钟杰
- 作品数:4 被引量:8H指数:1
- 供职机构:武汉市中心医院更多>>
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- 压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞中神经微丝的影响被引量:1
- 2009年
- 目的研究压力对体外培养的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)中神经微丝的影响,探讨高眼压性青光眼中细胞骨架蛋白的表达变化。方法建立体外加压培养纯化的Sprague-Dawley(SD)乳鼠视网膜神经节细胞模型,采用抗大鼠Thy1.1单克隆抗体免疫荧光细胞化学染色法鉴定RGCs的纯度。将纯化培养的SD乳鼠RGCs分别在0、20、40、60及80 mmHg的压力下培养,免疫组织化学方法检测神经微丝蛋白-H(NF-H)的表达,并用图像分析系统对各组NF-H表达进行分析测定。结果①纯化后的视网膜神经节细胞纯度为96%。②压力为20 mmHg时,实验组RGCs中NF-H表达与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),且NF-H在视网膜神经节细胞中的分布相对均一;压力为40、60及80 mmHg时,实验组RGCs中NF-H表达与对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.01),且NF-H在视网膜神经节细胞中分布紊乱。结论纯化的RGCs可以在体外存活并生长,一定的压力(≥40 mmHg)可影响RGCs中细胞骨架蛋白的表达。
- 钟杰张虹
- 关键词:视网膜神经节细胞
- 外源性H_2O_2对大鼠纯化视网膜神经节细胞存活及轴突生长的影响
- 2015年
- 目的研究外源性H2O2对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和轴突生长状况的影响及其与神经微丝蛋白NF-H表达变化的关系,探讨H2O2的氧化应激引起RGCs损伤的机制。方法纯化培养SD乳鼠RGCs,应用不同浓度H2O2(250、500μmol/L)分别作用4、8、24、32h后测定存活、有突起的视网膜神经节细胞数及其最长突起长度。采用免疫组织化学染色加图像分析系统检测H2O2对RGCs表达神经微丝蛋白NF-H的影响。结果纯化培养的SD大鼠RGCs纯度可达96.24%。H2O2以浓度和时间依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活数,500μmol/L的H2O2在32h可以导致RGCs存活数下降约50%。同时,500μmol/L H2O2孵育后RGCs细胞轴突长度与对照组比较明显减短,差异有统计学意义(P<0.01),且减短程度随时间延长而增大;NF-H表达差异也有统计学意义(P<0.01),且NF-H在RGCs中分布紊乱。结论 H2O2的氧化应激损伤能够以时间和浓度依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活,可影响RGCs轴突生长,这可能与其下调RGCs中神经微丝蛋白的表达有关。
- 钟杰贾君杨万举
- 关键词:视网膜神经节细胞细胞存活轴突神经微丝蛋白
- 压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞存活及轴突生长的影响被引量:7
- 2009年
- 目的研究压力对视网膜神经节细胞(RGC)存活和轴突生长的影响及其与神经微丝蛋白(NF)-H表达变化的关系,探讨压力引起RGC损伤的机制。方法对照实验研究。纯化培养20只SD乳鼠的RGC。采用开放式压力控制培养系统,建立压力损伤模型,分别检测20、40、60及80miHHg(1mmHg=0.133kPa)压力作用48h对RGC存活数及轴突生长的影响,测定存活且有轴突的RGC数及其最长轴突的长度。采用免疫组织化学染色加图像分析系统,检测压力对RGC表达NF—H的影响,以吸光度(A)值表示。采用SPSS15.0统计学软件对数据进行分析。组间RGC存活数和细胞轴突长度与对照组比较采用单因素方差分析(One—wayANOVA),组间进一步两两比较采用SNK法(q检验)。以P〈0.05作为差异有统计学意义。结果纯化培养的SD大鼠RGC纯度可达96.24%。压力40、60及80mmHg作用48h,RGC存活数和细胞轴突长度与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(存活细胞数:P=0.001,0.000,0.000;细胞轴突长度:P=0.000,0.000,0.000),且降低程度随压力增高而增大;NF—H表达差异也有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000),且NF—H阳性细胞分布不规则。结论压力可影响纯化培养的RGC存活数和轴突生长,可能与其下调RGC中NF—H的表达有关,推测压力是引起青光眼视神经损害的机制之一。
- 张虹钟杰李贵刚胡军毛小春
- 关键词:视网膜神经节细胞细胞存活轴突神经微丝蛋白质类
- 压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞存活及轴突生长的影响
- 目的 研究压力对视网膜神经节细胞(RGC)存活和轴突生长的影响及其与神经微丝(NF)-H蛋白表达变化的关系,探讨压力引起RGC损伤的机制.方法 本研究采用对照实验研究设计.纯化培养20只SD乳鼠的RGC.采用开放式压力控...
- 张虹钟杰李贵刚胡军毛小春
- 关键词:视网膜神经节细胞轴突