞,采用联合诱导剂将其诱导成胰岛样结构,呈球形,以较细长的蒂部与瓶底连接,双硫腙染色将其染成铁红色。RT-PCR和Western blot法可分别检测到胰岛样细胞团的胰岛素mRNA和胰岛素蛋白。结果证实小鼠胰腺干细胞可体外诱导分化成含β细胞的胰岛样细胞团。; 岑妍慧谢小薰陈维平何国珍黄波郭文文肖燕子; 关键词：胰腺干细胞胰岛样细胞团干细胞培养小鼠

癌-睾丸抗原SPAG9/CT89与肿瘤被引量：1: 2012年; 精子相关抗原9是癌睾丸抗原家族成员之一,它具有能在多种肿瘤组织中广泛表达,而在正常组织(除胎盘和睾丸外)中几乎不表达的特性,并能在肿瘤患者体内引起体液免疫。研究结果显示,SPAG9有可能成为肿瘤免疫治疗和肿瘤辅助诊断的潜在靶点。本文将对SPAG9的结构、表达特性、免疫原性及功能进行阐述。; 郭文文肖燕子罗彬谢小薰; 关键词：肿瘤免疫治疗

卵巢癌细胞中OY-TES-1表达及其启动子CpG位点甲基化状态的分析: 本研究运用免疫细胞化学法检测SKOV3细胞中目的蛋白表达,利用RNAi技术研究特异性siRNA对卵巢癌SKOV3细胞中目的蛋白表达的影响;通过硫化测序PCR法,分析SKOV3细胞中OY-TES-1启动子区域CpG位点的甲...; 范蓉黄巍郭文文王炜炜罗彬宋慧张庆梅谢小薰

RNAi下调OY-TES-1表达对肝癌细胞生物学行为的影响: 癌-睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)是一类肿瘤相关性抗原,其在各种肿瘤组织表达,而在正常组织(除睾丸、卵巢和胎盘外)基本不表达。OY-TES-1是CTA家族的一员,前期研究发现其在肝癌中表达...; 付骏郭文文张庆梅农蔚霞谢莎陈芳罗彬谢小薰

特异性siRNA对卵巢癌SKOV3细胞中OY-TES-1蛋白表达的抑制作用: 2011年; 目的:探讨特异性siRNA对卵巢癌SKOV3细胞中肿瘤-睾丸抗原OY-TES-1蛋白表达的影响。方法:针对OY-TES-1基因设计、化学方法合成的siRNA通过脂质体转染体外培养的卵巢癌SKOV3细胞,在转染后24、36、48、72 h,通过免疫细胞化学检测OY-TES-1蛋白的表达水平。结果:靶向OY-TES-1基因siRNA转染SKOV3细胞后,OY-TES-1蛋白的表达明显降低,其抑制作用在转染后24 h出现,转染后36 h几乎完全被抑制,转染后72 h开始出现RNAi衰减现象。结论:OY-TES-1特异性siRNA(1 486～1 504)序列可在体外有效地干扰SKOV3细胞中OY-TES-1基因的表达。; 范蓉郭文文黄巍闫光华王炜炜罗彬肖绍文谢小薰; 关键词：RNA干扰卵巢癌细胞 OY-TES-1 肿瘤-睾丸抗原