郭睿
- 作品数：35 被引量：61H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人源性纤溶酶原Kringle5基因杆状病毒表达载体构建及蛋白表达纯化
- 2009年
- 目的构建重组人源性纤溶酶原Kringle5（rhK5）杆状病毒表达载体并进行真核表达。方法采用bac-to—bac杆状病毒表达系统制备杆状病毒Bacmid—rhK5，感染草地贪夜蛾卵巢细胞sf21昆虫细胞，经Westernblot确定rhK5在sf21细胞中的表达方式和表达量。用血管内皮细胞抑制实验检测纯化蛋白活性。结果杆状病毒表达载体pFastBacHTB-rhK5构建成功，Westernblot检测发现，rhK5在sf21细胞中呈胞内表达，纯化后重组蛋白的产量约为90μg／L。血管内皮细胞抑制实验显示，半数有效剂量（ED50）为4μg／mL。结论rhK5杆状病毒表达载体于悬浮培养的sf21细胞中高效表达，为大量表达更接近天然的具有生物学活性的rhK5蛋白奠定了基础。
- 董丽郭睿李彪
- 关键词：纤溶酶原表达载体构建人源性WESTERNBLOT
- ^(18)F-FDG PET/CT对腹部增强CT术前评估胰腺癌远处转移的增益价值被引量：3
- 2014年
- 目的研究18F-FDG PET/CT对腹部增强CT术前评估胰腺癌远处转移的增益价值。方法回顾分析51例胰腺癌患者的腹部增强CT和18F-FDG PET/CT资料。通过增强CT、增强CT结合18F-FDG PET/CT评估胰腺癌是否发生远处转移,以病理或随访结果为金标准,分析18F-FDG PET/CT的增益价值。结果增强CT结合18F-FDG PET/CT诊断胰腺癌远处转移的灵敏度、特异度和准确度分别为94.2%(33/35)、100%(16/16)、96.1%(49/51),与单独增强CT的71.4%(25/35)、100%(16/16)、76.5%(41/51)相比,灵敏度和准确度的差异有统计学意义(χ2=6.43,P=0.011;χ2=6.04,P=0.014)。共有26例患者增强CT未检出远处转移,结合18F-FDG PET/CT后,其中6例接近肝包膜直径6.7~9.8 mm的肝转移和2例肺转移被检出。另25例增强CT检出远处转移的患者,结合18F-FDG PET/CT后,评估结果未发生改变。结论18F-FDG PET/CT对于腹部增强CT未检出远处转移的胰腺癌患者有增益价值,尤其是肝内有直径<1 cm且接近肝包膜的微小病灶患者。
- 徐枫席云张敏江旭峰郭睿李彪
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤转移PET/CT
- 早期生长反应基因1启动子介导肿瘤基因-放疗的研究进展被引量：1
- 2010年
- 早期生长反应基因1（Egr-1）启动子为Egr-1上游的顺式作用元件,其活性受电离辐射、自由基等诱导剂的调控.Egr-1与治疗基因结合（如肿瘤坏死因子α基因、自杀基因等）构成基因-放射治疗体系,利用辐射在肿瘤局部从时间、空间调控治疗基因的表达,使表达产物局限于肿瘤局部发挥肿瘤杀伤效应,并降低了不良反应.放射治疗与基因治疗的结合为肿瘤治疗提供了新方法.
- 郭睿李彪
- 关键词：基因表达调控放射疗法早期生长反应基因1
- 骨髓间充质干细胞介导NIS基因及金纳米颗粒治疗乳腺癌的实验研究被引量：3
- 2020年
- 目的制备转染治疗基因早期生长反应蛋白1(Egr1)-钠碘同向转运体(NIS)并携带金纳米颗粒(AuNPs)的骨髓间充质干细胞(BMSCs),探讨Egr1对NIS表达的促进和AuNPs的辐射增敏作用。方法采用慢病毒(Lv)-Egr1-NIS-巨细胞病毒(CMV)-绿色荧光蛋白(GFP)及Lv-Egr1-GFP颗粒对BMSCs进行基因转染,制备BMSCs-Egr1-NIS及BMSCs-Egr1-GFP(对照)。通过摄碘实验验证在不同放射性浓度碘诱导下NIS基因的表达;用激光共聚焦显微镜观察BMSCs吞噬AuNPs的最佳温育时间、质量浓度;进行细胞毒性实验,分析AuNPs对BMSCs-Egr1-NIS细胞活性的影响;通过摄碘实验研究BMSCs-Egr1-NIS吞噬和未吞噬AuNPs对基因表达的影响;用细胞迁移实验验证BMSCs-Egr1-NIS在吞噬和未吞噬AuNPs的情况下对乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外靶向性;探索不同质量浓度AuNPs对131I杀伤乳腺癌细胞MDA-MB-231的辐射增敏作用。采用单因素方差分析及Dunnett t检验比较多组间数据差异。结果成功制备转染治疗基因Egr1-NIS的BMSCs(非稳转),即BMSCs-Egr1-NIS。在辐射诱导下Egr1可以增加NIS的表达,BMSCs-Egr1-NIS较BMSCs-Egr1-GFP摄碘能力提高2.5~5倍或更高;BMSCs吞噬AuNPs的最佳温育条件是AuNPs 0.20 g/L温育24 h或者0.10 g/L温育48 h;AuNPs的细胞毒性非常低,对细胞的摄碘能力和体外靶向性没有影响;BMSCs-Egr1-NIS对乳腺癌细胞MDA-MB-231具有体外靶向性;AuNPs对131I的辐射增敏实验示,各131I杀伤组与无131I的空白对照组活细胞染色吸光度(A)570差异有统计学意义(F=60.670,P<0.01),AuNPs质量浓度为0.20和0.40 g/L的实验组131I对MDA-MB-231细胞的杀伤作用高于0 g/L组,A570 nm值分别为0.87±0.05、0.41±0.07和1.39±0.11(均P<0.01)。结论BMSCs可转染治疗基因Egr1-NIS并携带AuNPs,作为靶向乳腺癌的载体,在放射性碘的作用下增强NIS基因表达,同时AuNPs可作为131I治疗的辐射增敏剂。
- 张璐郭睿郑本超苗莹张春富李彪
- 关键词：间质干细胞钠碘转运体金属纳米粒子
- 钠碘同向转运体基因介导放射性碘治疗肿瘤的研究进展被引量：1
- 2010年
- 钠碘同向转运体（NIS）作为一种细胞膜蛋白，主要存在于甲状腺滤泡细胞基底膜并介导细胞的碘转运，在甲状腺癌及非甲状腺癌的放射性碘治疗研究中备受关注。部分甲状腺癌的NIS表达水平降低或者膜蛋白定位不好，通过导入NIS基因进行膜表达，介导核素滞留于细胞内，是肿瘤治疗的新途径。但目前主要存在核素在细胞内滞留时间短而影响疗效的问题。对此，在导入NIS基因后，可通过各种方法刺激肿瘤细胞增加NIS的功能性表达而增加核素的摄取，也可通过减少核素的流出来提高其滞留，扩展NIS基因治疗的应用范围，优化肿瘤治疗。该文主要综述了NIS基因介导的肿瘤治疗研究进展。
- 郭睿李彪
- 关键词：碘放射性同位素甲状腺肿瘤基因疗法钠碘同向转运体
- 人端粒酶反转录酶启动子调控人钠碘同向转运体基因肿瘤靶向治疗的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨肿瘤特异性人端粒酶反转录酶(hTERT)启动子调控的人钠碘同向转运体(hNIS)的特异性抗肿瘤作用。方法:将质粒pcDNA3.1-CMV-hNIS中的hNIS cDNA亚克隆至含hTERT核心启动子的质粒载体pGL3-hTERT-luc中,以构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,并以质粒pGL3-hTERT-luc及pcDNA3.1-CMV-hNIS分别作为阴性对照及阳性对照,然后采用脂质体将其转染至人胚肺成纤维细胞MRC-5及肿瘤细胞HeLa、A549和U87中,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测hNIS mRNA水平;免疫细胞化学法及流式细胞术(FCM)检测hNIS蛋白的表达情况;摄碘实验验证hNIS蛋白的功能;同时采用MTT观察131I的细胞杀伤作用。结果:成功构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,转染4种细胞后,3种肿瘤细胞的hNIS mRNA水平明显高于MRC-5细胞(P<0.05)。3种肿瘤细胞均可表达hNIS蛋白,而MRC-5细胞不表达。与Na125I孵育30 min时HeLa、A549和U87细胞的摄碘量分别是阴性对照组的25倍、20倍和18倍。131I照射7 h后,3种肿瘤细胞的相对存活率显著下降(P<0.05)。结论:hTERT启动子调控hNIS基因在肿瘤细胞中特异性表达,这些细胞可特异性摄碘并被其有效杀伤,为行进一步体内实验奠定基础。
- 薛丽喆张敏郭睿李彪
- 关键词：核心启动子
- 经钠碘同向转运体监测骨髓间充质干细胞向颅内脑胶质瘤迁移的实验研究被引量：4
- 2015年
- 目的通过制备携带NIS及EGFP基因的重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞（BMSCs），探讨NIS基因监测BMSCs向颅内脑胶质瘤迁移的可行性。方法将NIS及EGFP基因片段分别亚克隆至慢病毒载体pLVX-puro，制备慢病毒pLVX-CMV-NIS-EGFP，同时构建对照组慢病毒pLVX-CMV-O-EGFP。分离培养BMSCs，转染后经嘌呤霉素筛选，得到稳定干细胞株BMSCs-NIS-EGFP及对照组干细胞株BMSCs-EGFP。Westernblot分析NIS蛋白在细胞中的表达。通过摄碘实验、NaClO4抑制实验验证NIS蛋白的功能。制备裸鼠颅内脑胶质瘤模型，经尾静脉注入BMSCs-NIS-EGFP，24h后行125^ImicroSPECT显像，观察N1S作为报告基因监测BMSCs-NIS-EGFP向颅内脑胶质瘤迁移的情况。结果成功构建并制备重组慢病毒pLVX-CMV-NIS-EGFP及pLVX-CMV一0-EGFP，完成BMSCs的分离培养。病毒转染经嘌呤霉素筛选得到稳定干细胞株BMSCs-NIS-EGFP及BMSCs-EGFP。Westernblot显示NIS基因在BMSCs-NIS-EGFP中大量表达．而在BMSCs-EGFP中无表达。细胞摄碘实验显示BMSCs-NIS-EGFP细胞具有摄碘功能，30min摄碘峰值是对照组BMSCs．EGFP细胞的近10倍，且其摄碘可被NaClO4显著抑制。成功制备裸鼠脑胶质瘤模型，面crosPEcT显像显示颅内脑胶质瘤部位有明显的125^I放射性摄取增高。结论重组慢病毒pLVX-CMV-N1S．EGFP可使NIS基因在BMSCs中表达并介导125^I的摄取，NIS基因可有效监测BMSCs向颅内脑胶质瘤的迁移，这为开展以BMSCs为载体、由NIS介导的脑胶质瘤基因靶向治疗奠定了基础。
- 石朔张敏郭睿苗莹李彪
- 关键词：神经胶质瘤钠碘转运体发射型计算机单光子
- 18F-FDG PET/CT代谢参数在NK/T细胞淋巴瘤预后价值的评估被引量：2
- 2019年
- 目的:评估18F-FDG PET/CT检查的代谢参数[最大标准摄取值(maximum standardized uptake value,SUVmax)、肿瘤代谢体积(metabolic tumour volume,MTV)、肿瘤糖酵解负荷(total lesion glycolysis,TLG)]在自然杀伤(natural killer,NK)/T细胞淋巴瘤患者预后评估中的价值。方法:回顾性分析27例经病理确诊的NK/T细胞淋巴瘤患者,患者均在治疗前进行了基线PET/CT检查,随后接受相同方案治疗,中位随访23个月,每例患者在随访期间至少进行了一次治疗中或治疗末期的PET/CT评估。统计所有患者的PET/CT代谢参数SUVmax、MTV、TLG以无进展生存(progression-free survival,PFS)期及总生存(overall survival,OS)期为评价指标,进行Kaplan-Meier生存曲线分析。结果:27例NK/T细胞淋巴瘤患者中5例出现了疾病进展,其中3例死亡。PET/CT检查参数中,MTV、TLG是NK/T细胞淋巴瘤患者PFS的预测因子,MTV>16.97 cm3及TLG>74.70×103预示疾病进展(MTV,P=0.013;TLG,P=0.029),SUVmax则无法预测PFS(P=0.661)。然而,这3项代谢参数均无法预测患者的OS(SUVmax,P=0.293;MTV,P=0.198;TLG,P=0.108)。结论:18F-FDG PET/CT代谢参数MTV、TLG可能有助于预测NK/T细胞淋巴瘤患者的PFS,而无法预测其OS;SUVmax则在NK/T细胞淋巴瘤预后评估中的价值不大。
- 沈文斌郭睿李彪
- 关键词：18F-FDGPET/CT预后价值
- ^(18)F-PSMA PET/MRI在早期诊断前列腺癌根治术后复发、转移中的价值
- 2023年
- 目的:探讨^(18)氟-前列腺特异性膜抗原(^(18)F-prostate-specific membrane antigen,^(18)F-PSMA)-1007正电子发射计算机断层显像/磁共振成像系统(positron emission tomography/magnetic resonance imaging,PET/MRI)(以下简称PET/MRI)检查在早期诊断前列腺癌根治术后患者复发、转移中的价值。方法:连续纳入2019年6月至2022年1月上海交通大学医学院附属瑞金医院收治的前列腺癌根治术后患者143例,均于术后12~60个月内完成PET/MRI检查。统计PET/MRI检查对患者术后肿瘤复发或转移灶的检出率,根据患者的血清前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen,PSA)水平分为PSA≤0.2 ng/mL、0.2 ng/mL
- 周熠磊张淼郭睿周金鑫李彪李翔
- 关键词：前列腺癌
- ^18F—FDG PET或PET／CT评估乳腺癌新辅助化疗疗效价值的meta分析被引量：7
- 2012年
- 目的用meta分析方法评价^18F—FDGPET或PET／CT用于乳腺癌新辅助化疗疗效评估的准确性和预测价值。方法检索PubMed、Embase、Cochrane以及万方数据库中相关的英文或中文文献。制定纳人文献的选择标准，并按照诊断性研究质量评价（QUADAS）评分表对文献质量进行评分，以保证纳入研究的同质性。对符合标准的研究结果进行meta分析，估计和比较PET和其他影像检查（以测量肿瘤体积改变情况为评估指标）的加权se、Sp、LR、诊断优势比（DOR）与综合ROC（SROC）曲线，判断PET和其他影像检佥评估新辅助化疗的准确性。用绘制漏斗图和meta回归的方法探讨纳入研究的异质性来源。结果16篇文献符合全部纳入标准，含662例研究对象。Meta分析力口权值：（1）PET：SePET86．1％（247／287），SpPET69．6％（261／375），LR＋PET3．18，LR—PET0．23，DORPET 17．26；（2）其他影像检查：Sed 57．2％（91／159），Spd48．5％（50／103），LR＋d 1．07，LR—d0．87，DORd 1．30。绘制SROC曲线，得出QPET（0．8058）〉Qa＊（0．5328）。漏斗图示发表偏倚对结果影响小。Meta回归分析发现，文献发表年份可能是异质性的来源之一（P=0．05）。结论监测葡萄糖代谢的改变比测量肿瘤大小的改变更能准确评估乳腺癌新辅助化疗的疗效。
- 席云张敏郭睿张淼胡佳佳李彪
- 关键词：体层摄影术体层摄影术META分析脱氧葡萄糖
