陈建泉
- 作品数：18 被引量：23H指数：3
- 供职机构：同济大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市科技兴农重点攻关项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 奶山羊转基因供核细胞的再饥饿对核移植胚胎发育的影响被引量：5
- 2005年
- 为提高转基因奶山羊体细胞核移植胚胎早期发育率,将经转染外源基因的山羊胎儿成纤维细胞经饥饿培养(含0.5%FCS的DMEM)5天后分成两部分:第一部分细胞-80℃或液氮冻存,试验前复苏后直接用作供核细胞(试验组Ⅰ),或复苏后恢复培养(含10% FCS的DMEM)2-5天后再饥饿5天用作供核细胞(试验组Ⅱ);第二部分细胞作传代培养(含10% FCS的DMEM)2天后再饥饿5 天用作供核细胞(试验组Ⅲ)。将上述不同处理的供核细胞进行细胞周期与存活率的检测,并将该供核细胞移入去除遗传物质的山羊MⅡ期卵母细胞的卵周隙内,经电融合、化学激活后,将核移植(NT)胚胎经0.8%琼脂糖包理后移入临时寄母输卵管内,培养6天后回收并观察NT胚胎的早期发育。结果,试验组Ⅱ所用供核细胞中G_0/G_1期细胞所占比例及其存活率分别为95.68%、99.9%,均显著地高于试验组Ⅰ(88.66%、80%);试验组Ⅱ的桑椹及囊胚期NT胚胎的发育率(66.09%)显著地高于试验组Ⅰ(22.00%)与试验组Ⅲ(50.51%)。将以上发育的NT胚胎分别移入同步发情的受体后,35 天作B超妊娠诊断,试验组Ⅱ的受体妊娠率为45.83%,显著地高于试验组Ⅰ(20.00%)与试验组Ⅲ(9.58%)。流式细胞仪分析结果表明,饥饿后的供核细胞经冷冻,复苏后恢复培养2-5天,再经饥饿处理,能显著地提高G_0/G_1期细胞的比例及细胞存活率;应用该细胞所组建的NT胚不仅具有较高的桑椹与囊胚期发育率,而且具有较高的受体妊娠率。
- 陈建泉张爱民陈娟徐旭俊刘国辉朱敏刘明刚成国祥
- 关键词：转基因奶山羊胚胎发育化学激活同步发情
- 继代核移植能成倍提高来自奶山羊卵胞质体的异种间核移植重构胚的发育率(英文)
- 2007年
- 为了提高异种间核移植重构胚的发育率,本研究以体内排放的奶山羊成熟卵为供胞质的受体细胞,以人、兔、波尔山羊等的异种或亚种体细胞的原代核移植(Primary Somatic Cell Nuclear Transfer,PSCNT)重构早胚(8-16细胞期)的卵裂球作供核体,观察经亚种或异种卵胞质体短期"修饰"的核再移植产生的继代(Secondary SCNT,SSCNT)重构胚的着床前发育潜能。结果:人、兔、波尔山羊的继代桑椹/囊胚发育率均显著地高于其PSCNT胚胎(人,14.81%VS.7.79%;兔,23.53%VS.12.50%;波尔羊,55.35%VS.24.53%);这些早胚的各阶段发育时程仍遵循供核体动物正常受精卵的发育时程。结果启示:奶山羊成熟卵胞质对异种体细胞核亦具一定的去分化能力,能支持重构胚发育到囊胚;异种重构胚的发育特征是由供体核所决定的;继代核移植几乎能够成倍提高异种间重构胚的着床前发育率,提示核的去分化完全是在母型信息主导的调控之下完成的,而进一步发育的时序似乎是由核决定的;成倍延长在含母型信息主导调控环境中的时间能成倍提高SCNT重构胚的着床前发育率。
- 张爱民陈建泉沙红英陈娟徐旭俊吴友兵葛来香胡大为成国祥
- 关键词：奶山羊卵母细胞异种核移植
- 治疗性克隆研究进展被引量：1
- 2007年
- 核移植来源的胚胎干细胞(ES)细胞在动物疾病模型上的成功治疗作用以及核移植来源的患者特异的ES细胞研究进展有望将这一技术即治疗性克隆应用于人类疾病治疗。本文对治疗性克隆的研究进展、治疗性克隆研究中存在的问题以及治疗性克隆的应用前景作一综述和讨论。
- 陈建泉沙红英成国祥
- 关键词：治疗性克隆核移植胚胎干细胞
- 波尔山羊亚种间体细胞克隆——核与胞质相容性对克隆胚胎发育影响的研究
- 核移植(Nuclear Transfer，NT)是研究细胞核与细胞质(简称核质)互
作关系中诸多问题的有效方法之一。波尔山羊和奶用萨能奶山羊虽同属山羊品
种，但他们因地域性隔离，并经长期育种，已分别成为世界公认的优质...
- 陈建泉
- 文献传递
- 山羊脑挫裂伤模型的建立被引量：1
- 2009年
- 目的建立一种可控性强、易于指标检测的大动物（山羊）脑挫裂伤模型。方法选取25只健康成年无角山羊，通过外科手术暴露各组羊大脑上薛氏沟周围的运动皮质，以50g钢球分别自50、75、100及125cm高度作自由落体加速撞击一次致伤，记录运动诱发电位、头颅MRI扫描图像，以及病理显微观的改变。结果50、75、100及125cm高度撞击组羊的存活率分别为100％、100％、80％及40％。头颅MRI扫描和运动诱发电位表明100cm高度撞击可产生明显脑挫裂伤灶及脑水肿，损伤局部皮层的运动诱发电位变化明显；50、75cm高度撞击仅产生轻度的脑挫裂伤灶及脑水肿表现；125cm高度撞击产生广泛的脑挫裂伤灶。结论对山羊脑上薛氏沟周围运动皮层区使用50g×100cm力度作自由落体加速撞击，可产生观察指标明确且存活率高的山羊脑挫裂伤模型，有望广泛用于神经干细胞移植及药物等治疗的实验研究。
- 彭钢张彭跃沙红英陈建泉朱剑虹
- 关键词：脑损伤动物运动诱发电位
- 激素短处理技术在青年转基因山羊人工诱导泌乳上的应用
- 2009年
- 利用外源激素短处理技术,对青年期转基因山羊(10～12月龄)进行人工诱导泌乳,并分析外源激素的处理对转基因山羊乳房发育、泌乳规律、乳汁成分、身体健康的影响,评估此技术对青年转基因山羊进行人工诱导泌乳的可行性。试验组A:8只转基因母羊联合注射雌激素和孕酮(E2∶P4按1∶8)配以利血平进行人工诱导泌乳;试验组B:另7只转基因母羊采用E2∶P4按1∶3进行人工诱导泌乳;并且选择同龄的10只普通母山羊作为对照组C,人工诱导泌乳方案同试验组A;选择同龄的10只普通母山羊作为对照组D,人工诱导泌乳方案同试验组B。结果表明:①转基因山羊经高比例的雌激素水平(E2∶P4=1∶3)的诱导作用,乳腺发育充分,乳房饱满且内部充盈乳汁,乳房容积率是低雌激素水平组羊(E2∶P4=1∶8)的2倍;②最初1周,经高比例的雌激素水平诱导的转基因山羊产奶量是低比例的雌激素水平组的2倍,差异极显著(182 mL/d±25 mL/dvs93 mL/d±12 mL/d,P<0.01);③转基因山羊经激素诱导泌乳,在最初1周内乳汁分泌量呈先下降后逐步上升的变化规律;④通过人工激素诱导转基因山羊产生的乳汁,乳糖含量为4.35%～4.66%,乳脂含量3.71%～4.16%,蛋白质含量4.06%～4.11%,均与对照组乳汁无显著差异;⑤诱导泌乳,对山羊自身的健康无显著影响,试验后,能够恢复情期并产羔。可见外源激素人工诱导泌乳短处理技术在青年转基因山羊上应用是可行的。
- 吴友兵徐旭俊王璞何俊民陈建泉
- 关键词：转基因山羊诱导泌乳外源激素
- 幼龄小鼠卵泡的超数及卵母细胞同步成熟的研究被引量：1
- 2005年
- 人工合成的雌性激素己烯雌酚可以促进出生18～20日龄左右的小鼠大量卵泡同步发育(有腔卵泡),每只小鼠可获得300枚左右的未成熟卵母细胞,并在体外成熟培养16h后,90%以上的卵母细胞排放第一极体,体外受精后2细胞的分裂率达到50%～65%,受精卵经体内培养后,发育到囊胚的比例达到50%以上。以上结果表明,幼龄小鼠卵巢卵母细胞能在外源的雌性激素作用下大量同步发育,并能在体外成熟、受精与发育至囊胚期胚胎。该研究结果不仅为深入探讨哺乳动物卵母细胞发育及成熟机制奠定基础,更重要的是为大家畜提供了一个重要的卵母细胞的来源途径。
- 沙红英沈晓晖陈娟刘思国陈建泉张爱民成国祥
- 关键词：卵泡卵母细胞颗粒细胞己烯雌酚体外成熟
- 乳腺特异高表达人促红细胞生成素转基因奶山羊的制备
- 目的:制备乳腺特异性高表达人促红细胞生成素(hEPO)转基因奶山羊.
方法:采用牛β-乳球蛋白基因(BLG)调控元件和hEPO全长编码序列基因组DNA构建真核表达载体,应用受精卵原核注射的方法制备hEPO转基因...
- 张爱民陈建泉刘思国沙红英徐旭俊吴友兵陈娟成国祥
- 关键词：人促红细胞生成素乳腺表达
- 文献传递
- 白细胞抑制因子(LIF)对离体小鼠子宫内膜岩藻糖基转移酶(FuT7)表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:探讨白血病抑制因子(LIF)对小鼠子宫内膜细胞岩藻糖基转移酶(FuT7)因子表达的影响。方法:分别用含LIF和抗LIF-抗体(LIF-Ab)培养液孵育子宫内膜细胞10h,通过PCR、免疫荧光和免疫印迹方法分析各组培养液中FuT7因子的表达。结果:PCR结果显示:与空白对照组比,LIF对离体子宫内膜细胞FuT7基因表达有上调作用(0.26±0.02vs0.18±0.01),而LIF-Ab可抑制子宫内膜细胞FuT7的表达(0.14±0.04vs0.18±0.01)。免疫荧光和免疫印迹结果同样显示经LIF孵育后,子宫内膜细胞FuT7蛋白量有所增加。结论:LIF在体外可调控子宫内膜细胞FuT7表达,并有可能借此来调控着床阶段特异表达的sLeX寡糖抗原量,继而影响整个着床调控网络。
- 张琦燕秋刘帅陈建泉
- 关键词：子宫内膜细胞小鼠
- 精原干细胞途径制作转基因动物被引量：3
- 2008年
- 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)具自我更新并分化出大量精子的能力。通过其建立转基因动物模型,对研究精子的发生机制、生产转基因动物、重建不育个体的生精功能等都有着显著的推动作用。从研究意义着手,分述了精原干细胞途径制作转基因动物各技术步骤的研究情况,并提出了运用克隆技术丰富该途径的新思路。
- 王璞陈建泉成国祥
- 关键词：精原干细胞转基因克隆
