李俊峰
- 作品数：33 被引量：184H指数：6
- 供职机构：浙江中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省教育厅重点资助项目浙江省中医药科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 基于线粒体凋亡通路探讨仙鹤草促HepG_2细胞凋亡的机制被引量：11
- 2018年
- 目的:研究仙鹤草水提物对人肝癌HepG_2细胞增殖、凋亡的影响,并初步分析其作用机制。方法:MTT法检测仙鹤草不同浓度(1、0.75、0.5、0.25 mg/mL)及不同作用时间(24、48、72 h)对HepG_2的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Realtime-PCR和Western blotting检测线粒体凋亡信号通路中Bax、Caspase-3表达情况。结果:仙鹤草水提物对HepG_2的增殖具有显著抑制作用,并呈浓度及时间依赖性(P<0.05);同时其能显著促进HepG_2凋亡。Real-time PCR和Western blotting检测结果显示仙鹤草水提物1、0.75、0.5 mg/mL可显著上调HepG_2细胞Bax、Caspase-3 mRNA与蛋白表达(P<0.01)。结论:仙鹤草水提物能显著抑制HepG_2增殖,促进其凋亡,其作用机制可能是通过上调线粒体凋亡通路中的Bax、Caspase-3表达从而诱导细胞凋亡。
- 张婷婷刘文洪周琢艳嵇丽娜李俊峰江夏薇
- 关键词：仙鹤草HEPG2细胞凋亡
- 铁皮石斛内生真菌的分离及其体外抑菌和抗肿瘤活性初步研究被引量：15
- 2017年
- 目的分离铁皮石斛Dendrobium officinale内生真菌,研究内生真菌的分布并初步探讨和筛选具有抑菌和抗肿瘤活性的特异菌株。方法利用组织分离法和分子生物学方法分离、鉴定内生真菌;以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌作为受试对象,采用对峙法和管碟法分别对内生真菌及其发酵代谢产物的醋酸乙酯萃取相进行抑菌实验;采用MTT法对内生真菌代谢产物醋酸乙酯萃取相进行体外抗肿瘤活性检测。结果从铁皮石斛中分离得到28株内生真菌,分子鉴定结果显示,分离的内生真菌归属于10个属,其中镰刀菌属为优势属。抑菌实验结果显示28株内生真菌中,有7株至少能对1种指示菌有抑菌作用,其代谢产物的醋酸乙酯萃取相对3种指示菌和Hep G2细胞具有不同程度的抑制作用。结论铁皮石斛内生真菌种群丰富,从中分离得到的内生真菌具有潜在的抑菌和抗肿瘤活性,为进一步开发抑菌、抗肿瘤候选药物奠定基础。
- 周琢艳刘玉寒刘文洪李俊峰杨明郭莹夏瑾
- 关键词：铁皮石斛内生真菌抗菌活性抗肿瘤活性镰刀菌属
- 一种用于真菌培养的培养基及其制备方法
- 本发明涉及一种用于真菌培养的培养基及其制备方法，所述培养基包括固体培养基和液体培养基，所述固体培养基配方为：稀释0～4倍的废水、葡萄糖浓度为0～20g/L、NH<Sub>4</Sub>NO<Sub>3</Sub>浓度为0...
- 刘文洪张贝贝李俊峰叶志青葛立军陈少云
- 文献传递
- 基于网络药理学和细胞实验探讨Hispolon抗结肠癌的作用机制被引量：3
- 2021年
- 目的运用网络药理学预测和细胞实验探讨Hispolon抗结肠癌的作用机制。方法Swiss Target Prediction网站获取Hispolon的潜在靶点,与疾病数据库GeneCards、OMIM中结肠癌靶点取交集;利用STRING11.0数据库构建靶点相互作用网络,使用Cytoscape3.7.2软件挖掘Hispolon作用于结肠癌的核心靶点,通过Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析,最后采用Western blot验证Hispolon对结肠癌细胞SW480中部分关键靶点的调控作用。结果筛选出Hispolon抗结肠癌作用靶点69个,核心靶点包括BCL-2L1、EP300、CDK1、AR、MTOR、EGFR;富集分析发现Hispolon通过调节癌症相关通路、PI3K-Akt信号通路、前列腺癌相关通路等发挥抗结肠癌作用,并且通路中关键靶点涉及BCL-2L1、EP300、CDK1、MTOR和EGFR核心靶点。通过细胞实验证实Hispolon可下调靶点蛋白BCL-2L1和mTOR的表达,促进SW480细胞凋亡。结论Hispolon治疗结肠癌,具有多靶点、多通路协同作用的特点,该研究为进一步阐明Hispolon抗结肠癌作用机制及临床应用提供科学依据。
- 李俊峰吴力超王进孙腾飞赵俊慧张婷婷刘文洪
- 关键词：结肠癌网络药理学细胞实验MTOR
- 基于网络药理学和细胞实验探讨豆甾醇抗炎作用被引量：53
- 2022年
- 目的运用网络药理学和细胞实验探究豆甾醇抗炎症的作用机制。方法在TCMSP网站和SwissTargetPrediction网站预测豆甾醇作用靶点,应用GeneCards、OMIM、DrugBank、TTD数据库筛选炎症相关靶点,韦恩图获取豆甾醇与炎症之间的交集靶点,STRING 11.0数据库结合Cytoscape 3.7.2软件构建交集靶点蛋白相互作用网络,使用Cytoscape 3.7.2软件的插件挖掘互作网络中的核心靶点,利用R软件进行GO和KEGG分析,使用Autodock Vina和Pymol软件进行豆甾醇与核心靶点的分子对接及可视化。通过ELISA、RT-qPCR、Western blot实验验证豆甾醇对炎症细胞中细胞因子和部分关键靶点的调控作用。结果豆甾醇与炎症共同靶点88个,核心靶点主要涉及ACHE、F2、PTGS2和MAPK3等15个;GO富集分析发现豆甾醇主要涉及对类固醇激素的反应、对营养水平的反应、类固醇激素介导的信号通路等生物学过程;KEGG分析发现豆甾醇可通过调节雌激素、内分泌抵抗和甲状腺激素等信号通路发挥抗炎作用;分子对接表明豆甾醇可以与MAPK3和PRKACA靶点紧密结合;细胞实验证实豆甾醇可干预MAPK3、PRKACA的mRNA和蛋白表达,调控细胞因子的释放,发挥抗炎作用。结论豆甾醇可能作用于MAPK3和PRKACA等靶点调控雌激素信号通路,发挥抗炎作用。
- 吴力超李俊峰张婷婷陶方方刘文洪
- 关键词：豆甾醇炎症网络药理学
- 鱼腥草内生真菌YX-2菌种鉴定及活性产物研究被引量：5
- 2016年
- 目的:对鱼腥草内生真菌YX-2进行菌种鉴定,并对其抑菌代谢产物进行初步研究。方法:采用形态学观察结合ITS r DNA基因序列分析鉴定菌株;用石油醚、乙酸乙酯及正丁醇对其发酵液进行萃取,并对发酵萃取物的抑菌活性进行初步研究。结果:形态和分子鉴定结果表明内生真菌YX-2归属于镰刀菌属的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum);抑菌实验表明乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物具有较强的抑菌作用,石油醚相几乎无抑菌效果,且乙酸乙酯相优于正丁醇相,乙酸乙酯相对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为50.00 mg/m L、50.00 mg/m L和25.00 mg/m L。结论:鱼腥草内生真菌YX-2为镰刀菌属的尖孢镰刀菌,其代谢产物抑菌效果明显,可进一步进行分离鉴定,获得单体化合物,为进一步药物开发提供前期研究和物质基础。
- 张杰李俊峰刘文洪周琢艳
- 关键词：鱼腥草内生真菌菌种鉴定抑菌活性
- 海洋放线菌NZ1203菌种鉴定及活性产物研究被引量：1
- 2014年
- 目的:对海洋放线菌NZ1203进行菌种鉴定,并对其抗肿瘤代谢产物进行初步研究。方法:通过形态学观察和16S rDNA基因序列分析,鉴定菌株;用石油醚、乙酸乙酯及正丁醇对其发酵液依次进行萃取,并且通过抑菌实验和抗肿瘤实验对其发酵萃取物的活性进行初步研究。结果:通过菌株鉴定,将放线菌NZ1203归属于极暗黄链霉菌属(Streptomyces fulvissimus);乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物具有较强的抑菌作用和良好的抗肿瘤效果,且正丁醇相优于乙酸乙酯相,石油醚相无抑菌效果。结论:海洋放线菌NZ1203为极暗黄链霉菌属,其代谢产物抑菌和抗肿瘤作用效果明显,可进一步进行分离鉴定,获得单体代谢产物,为进一步药物开发提供前期研究和物质基础。
- 张贝贝刘文洪李俊峰叶志青
- 关键词：海洋放线菌菌种鉴定RDNA基因抗肿瘤
- 半夏内生菌SY-Z5不同发酵方式代谢产物的抗菌、抗肿瘤活性研究被引量：3
- 2014年
- [目的]通过固体和液体两种方式对实验室保存的半夏内生菌SY-Z5进行发酵,分别提取代谢产物,初步研究其抑菌和抗肿瘤活性。[方法]将固体培养和摇床发酵的产物预处理后,分别依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,通过抑菌实验和抗肿瘤实验初步检测其提取物活性。[结果]SY-Z5两种发酵方式的代谢产物均具有抑菌和抗肿瘤活性,其中乙酸乙酯粗提物效果最明显,固体发酵效果好于液体发酵。[结论]内生菌SY-Z5代谢产物具有抑菌和抗肿瘤活性,活性代谢产物主要存在于乙酸乙酯相中,为进一步分离抑菌和抗肿瘤活性物质和新药开发筛选前体化合物奠定基础。
- 马旺刘文洪李俊峰张贝贝叶志青
- 关键词：半夏内生真菌抑菌活性
- 一种沉默人LINC01614表达的shRNA分子及其应用
- 一种沉默人LINC01614表达的shRNA分子及其应用，属于生物医学技术领域。本发明一方面提供了一种沉默人LINC01614表达的shRNA分子的靶标基因，另一方面提供了一种沉默人LINC01614表达的shRNA分子...
- 陶方方张志潜刘文洪徐烨刘青玲李俊峰
- 文献传递
- 基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌
- 基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌。本发明依据原核密码子使用频率表，人工合成不同偏好全基因序列和人源原基因序列，并克隆在不同表达载体上，然后转化到不同表达大肠杆菌菌株中，共构建27株工程菌。PCR筛选阳...
- 刘文洪叶志青王炜钢李俊峰张贝贝贾孟荻
- 文献传递
