陈占国 作品数:123 被引量:417 H指数:11 供职机构: 温州医科大学 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 温州市科技局资助项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
实时荧光定量PCR检测血HBV DNA的疑难结果分析及其对策 被引量:6 2013年 目的分析实时荧光定量PCR检测血HBV DNA过程中出现的疑难结果,并探讨制定相应的处理对策,以提高HBV DNA检测质量。方法用实时荧光定量PCR检测温州医学院附属第一医院2008至2011年期间,115154份血标本中HBV DNA含量,结合当次HBV DNA定量结果与历史结果、PCR扩增图、乙型肝炎血清5项指标及临床诊断,建立本实验室疑难结果复查标准,回顾性分析2008至2011年本实验室所有送检标本的疑难结果,同时用原试剂(careHBV PCR Kit)和验证复查试剂(careHBV PCR Kit V2)对1969份疑难结果标本进行复查;统计2次结果一致性和不一致的比例,并分析试剂与非试剂因素等造成2次结果不一致的比例,其中试剂因素包括无扩增曲线造成的假阴性和有扩增曲线但扩增效率低2种情况,非试剂因素包括操作污染、标本等其他因素;最后统计careHBV PCR Kit的漏检率。结果2008至2011年共定量检测115154份HBV DNA血标本,疑难结果标本1969份,占总检测标本的1.71%;2次结果一致的为1588份(80.65%);2次结果不一致为381份(19.35%),其中,4年中试剂因素造成结果不一致的比例分别为18.87%、20.23%、51.33%和59.57%,呈逐年上升趋势,原试剂因素的漏检率分别为2.49%、4.08%、10.09%、14.47%,呈逐年上升趋势;4年中非试剂因素造成结果不一致所占比率分别为81.13%、79.77%、48.67%和40.43%,呈逐年下降趋势。结论用2种不同的试剂复查疑难结果标本,可降低HBV DNA定量检测的漏检率,避免试验误差,有效保证HBV基因突变标本的HBV DNA准确定量,以正确指导乙型肝炎患者的抗病毒治疴0(中华检验医学杂志,2013,36:217-221) 陈占国 周武 王忠永 金娅蕾 陶志华关键词:聚合酶链反应 肝炎病毒 乙型 病毒 温州地区宫颈疾病妇女人乳头状瘤病毒感染现状分析 被引量:21 2010年 目的了解温州地区宫颈疾病妇女的人乳头状瘤病毒(HPV)感染现状,为对HPV防治提供流行病学数据。方法采用导流杂交基因分型技术(HybriMax)对2218例来自温州地区宫颈疾病患者宫颈脱落细胞标本进行HPV检测及基因分型,分析HPV在温州地区宫颈疾病妇女感染率以及高危型HPV(HR-HPV)感染率,研究不同HPV亚型在不同人群中分布等。结果宫颈疾病患者HPV感染率为60.05%,重叠感染率为26.10%,感染排名分别是HPV16、58、11、52、6,在≤24岁组及≥60岁组出现两次感染高峰;HR-HPV感染率为47.16%;HR-HPV亚型感染率排名分别是HPV16、58、52、33、31,以≥60岁组感染率为最高;宫颈炎症以HPV16、58、11为主,宫颈不典型增生以HPV16、52、58为主,宫颈癌以HPV16为主。结论 HPV在温州地区宫颈疾病妇女生殖道有较高的感染率及重叠感染率,不同宫颈疾病优势型别不同,故HPV感染应该引起社会的重视,加强常规检测HPV,以早期发现感染,及时干预。 王瑜敏 陈洁 周武 陈占国 陶志华关键词:子宫颈疾病 人乳头状瘤病毒 基因分型 聚合酶链反应 染色体异常核型二个家系 2008年 例1,女,32岁,继发闭经,原发不孕就诊。查体:身高153cm,体重46kg,表型智力正常。乳房对称发育,有腋毛,外阴发育正常。B超:子宫明显偏小,21mm×21mm×18mm,双侧附件区仅见卵巢样痕迹.性激素检查:促黄体生成素0.8U/L(参考范围2.1~10.9U/L),卵泡刺激素1.6U/L(参考范围3.8~8.8U/L),雌二醇41.0pmol/L(参考范围88-410pmol/L),睾酮0.4pmol/L(参考范围0~2.6pmol/L)。细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞培养,常规制备染色体,胰酶G带法显带, 朱燕英 戴美洁 陶志华 陈占国关键词:染色体 平衡易位携带者 前列腺癌特异性基因DD3^(PCA3)的研究进展 被引量:4 2004年 DD3PCA3 是一种非编码RNA的基因 ,定位于 9q2 1~ 2 2染色体。它为前列腺癌特异性基因之一 ,DD3PCA3 mRNA仅在前列腺癌细胞中表达 ,而在其他正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达。现就DD3PCA3 基因结构和功能、DD3PCA3 mRNA实验室检测技术以及临床意义作一综述。DD3PCA3 mRNA有望成为前列腺癌早期诊断和预后监测的有价值标志物。 陈占国 陶志华 陈晓东关键词:前列腺肿瘤 聚合酶链反应 前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因异常甲基化检测及临床意义 被引量:7 2009年 目的:检测前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因异常甲基化,探讨其甲基化与前列腺癌临床病理特征间的关系。方法:采用巢式甲基化特异性PCR(nested methylation specific polymerase chain reaction,NMSP)法对57例前列腺癌组织和35例良性前列腺增生组织进行甲基化检测,分析其甲基化的发生与前列腺癌临床病理特征间的关系。结果:前列腺癌组织中GSTP1和DAPK基因甲基化检出率显著高于良性前列腺增生组织(GSTP1:61.4%vs 2.9%;DAPK:43.9%vs 8.6%;均P<0.01)。GSTP1基因甲基化率在不同Gleason评分间具有明显差异(χ2=11.53,P=0.001),而在不同年龄、前列腺特异性抗原(PSA)和临床分期之间差异却无显著性(χ2=0.111,1.662和1.975,均P>0.05);DAPK基因甲基化率在不同年龄、PSA、Gleason评分和不同临床分期之间均无明显差异(χ2=0.071、0.002、1.290和2.309,P均>0.05)。结论:GSTP1和DAPK基因异常甲基化与前列腺癌的发生与发展相关,可有助于前列腺癌的诊断。 何晶晶 毛易捷 许刚 吴伟 陶志华 沈默 吴秀玲 陈占国 周武关键词:前列腺肿瘤 甲基化 前列腺癌抗原3基因启动子短片段重复序列多态性与前列腺癌发生风险的关系 被引量:6 2015年 目的:分析前列腺癌抗原3( PCA3)基因启动子序列的多态性改变,及其与前列腺癌(PCa)发生风险的关系。方法提取186例PCa患者、141例前列腺增生(BPH)患者和135例健康体检者外周血单个核细胞的DNA,采用多聚酶链式反应扩增PCA3基因的启动子片段后进行克隆测序分析。结果 PCA3基因的启动子序列因插入TAAA重复次数不同而形成短片段重复序列( STR)多态性。除了检测到GenBank公布的PCA3基因启动子序列含TAAA的5次重复外,还检测到4种新的启动子序列,分别含TAAA的重复次数为4、6、7、8,共组成TAAA 4/5型、TAAA 4/6型、TAAA 5/5型、TAAA 5/6型、TAAA 5/7型、TAAA 5/8型、TAAA 6/6型和TAAA 6/7型等8种类型。根据PCA3基因启动子等位基因上 TAAA总重复次数的不同,将8种组合类型分成≤10TAAA、11TAAA 和≥12TAAA等3组。非条件Logistic回归分析显示,校正性别和年龄因素后,随着PCA3基因启动子上TAAA总重复次数的增加,相对于≤10TAAA组,11TAAA组( ORadj =1.74,95%CI为1.06~2.87, P<0.05)和≥12TAAA组(ORadj =5.63,95% CI为1.85~17.19, P<0.05)的PCa发生风险有增高趋势,而发生BPH的风险不变(均P>0.05)。在186例PCa患者中,共有62.4%的PCA3等位基因在启动子的18~19 bp处发现存在AG/CA突变。结论 PCa患者PCA3基因的启动子存在STR多态性改变,TAAA重复序列的增加使患者发生PCa的相对危险度大大增加,而这种STR的发生可能与其上游位点突变有关。 周武 陶志华 王忠永 陈占国 沈默 徐琦煜 谢海啸 余志贤 陈国荣关键词:前列腺肿瘤 前列腺增生 高敏乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸定量检测在低病毒载量患者治疗监测中的应用 被引量:11 2018年 目的对高敏乙型肝炎(乙肝)病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)定量检测进行方法学评价,并探讨该方法在低病毒载量的乙肝患者治疗监测中的应用价值。方法采用全自动核酸提纯及荧光聚合酶链式反应分析系统检测HBV DNA,评价该方法的线性范围、精密度、最低定量检测限、防污染能力和最低检测限等性能指标,采用电化学发光法检测HBV血清学标志物和全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT),并分析两者之间的相互关系。结果高敏HBV DNA定量检测方法的线性范围为50~5.0×10~8 IU/ml,最低定量检测限为50 IU/ml,批内精密度与批间精密度均<5%,最低检测限为20 IU/ml,防污染能力强。在抗病毒治疗的中,HBV DNA载量<500 IU/ml的乙肝患者占总数的46.40%;HBVDNA载量为30~500 IU/ml的HBeAg阳性或阴性患者的ALT异常率明显高于HBV DNA载量<30 IU/ml的患者(P=0.012、0.001),但不同HBV DNA载量与两对半血清学模式差异无统计学意义(P=0.179)。结论基于全自动核酸提纯及荧光PCR分析系统的高敏HBV DNA定量检测方法各性能指标良好,适于低病毒载量的乙肝患者治疗监测,临床应加强该类乙肝患者的治疗监测。 金速速 陈占国 余坚 白伟伟 陈碎朋 谢振迪 李向阳关键词:高敏 乙型肝炎病毒 核酸 携带PVL基因金黄色葡萄球菌的检测及分子流行病学研究 余方友 张雪青 陈增强 林晓梅 刘存丽 陈占国 李美兰 陈坚 李小龙 1、收集2005年2月至7月从我院临床分离的112株金黄色葡萄球菌,应用PCR扩增mecA基因检测MRSA,用多重PCR检测MRSA的SCCmec的基因型及亚型。同时采用各型特异性引物进行PCR扩增,对PCR扩增产物进行...关键词:关键词:金黄色葡萄球菌 PVL基因 分子流行病学 前列腺癌患者抑癌基因PTEN上游序列的突变分析 2012年 目的查找前列腺癌患者抑癌基因(phosphataseand tensin homologue deleted chromatosome,PTEN)上游序列是否存在改变,以及该改变与前列腺癌发生发展是否存在关联。方法提取50例前列腺癌(prostate cancer,PCa)及30例正常对照组的外周血DNA,扩增PTEN外显子1上游1200bp左右DNA片段,纯化目的产物后进行测序,观察PCa患者与对照组的差异。结果 PCa患者在PTEN基因外显子1上游-510bp处存在G/A变异,形成3种基因型GG、GA、AA。前列腺癌与对照组相比,3种基因型频率存在差异(χ2=7.78,P<0.05)。结论作为抑癌基因的上游序列,基因的突变有可能导致了PTEN基因转录能力的下降,进而降低了抑癌基因对前列腺癌变进展的抑制作用。 周武 徐琦煜 陈占国 钱菁菁 沈默 胡王强关键词:前列腺癌 抑癌基因 PTEN 突变 白细胞介素10-1082G/A位点单核苷酸多态性与膀胱癌的相关性 被引量:2 2012年 目的探讨白细胞介素-10(IL-10)基因启动子区域-1082G/A位点单核苷酸多态性与膀胱癌危险性的关系。方法选取浙江汉族人群中膀胱癌患者400例为病例组,400例健康体检者为对照组,以等位基因特异性扩增(allele specific PCRamplification,AS-PCR)结合DNA测序方法,检测病例组和对照组的IL-10-1082G/A基因型,比较不同基因型与膀胱癌危险性以及膀胱癌临床分期之间的关系。结果病例组和对照组的IL-10-1082G/A位点基因型分布和等位基因频率之间差异有统计学意义(χ2=8.375,P<0.05;χ2=8.322,P<0.01);AA基因型的个体与携带G等位基因型的个体(GG型和GA型)相比,携带等位基因A的个体与携带等位基因G的个体相比,其患膀胱癌危险性分别增加2.055倍和1.990倍(OR=2.055,95%CI:1.252~3.374;OR=1.990,95%CI:1.237~3.203);IL-10-1082G/A位点基因型与膀胱癌的临床分期无直接相关性。结论 IL-10-1082G/A多态性与膀胱癌危险性相关,该位点SNP检测可作为膀胱癌可能的分子标志物。 陈占国 何杰 周武 余志贤 吴秀玲 陶志华关键词:白介素 单核苷酸多态性 基因型 膀胱癌