刘云野
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：东北农业大学更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 抗母源抗体重组新城疫疫苗的研究
- 任桂萍李德山刘云野
- 重组新城疫病毒对肺癌荷瘤鼠的治疗效果研究被引量：1
- 2018年
- 新城疫病毒用于肿瘤治疗具有良好靶向性和安全性,在众多溶瘤制剂中有独特优势。试验通过反向遗传操作技术成功拯救3株重组新城疫病毒r Clone30-IL2、r Clone30-P53和r Clone30-P53-IL2。经RT-PCR鉴定,表明插入新城疫病毒基因组中IL2、P53基因和P53-IL2双基因均插入预期位置,未发生突变。重组新城疫病毒在DF-1细胞中生长曲线表明,其与原代毒株生长特征相同。重组病毒在鸡胚中增殖稳定性试验表明,外源基因插入未影响重组病毒在鸡胚中增殖能力。体外肿瘤细胞生长抑制试验表明,与空载体r Clone30相比,r Clone30-IL2、r Clone30-P53和r Clone30-P53-IL2对LLC肺肿瘤细胞生长抑制效果更显著(P<0.01),呈剂量依赖性。体内抑瘤试验结果表明,r Clone30-IL2、r Clone30-P53和r Clone30-P53-IL2与尿囊液相比对肿瘤抑制效果差异极显著(P<0.01)。r Clone30-P53-IL2与r Clone30-IL2和rClone30-P53相比,对肿瘤抑制效果差异显著(P<0.05)。小鼠生存率结果表明,经rClone30-P53-IL-2治疗小鼠存活率最高,与其他组相比差异极显著(P <0.01)。综上所述,联合P53和IL2重组新城疫病毒对肺肿瘤治疗效果优于单一抗肿瘤相关因子。研究为筛选先导病毒治疗肺癌奠定基础。
- 李德山张旭刘云野田贵游孙田安莹陈睿
- 关键词：重组新城疫病毒反向遗传操作技术肺肿瘤
- 鸡新型新城疫疫苗病毒毒株rClone30‑chIL15及其应用
- 本发明公开了一种鸡新型新城疫病毒毒株及其应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株，其制备方法包括如下步骤：将重组质粒pBrClone30‑chIL15和辅助质粒pBL‑N、pBL‑P和pBL‑L共转染哺乳动物细胞BHK‑21并...
- 何金娇李德山张天援王卉刘云野
- 文献传递
- 鞭毛蛋白及鸡GM-CSF重组新城疫病毒对鸡的免疫增强作用被引量：1
- 2015年
- 为评价鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白(FliC)以及鸡GM-CSF(chGM-CSF)对新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗的免疫增强效果,本实验通过PCR扩增fliC,并合成chGM-CSF编码基因,分别构建重组质粒pBrClone30-fliC和pBrClone30-GM-CSF,拯救获得重组病毒rClone30-fliC和rClone30-GM-CSF。RT-PCR和ELISA检测结果表明:fliC和chGM-CSF基因正确插入重组病毒,并获得稳定表达;重组病毒免疫7 d后重组NDV HI抗体效价检测显示,实验组平均HI效价分别达到4.5 log2和4.8 log2,而r Clone30组和空白组HI效价仅为3 log2和1 log2;免疫7 d后攻毒,空白组SPF鸡均死亡,rClone30组有两例发病,实验组SPF鸡全部存活并且无任何临床症状。本研究结果表明,FliC和chGM-CSF作为佐剂能够有效提高弱毒疫苗的免疫效果。
- 王卉张天援吕政孙田尹杰超吴云舟刘云野吴金任桂萍李德山
- 关键词：鞭毛蛋白新城疫病毒反向遗传操作技术
- 鸡新型新城疫疫苗病毒毒株rClone30-chIL15及其应用
- 本发明公开了一种鸡新型新城疫病毒毒株及其应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株，其制备方法包括如下步骤：将重组质粒pBrClone30-chIL15和辅助质粒pBL-N、pBL-P和pBL-L共转染哺乳动物细胞BHK-21并...
- 何金娇李德山张天援王卉刘云野
- 文献传递
- 表达鸡IL2和IL15重组新城疫病毒的免疫增强作用研究被引量：1
- 2014年
- 为提高新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗的免疫保护效果,本研究选取鸡IL2(chIL2)和chIL15两个细胞因子作为分子佐剂,通过反向遗传操作技术分别将这两个基因克隆于NDV Clone30株中,构建表达chIL2和chIL15的重组病毒rClone30-chIL2和rClone30-ch IL15。ELISA法检测结果表明两种细胞因子在重组病毒中均能够稳定表达。将重组病毒免疫雏鸡,以NDV强毒BJ株进行攻毒试验,测定其抗体产生情况和保护效果。结果表明,两种重组病毒均可以诱导雏鸡产生较高水平抗体;而且两种重组病毒保护率可达100%,具有较好的保护效果。本研究为进一步提高NDV重组基因工程疫苗的效果提供了新思路。
- 张天援吕政王卉朱升龙刘云野孙田尹杰超吴云舟吴金任桂萍李德山
- 关键词：反向遗传操作技术新城疫病毒
