马维
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
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- 经典型蛋白激酶Cγ及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺缺血损伤中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中的作用。方法利用cPKCγ基因敲除(cPKCγ-/-)小鼠和原代培养脑皮层神经元1hOGD/24h复糖复氧(R)模拟离体细胞缺血模型,给予14-3-3γ抑制剂R18干扰,采用免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,验证cPKCγ与14-3-3γ的相互作用及其对原代培养小鼠脑皮层神经元1hOGD/24hR缺血损伤的影响。结果Co-IP结果证明,14-3-3γ与cPKCγ在小鼠脑皮层中确实存在相互作用;1hOGD/24hR处理使原代培养野生型(cPKCγ+/+)小鼠脑皮层神经元内cPKCγ蛋白水平明显降低,而14-3-3γ蛋白水平显著增加(P<0.05,每组n=6);对于原代培养cPKCγ-/-小鼠脑皮层神经元,尽管14-3-3γ表达水平明显高于cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元,但1hOGD/24hR处理却使14-3-3γ表达水平显著降低(P<0.05,每组n=6),提示cPKCγ可影响神经元内14-3-3γ的表达水平。此外,MTT结果表明,14-3-3γ抑制剂R18(100μmol/L)可显著加重1hOGD/24hR处理原代培养cPKCγ-/-和cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元的缺血损伤(P<0.05,每组n=6)。结论cPKCγ与14-3-3γ在小鼠脑皮层神经元内存在相互作用并影响14-3-3γ的蛋白表达水平,cPKCγ和14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元缺血/低氧损伤中起保护作用。
- 章欣欣杨璇马维陈璐勔韩松李俊发
- 关键词：缺血损伤免疫印迹法小鼠
- TGF-β在氩激光诱导AMD小鼠脉络膜新生血管形成中作用
- 目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)在年龄相关性黄斑变性(AMD)致脉络膜新生血管形成(CNV)中的作用。方法:将周龄为6-8W的健康雄性C57BL/6J小鼠,分为正常对照、光凝制备AMD模型、光凝+PBS对照和光凝...
- 马维汪晓磊章欣欣陈璐勔韩松王艳玲李俊发
- 文献传递
- 自噬在氧-糖剥夺诱导的原代培养小鼠脑皮层神经元缺血损伤中作用
- 目的:在离体细胞水平,探讨不同时程氧-糖剥夺(OGD)致原代培养小鼠脑皮层神经元缺血损伤中细胞自噬的变化情况和可能作用。方法:利用新出生24h内C57BL/6J乳鼠的脑皮层神经元,进行原代培养7天后,并将其分为常氧组、O...
- 陈璐勔马维章欣欣罗艳琳赵丽韩松李俊发
- 关键词：原代培养神经元缺血性损伤
- 文献传递
- 转化生长因子-β在激光诱导脉络膜新生血管形成中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的 观察转化生长因子-β（TGF-β）在激光诱导脉络膜新生血管形成（CNV）中的作用.方法 6-8周龄雄性C57BL/6J小鼠80只随机分为正常对照组、光凝模型组、光凝加磷酸盐缓冲液（PBS）对照组（PBS对照组）、光凝加TGF-β受体抑制剂组（TGF-β受体抑制剂组）,每组20只.光凝模型组、PBS对照组及TGF-β受体抑制剂组小鼠均采用激光光凝诱导CNV形成.激光光凝后1、2、3、4周,对正常对照组及光凝模型组小鼠行荧光素眼底血管造影（FFA）检查,动态观察小鼠模型CNV的形成情况;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测正常对照组及光凝模型组小鼠视网膜内TGF-β的蛋白表达以及正常对照组、PBS对照组、TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内VEGF和TNF-α的蛋白表达.激光光凝后2周,作视网膜色素上皮细胞/脉络膜组织铺片,采用荧光染色计算各组CNV面积.结果 FFA检查结果显示,正常对照组小鼠视网膜血管以视盘为中心呈放射状走行,脉络膜血管呈网状分布;激光光凝后1周,光凝模型组小鼠光凝区可见荧光素渗漏呈盘状强荧光团.Western blot检测结果显示,光凝模型组小鼠视网膜内TGF-β蛋白表达随激光光凝时间延长而逐渐升高.光凝模型组与正常对照组小鼠视网膜内TGF-β蛋白表达比较,差异有统计学意义（F=13.042,P＜0.05）.激光光凝后1、2、3、4周,PBS对照组、TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内TNF-α（F=14.721、17.509）、VEGF（F=18.890、11.251）蛋白表达均较正常对照组明显增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与PBS对照组比较,TGF-β受体抑制剂组小鼠视网膜内TNF-α、VEGF蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（F=21.321、16.160,P＜0.05）.激光光凝后2周,TGF-β受体抑制剂组小鼠脉络膜内CNV面积明显小于PBS对照组及光凝模型组,差异均有统计学意义（F=4.482,P＜0.05）.结论 TGF-β可能通过上调TNF-α和VEGF蛋白表达水�
- 马维汪晓磊章欣欣陈璐勔韩松李俊发
- 关键词：血管内皮生长因子类
- 抑制IKK2/NF-κB信号通路在小鼠脉络膜新生血管形成中的作用被引量：1
- 2018年
- 目的观察IκB激酶2(IKK2)抑制剂TPCA-1在激光诱导小鼠脉络膜新生血管(CNV)形成中的作用。方法成年C57BL/6J小鼠75只,雄性,体重20~30 g,按随机数字表法分为正常对照组、光凝模型组、光凝加TPCA-1抑制剂组(TPCA-1抑制剂组),每组25只。光凝模型组、TPCA-1抑制剂组小鼠均采用激光光凝诱导CNV成形。TPCA-1抑制剂组小鼠激光光凝后玻璃体腔注射TPCA-1。激光光凝后1周,眼底荧光血管造影(FFA)检查正常对照组、光凝模型组、TPCA-1抑制剂组小鼠眼底的CNV形成情况;激光光凝后1周、2周、3周、4周,采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)观察各组中血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达情况。激光光凝后2周,行视网膜色素上皮(RPE)/脉络膜组织铺片Isolectin B4荧光染色,定量计算CNV面积。结果 FFA结果显示,正常对照组视网膜各层动静脉管壁完整,未见荧光渗漏;激光光凝术后1周,光凝模型组激光部位强荧光,造影晚期荧光渗漏,边界模糊。TPCA-1抑制剂组激光部位强荧光。Western blotting结果显示,激光光凝后1周、2周、3周、4周,光凝模型组中VEGF(F=42.71)、TNF-α(F=33.0)蛋白表达均高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);在TPCA-1抑制剂组中VEGF(F=16.97)、TNF-α(F=19.18)蛋白表达均低于在光凝模型组中的表达(P<0.05)。激光光凝后2周,RPE/脉络膜组织铺片荧光染色定量计算显示,光凝模型组CNV面积(24 380±1 357.06μm^2)明显大于TPCA-1抑制剂组CNV面积(16 673±2 635.96μm^2),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TPCA-1通过抑制IKK2,可能干扰IKK2/NF-κB信号通路,干预VEGF、TNF-α的表达,从而减少CNV形成。
- 汪晓磊马维李俊发李俊发孟照洋
- 关键词：小鼠脉络膜新生血管肿瘤坏死因子-Α
