闫雪静
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- TXNDC5介导缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制被引量：1
- 2014年
- 目的研究TXNDC5在缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制过程中的作用。方法在人HeLa细胞中分别过表达TXDNC5或用干扰小RNA(siRNA)抑制TXDNC5的表达后,对其进行正常或缺血清培养,采用Western blot法检测TXDNC5蛋白水平,荧光实时定量PCR检测TXDNC5 mRNA水平,细胞增殖检测试剂盒(MTS法)检测活细胞数,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果缺血清诱导HeLa细胞增殖抑制时,TXNDC5 mRNA水平下降(P<0.05),蛋白水平显著升高,TXNDC5 mRNA的稳定性不受影响,而放线菌酮则可消除缺血清诱导TXNDC5蛋白水平升高的作用。在HeLa细胞中过表达TXNDC5对细胞增殖速度无影响。抑制TXNDC5的表达能减弱缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制(P<0.05),使S期细胞比例略有增加(P<0.05),但对细胞凋亡没有明显影响。结论 TXNDC5介导了缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制。
- 张红飞张洁雯孔丽娟王乐朱宁郭思超邱川闫雪静陈梅红
- 关键词：HELA细胞细胞增殖
- 肾母细胞瘤过表达基因N末端点突变抑制其促骨肉瘤细胞的侵袭能力
- 目的：本研究主要探讨骨肉瘤中NOV结构域的功能.方法：通过PCR方法获得点突变的NOV.在过表达NOV和mNOV的MG63和SaoS2细胞系中通过transwell实验分析细胞侵袭能力,并检测侵袭Marker MMP 1...
- 闫雪静陈梅红
- 关键词：骨肉瘤NOVMMP13
- 基于微小RNA架构的新型随机短发夹RNA文库构建被引量：2
- 2017年
- 目的构建高效发夹状随机短发夹RNA(shRNA)文库。方法构建由polⅡ启动子(CMV)驱动的增强绿色荧光蛋白(EGFP)下游连接shRNA的表达载体,转染细胞后收取蛋白,用Western blot和荧光素酶报告基因系统检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制效率。在由CMV启动的EGFP下游连接shRNA的表达载体基础上,构建EGFP下游连接基于微小RNA(miRNA)架构的shRNA表达载体,转染细胞后收取RNA,用实时定量荧光PCR法检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制效果。基于EGFP下游连接基于miRNA架构的shRNA表达载体实时定量荧光PCR的检测结果,构建基于miRNA架构的大容量随机shRNA文库。结果由polⅡ启动子(CMV)驱动发夹状shRNA转录时,shRNA要位于一个大的转录本之后才能被有效转录。基于miRNA架构环境可提高shRNA的干扰效率。构建了一个容量为1.8×10~7的基于miRNA架构的大容量随机shRNA文库。结论构建了一个大容量的新型随机shRNA文库。
- 郭倩朱宁卜萌萌郭思超闫雪静陈倩陈梅红
- 关键词：微小RNA短发夹RNA
