潘茜
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化中的Ca^(2+)/CaM信号通路被引量：4
- 2014年
- 背景:课题组前期研究表明,红景天苷能诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向分化,Ca2+信号是实现其生物学信号传导的重要途径之一目的:探讨Ca2+/CaM信号通路在红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化中的作用及机制。方法:实验分为空白对照组和红景天苷诱导组,红景天苷诱导组将不同质量浓度红景天苷(5,10,20,50,100 mg/L)作用骨髓间充质干细胞24 h和100 mg/L红景天苷作用骨髓间充质干细胞12,24,48,72 h。采用Western blot方法分别检测红景天苷诱导骨髓间充质干细胞后神经标志分子MAP2和Ca2+/CaM信号通路中关键蛋白CaM、CaMKⅡ的表达水平。另外实验设阻断剂组,分别加Ca2+信号通路特异性阻断剂:500μmol/L EGTA(细胞外Ca2+螯合剂)、1 mmol/L Nifedipine(L型Ca2+通道阻断剂)、10 mmol/L LY294002(PI3K抑制剂)分别作用细胞30 min后,再加入100 mg/L红景天苷作用细胞24 h,采用Western blot方法检测阻断Ca2+/CaM信号通路后NSE、CaM的表达情况。结果与结论:1红景天苷诱导后,MAP2的表达上调(P<0.01),说明红景天苷可诱导骨髓间充质干细胞分化为神经细胞。2不同质量浓度红景天苷诱导骨髓间充质干细胞24 h后,10 mg/L红景天苷组CaM、CaMKⅡ的表达与其他诱导组比较显著上调(P<0.01);同一质量浓度红景天苷诱导72 h后CaM、CaMKⅡ表达明显下调(P<0.01)。3阻断细胞外Ca2+和PI3K信号通路后,NSE与CaM的表达水平较红景天苷诱导组上调(P<0.05)。结果表明,红景天苷通过抑制Ca2+/CaM信号通路实现骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化。
- 赵玲赵红斌潘茜李根王九娜唐俊杰
- 关键词：干细胞骨髓干细胞红景天苷骨髓间充质干细胞
- 红景天苷对小鼠MSCs的增殖及其细胞周期的影响被引量：3
- 2016年
- 目的本研究探讨了不同浓度红景天苷通过ERK信号通路对小鼠骨髓间充质干细胞增殖和细胞周期变化的影响及机制。方法实验分为对照组（D-MEM/F-12完全培养液）、不同浓度红景天苷（5-100μg/mL）诱导组和阻断组（5-100μg/mL＋30μg/L PD98059）,利用CCK8法、流式细胞术及Western blot分别检测ERK信号通路阻断前后细胞抑制率、细胞周期及其相关蛋白的表达。结果 10μg/mL诱导组和阻断组均能抑制细胞增殖,且5μg/mL（P〈0.01）、25μg/mL（P〈0.05）和100μg/mL（P〈0.05）诱导组对细胞抑制显著高于阻断组。25μg/mL诱导组和阻断组G0/G1期细胞比例均增加,细胞周期阻滞于G0/G1期。诱导组和阻断组cyclin A和cyclin D1蛋白的表达与对照组比较均下调,P21蛋白的表达上调。阻断组cyclin A蛋白的表达与诱导组比较明显下调（P〈0.01）;50和100μg/mL诱导组与阻断组相比cyclin D1蛋白表达显著下调,P21蛋白的表达显著上调（P〈0.01）。结论红景天苷能通过调节细胞周期相关蛋白的表达抑制小鼠MSCs细胞的增殖和细胞周期的改变。
- 秦文李晓云杨霄鹏潘茜赵红斌
- 关键词：红景天苷MSCS细胞周期ERK信号通路
- 红景天苷通过p21和Cyclin对MSCs细胞周期的影响
- 2014年
- 目的：探讨红景天苷诱导小鼠骨髓间充质干细胞marrow mesenchymal stem cells（MSCs）向神经元细胞定向分化的相关分子机制。方法：以MSCs（D1细胞）为对象,红景天苷作为诱导剂,运用流式细胞术、荧光免疫化学染色和Western blot方法分别检测红景天苷对细胞周期及Cyclin D1和p21蛋白表达的影响。结果：红景天苷诱导细胞24,48 h后,G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,说明红景天苷能显著促进细胞发生G0/G1期阻滞;荧光免疫化学染色表明,对照组和诱导12-24 h后Cyclin D1为阳性表达,阳性细胞数为71%,71%和44%,而48-72 h组表达呈阴性;诱导12-72 h后p21呈阳性表达,阳性细胞数为85%,90%,65%和73%,与对照组相比差异显著（P〈0.01）;Western blot检测表明Cyclin D1表达量随诱导时间的延长下调,p21蛋白表达水平上调。结论：红景天苷通过影响细胞周期相关蛋白Cyclin D1和p21抑制细胞增殖,使MSCs阻滞于G0/G1期,进而促进MSCs定向分化。本试验为阐明红景天苷诱导MSCs定向分化的分子机制奠定了坚实的理论基础。
- 潘茜陈亚男李根唐俊杰王九娜赵玲赵红斌
- 关键词：红景天苷细胞周期MSCS周期蛋白
