王祎婷
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学生物医学工程学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家重大科学仪器设备开发专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- siRNA联合沉默MMP-9和FAK基因对小鼠黑色素瘤高转移细胞B16F10体外侵袭和迁移的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:观察双基因联合干扰MMP-9和FAK对小鼠黑色素瘤高转移细胞B16F10体外侵袭、迁移能力的影响。方法:分别构建pGV102-MMP9-siRNA,pGV102-FAK-siRNA重组质粒载体,脂质体^(TM)2000介导转染小鼠黑色素瘤B16F10细胞,实验分为空白对照组、Anti-MMP-9组,AntiFAK组、Anti-MMP-9&FAK组、阴性对照组。经G418筛选GFP+克隆,流式细胞仪分析阳性率,激光共聚焦观察转染后细胞形态,半定量RT-PCR检测各组B16F10细胞MMP-9和FAK基因的mRNA转录水平,Transwell侵袭、迁移实验测定各组B16F10细胞体外侵袭、迁移能力。结果:经G418筛选,3个转染组阳性率分别为92.41±1.64%,95.72±0.21%,91.52±0.11%,且转染后细胞形态良好;与空白对照组相比,3个转染组的MMP-9,FAK mRNA转录水平下降明显(P<0.01),迁移、侵袭能力明显降低(P<0.01),但Anti-MMP-9&FAK组细胞侵袭迁移能力显著低于Anti-MMP-9组和Anti-FAK组(P<0.01)。结论:相比单独沉默MMP-9或FAK,联合沉默MMP-9和FAK可明显降低小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外迁移、侵袭能力。
- 汤禾静唐照勇刘隆兴张小梅王祎婷方廖琼
- 关键词：MMP-9FAK黑色素瘤
- 不同离心力对B16-F10细胞胞外微囊泡尺度、RNA和蛋白成分的影响被引量：1
- 2016年
- 分析不同离心力对胞外微囊泡尺度、RNA和蛋白成分的影响。在分离纯化小鼠黑色素瘤B16-F10细胞胞外微囊泡过程中,采用12 000×g、100 000×g两种离心力提纯,利用纳米颗粒跟踪分析法分析微囊泡的尺度分布,透射电镜观察微囊泡超微结构,Western-blot鉴定微囊泡蛋白特征,BCA法分析微囊泡内容蛋白含量,毛细管电泳分析微囊泡RNA的性质和水平。结果显示,12 000×g组的平均粒径为233±93.5 nm,100 000×g组的平均粒径为175±74 nm(P<0.05)12 000×g组微囊泡的蛋白浓度为3.942±0.427 g/L,100 000×g组微囊泡的蛋白浓度为2.428±0.113 g/L(P<0.01),并表达exosome特异性蛋白Tsg101蛋白;12 000×g组微囊泡的RNA总量为22.662 0 mg/L,在258 nt时达到最高,100 000×g组微囊泡的RNA总量为3.280 1 mg/L,在283 nt时达到最高(P<0.05)。因此,微囊泡尺度与离心力相关,不同尺度微囊泡所含蛋白、RNA不同。
- 王陈美依方廖琼王祎婷王德婧王智彪
- 关键词：黑色素瘤细胞离心力RNA
