刘蒙蒙 作品数:26 被引量:42 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 河北省教育厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
药用真菌猪苓菌核无机磷酸盐转运蛋白基因的分子克隆与特性分析 被引量:2 2017年 目的克隆猪苓Polyporus umbellatus菌核无机磷酸盐转运蛋白基因并进行生物信息学和表达模式分析。方法采用RT-PCR技术从猪苓菌核中克隆得到1个无机磷酸盐转运蛋白(inorganic phosphate transporter)基因,利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域、信号肽和跨膜结构等分子特性;采用Clustal W2以及MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;实时荧光定量PCR分析基因表达模式。结果猪苓无机磷酸盐转运蛋白基因命名为Pu Pi T(NCBI登录号:KU179154)。该基因开放读码框全长为1 590 bp,编码530个氨基酸。Pu Pi T蛋白相对分子质量为57 552,等电点6.82。氨基酸序列分析表明,Pu Pi T蛋白具有12个跨膜区。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示Pu Pi T与Moniliophthora rorer亲缘关系最近,与Moniliophthora roreri、双色蜡蘑Laccaria bicolor、Heterobasidion irregulare有较高的同源性,荧光定量PCR结果表明,Pu Pi T在与蜜环菌共生的猪苓菌核及未与蜜环菌共生的菌核中都有表达,其中共生部分的表达量显著上调,约是未共生部位的12倍,说明其参与猪苓与蜜环菌共生过程。结论 Pu Pi T基因克隆和分子特征为进一步研究揭示其在猪苓菌核磷元素转运及与蜜环菌共生过程中的调控作用奠定基础。 刘蒙蒙 邢咏梅 邢咏梅 郭顺星关键词:实时荧光定量PCR 药用真菌猪苓2种氧化应激相关基因的克隆和序列分析 2015年 【目的】克隆药用真菌猪苓NADPH氧化酶及乙二醛氧化酶基因并进行生物信息学分析。【方法】利用RACE技术取得基因c DNA全长;利用生物信息学在线工具预测蛋白的理化性质、结构域等分子特征;用Bioeditor和MEGA 5.0分别对氨基酸进行多序列比对和进化关系分析。【结果】克隆到Pu NOX(JX035912)及Pu GLOX(JX035913)。它们c DNA全长分别为1674 bp、1723 bp;分别编码557、515个氨基酸,相对分子质量分别为63.845 k Da、55.891 k Da,等电点分别为5.58、4.82。Pu NOX与真菌NADH蛋白的一致性为74%-80%,系统进化树分析结果显示猪苓Pu NOX与糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)亲缘关系较近;Pu GLOX与真菌乙二醛氧化酶同源性较高,均大于50%;其系统进化树分析表明猪苓Pu GLOX与黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)进化上最保守。【结论】药用真菌猪苓NADPH基因Pu NOX以及乙二醛氧化酶基因Pu GLOX的分子特征为进一步研究其在猪苓菌核生长发育过程中的作用奠定理论基础。 刘蒙蒙 宋超 邢咏梅 郭顺星关键词:猪苓 氧化应激 基因克隆 猪苓菌核自噬相关基因ATG8的克隆及表达分析 被引量:2 2016年 目的克隆分离猪苓自噬相关基因ATG8,并探讨其在猪苓防御蜜环菌入侵过程中的作用。方法以猪苓菌核为材料,采用RT-PCR方法得到自噬相关基因的开放读码框全长,并利用荧光定量PCR检测该基因在不同猪苓菌核部位的表达量。结果该基因开放读码框为387 bp,编码128个氨基酸;该蛋白分子量为14.838 k D,理论等电点为5.85。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示Pu ATG8与蚁巢伞属(termitomyces sp.)亲缘关系最近,与皱革菌(Punctularia strigosozonata)、密褐褶孔菌(Gloeophyllum trabeum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)有较高的同源性。Pu ATG8为ATG家族同源基因。荧光定量PCR结果表明,Pu ATG8在未被蜜环菌侵染的猪苓菌核及被蜜环菌侵染的菌核中都有表达,其中被侵染部分的表达量显著上调。结论 Pu ATG8可能参与了猪苓菌核的防御反应。 刘蒙蒙 邢咏梅 郭顺星关键词:猪苓 自噬 基因表达 克隆 一种哌啶类化合物的新用途 本发明公开了乙基1‑(2‑(4‑(N‑(4‑氟苯甲基)‑3‑甲基丁酰氨基)苯基)乙酰基)哌啶‑4‑羧酸酯的新用途。具体而言,本发明中的乙基1‑(2‑(4‑(N‑(4‑氟苯甲基)‑3‑甲基丁酰氨基)苯基)乙酰基)哌啶‑4‑... 刘蒙蒙 许磊 霍小位 常珊文献传递 一种咪唑类化合物的新应用 本发明公开了咪唑类化合物(S)‑甲基2‑(2‑((4‑(4‑羟基苯甲基)‑5‑甲基‑1H‑咪唑‑2‑基)硫代)乙酰氨基)‑2‑苯基乙酸酯的新用途。具体而言,本发明中的(S)‑甲基2‑(2‑((4‑(4‑羟基苯甲基)‑5‑... 许磊 刘蒙蒙 许鹏 徐锡明文献传递 一种三唑并哒嗪类化合物的新用途 本发明公开了一种三唑并哒嗪类化合物的新用途。具体而言,本发明中的6‑(4‑(苯并[d][1,3]二噁唑‑5‑基甲基)哌嗪‑1‑基)‑3‑苯基‑[1,2,4]三唑并[4,3‑b]哒嗪具备AKR1B10抑制剂的功能,同时对A... 许磊 刘蒙蒙 许鹏 朴莲花文献传递 一种三唑并吡嗪类化合物的新应用 本发明公开了7‑(3‑氟苯基)‑3‑((2‑(4‑(2‑甲氧苯基)哌嗪‑1‑基)‑2‑羰基乙基)硫代)‑[1,2,4]三唑并[4,3‑a]吡嗪‑8(7H)‑酮的新用途。具体而言,本发明中的7‑(3‑氟苯基)‑3‑((2‑... 刘蒙蒙 许磊 孔韧 常珊文献传递 一种香豆素类化合物的新应用 本发明公开了香豆素类化合物8‑羟基‑2‑(7‑羟基‑2‑羰基‑2H‑色烯‑3‑基)‑4‑甲基‑5H‑铬烯桥[3,4‑c]吡啶‑5‑酮的新用途。具体而言,本发明中的8‑羟基‑2‑(7‑羟基‑2‑羰基‑2H‑色烯‑3‑基)‑... 许磊 刘蒙蒙 孙立磊 张大为文献传递 一种邻苯二甲醚类化合物的新用途 本发明公开了苯乙基6‑(3,4‑二甲氧苯基)‑3‑甲基‑4‑羰基‑4,5,6,7‑四氢‑1H‑吲哚‑2‑羧酸酯的新用途。具体而言,本发明中的苯乙基6‑(3,4‑二甲氧苯基)‑3‑甲基‑4‑羰基‑4,5,6,7‑四氢‑1H... 刘蒙蒙 许磊 张大为 徐锡明文献传递 猪苓菌丝形成菌核的MAPK基因克隆及表达分析 被引量:2 2015年 【目的】克隆药用真菌猪苓MAPK基因并进行生物信息学分析及表达模式研究。【方法】利用5′-RACE-PCR技术从猪苓菌丝中克隆得到MAPK基因全长,利用生物信息学软件推测蛋白的理化性质、结构域;DNA Star对氨基酸进行多序列比对;用MEGA 5.0做进化关系分析;借助实时定量PCR检测基因表达模式。【结果】猪苓MAPK基因的全长c DNA为1 293 bp,其中编码区占1 161 bp,共编码386个氨基酸,推测分子量为43.872 k D,理论等电点为6.68。猪苓的MAPK有MAPK中ERK1/2类型的保守区。系统进化树结果显示猪苓MAPK蛋白属于担子菌类群。实时荧光定量PCR分析结果表明猪苓菌核形成初期,菌核中的MAPK表达量显著高于菌丝组织,随着菌核的快速生长而减少。【结论】猪苓MAPK基因Pu MAPK的分子特征为进一步研究其在猪苓菌丝形成菌核过程中的作用奠定基础。 刘蒙蒙 宋超 邢咏梅 郭顺星关键词:猪苓 MAPK基因 实时荧光定量PCR 菌核形成