王小龙
- 作品数：20 被引量：16H指数：2
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- sIL-4R-NAP融合基因
- 本发明涉及基因领域，提供了一种融合基因，用于抗哮喘，该基因包含编码可溶性白介素4受体sIL-4R的片段a和编码中性粒细胞激活蛋白HP-NAP的片段b。该基因可连入载体，起到很好的抗哮喘效果。
- 刘鑫康巧珍傅国汲振余王婷曲晓丽王小龙杜明萱
- 文献传递
- 兔抗鼠IL-12p35多克隆抗体的制备及应用
- 2017年
- 利用分子克隆方法构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B亲和层析柱纯化后,获得重组融合蛋白GST-IL-12p35。以此蛋白为免疫抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体。采用ELISA法评估抗体效价,Western blot检测抗体特异性。LPS刺激小鼠脾细胞,ELISA法检测IL-12抗体阻断后细胞培养上清中的IFN-γ的分泌量。结果:成功构建重组载体pGEX-4T-1-IL-12a,并获得重组融合蛋白GST-IL-12p35(约48kDa)。抗原免疫新西兰大耳白兔制备IL-12p35多克隆抗体,ELISA法测得IL-12p35多克隆抗体效价为1256 000,Western blot证实制备的多克隆抗体能够识别结合重组蛋白。IL-12p35多克隆抗体能够有效地抑制LPS诱导的脾细胞IFN-γ的表达。
- 门颖丽康巧珍王小龙江慧刘诗梦汲振余王婷刘鑫
- 关键词：LPSIFN-Γ
- 一种布拉氏酵母菌发酵怀山药醇提物的制备方法及应用
- 一种布拉氏酵母菌发酵怀山药醇提物的制备方法及应用属于食品和医药领域，具体方案包括以下步骤：步骤一、将布拉氏酵母菌接种到灭菌后的怀山药培养基中进行发酵得到怀山药发酵产物；步骤二、取怀山药发酵产物的上清液，经浓缩、干燥得到怀...
- 伊娟娟李雪鲁吉珂郝利民邵怡雯康巧珍王小龙刘永奇高航凌云英
- HSP70、JNK和p38在放线菌素D诱导的A549细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2014年
- 目的:探讨HSP70、JNK和p38在放线菌素D(Act D)诱导的人肺腺癌A549细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT法确定Act D对A549细胞的染毒剂量。将对数生长期的A549细胞分为DMSO对照组、Act D染毒组、热处理(42℃,30 min)+Act D组、JNK抑制剂SP600125+Act D组和p38 MAPK抑制剂SB203580+Act D组进行处理。采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,Western blot检测各组细胞中HSP70、p-JNK、p-p38和Caspase-3的表达水平。结果:热处理、SP600125和SB203580均能降低Act D诱导的A549细胞的凋亡率(F=7 904.576,P<0.001)。热处理+Act D组的HSP70表达水平高于其余各组(F=46.640,P<0.001),而p-JNK、p-p38和Caspase-3的表达水平均低于Act D处理组(F=122.381、44.104和50.650,P<0.05)。Act D能提高Caspase-3的表达水平,且热处理、SP600125和SB203580均能降低Act D引起的Caspase-3的高表达状态。结论:热处理诱导产生的HSP70、JNK通路抑制剂SP600125和p38 MAPK通路抑制剂SB203580均可以抑制由Act D诱导的A549细胞凋亡。
- 王小龙冯斐斐孙鹏辉李杰陆皓泉阙菡雅徐小艳姚武周舫
- 关键词：凋亡热休克蛋白70放线菌素DJNKP38
- 肺腺癌组织中HSP70多肽复合物的分离及纯化被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨肺腺癌组织中HSP70多肽复合物分离及纯化的可行性方案。方法:采用裂解液裂解、超声破碎、ConA-sepharose亲和层析和DEAE阴离子交换层析方法,从肺腺癌组织中分离纯化HSP70蛋白复合物;通过SDS-PAGE电泳、Westernblot检测获得蛋白;运用Bradford法对其进行定量分析。结果:通过该实验方法可以从1g肺癌组织中获取110μg左右的HSP70多肽复合物,其相对分子质量为70000。结论:采用ConA-sepharose亲和层析和DEAE阴离子亲和层析相结合的蛋白纯化法可以获取高纯度的HSP70多肽复合物。
- 李杰梁守沛陆皓泉孙鹏辉王小龙许东姚武周舫
- 关键词：肺腺癌
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用，属于食品与医药领域，具体方案包括以下步骤：步骤一、将多糖溶于去离子水中得到溶液A；步骤二、在搅拌的条件下将无水乙醇逐滴加到溶液A中，继续搅拌，得到悬浮液B；步骤三、将悬浮液B离心分离，沉...
- 伊娟娟鲁吉珂刘永奇刘可可康巧珍王小龙李雪高航
- 肺癌中热休克蛋白70-2基因多态性对其mRNA转录及蛋白表达水平的影响
- 2012年
- 目的探讨肺癌组织中热休克蛋h70-2（heatshockprotein70-2，HSP70-2）1267A／G位点基因多态性对HSP70-2mRNA转录及蛋白表达水平的影响。方法以郑州市某医院2008年2-8月经组织病理学确诊的46例肺癌患者为对象，应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测其HSP70-21267A／G位点多态性，应用RT-PCR法检测HSP70-2mRNA水平，应用Westernhlt，tting测定HSP70水平。。结果肺癌组织中，HSP70-2mRNA转录水平（1．02±0．30）和HSP70表达水平（0．44±0．12）均高于癌旁止常组织（分别为0．19±0．04、0．12±0．02）（P值均〈0．01）。肺癌患并HSP70-21267A／G位点携带AA基因型者其HSP70-2mRNA水平（1．32±0．22）高于携带AG、GG基因型者（分别为0．95±0．17、0．70±0．16）（P〈0．01）；HSP70-21267A／G位点各基因型携带者HSP70水平分别为：0．47±0．13（AA型）、0．42±0．11（AG型）、0．45±0．11（GG型），其差异无统计学意义（P〉0．01）。结论HSP70-21267A／G位点多态性影响肺癌组织内HSP70mRNA转录水平，但对HSP70的表达水平无影响。
- 陆皓泉王玉珍孙鹏辉梁守沛李杰王小龙许东姚武吴逸明周舫
- 关键词：HSP多态性单核苷酸肺肿瘤
- rMBP-NAP依赖IL-12/IL-23轴对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究r MBP-NAP在肝癌H22荷瘤小鼠模型中的肿瘤生长抑制作用以及IL-12/IL-23在其发挥抗肿瘤作用中的角色。方法 BABL/c小鼠左前肢腋下皮下注射2×106个H22肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,荷瘤后第2天将小鼠随机分为两组,PBS组和r MBP-NAP组,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行治疗,期间监测肿瘤体积。取荷瘤小鼠脾脏制成单细胞悬液,分为对照组和抗体阻断组,同时加入丝裂霉素C处理过的H22细胞和r MBP-NAP与脾细胞共培养,抗体阻断组中分别加入anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体,对照组中加入同型抗体。于培养3 d和7 d后检测IFN-γ的表达。结果相对于PBS组,r MBP-NAP治疗组小鼠的肿瘤生长显著减缓。r MBP-NAP刺激后,荷瘤小鼠脾细胞分泌大量IFN-γ,共培养3 d和7 d后,IFN-γ表达持续累积。anti-IL-12抗体和anti-IL-23抗体阻断后,均可导致IFN-γ的表达量显著性下降。结论 r MBP-NAP能够显著性抑制H22荷瘤小鼠肿瘤的生长。
- 王小龙康巧珍门颖丽黄夏冰张亚萌刘鑫
- 关键词：IL-12IL-23IFN
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用
- 一种多糖纳米剂型的制备方法和应用，属于食品与医药领域，具体方案包括以下步骤：步骤一、将多糖溶于去离子水中得到溶液A；步骤二、在搅拌的条件下将无水乙醇逐滴加到溶液A中，继续搅拌，得到悬浮液B；步骤三、将悬浮液B离心分离，沉...
- 伊娟娟鲁吉珂刘永奇刘可可康巧珍王小龙李雪高航
- MBP在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用被引量：1
- 2016年
- 目的：探讨大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（MBP）在小鼠肝癌H22荷瘤模型中的抗肿瘤作用及可能机制。方法：将12只6～8周龄的BALB/c小鼠皮下注射2×10^6个H22细胞,建立荷瘤模型,荷瘤后第2天将小鼠分为PBS组和MBP组,每组6只,并通过皮下瘤旁注射给药的方式进行干预,期间监测肿瘤体积和小鼠体重变化,测量肿瘤和各脏器质量,ELISA法检测脾细胞分泌IL-12和IFN-γ的水平,Real-time PCR检测肿瘤组织中IFN-γ和IL-17A mRNA的相对表达量。结果：MBP能抑制肿瘤的生长（P〈0.05）。与PBS组相比,MBP组小鼠脾细胞中IL-12、IFN-γ分泌量上升,肿瘤组织中IFN-γmRNA的表达量上升,IL-17A mRNA的表达量下降（P〈0.05）。结论：MBP能够有效抑制肝癌H22肿瘤生长,其作用可能是通过激活Th1型免疫反应和抑制Th17型免疫反应。
- 门颖丽康巧珍王小龙杜明宣黄夏冰张亚萌汲振余王婷刘鑫
- 关键词：麦芽糖结合蛋白TH1TH17
