杨亚帆
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省高等学校优秀人才支持计划沈阳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人微血管内皮细胞促进背根神经节细胞增殖的机制
- 2015年
- 目的 探讨共培养条件下人微血管内皮细胞（HMVEC）对背根神经节细胞（DRGC）增殖的调控机制.方法 分离培养小鼠DRGC,采用Transwell半透膜建立双层细胞共培养体系,实验设DRGC单独培养组、DRGC与HMVEC共培养组、SU5416组和二甲基亚砜（DMSO）组.SU5416组预先用血管内皮生长因子受体2（Flk-1）抑制剂SU5416处理HMVEC 6 h后再与DRGC共培养.相差显微镜观察各组DRGC生长情况;噻唑蓝（MTT）检测DRGC细胞增殖;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测共培养细胞上清液中血管内皮生长因子（VEGF）、神经生长因子（NGF）的表达;Western blot检测磷酸化Flk-1（p-Flk-1）、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期素（Cyclin） D1细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）的表达.结果 与DRGC单独培养组比较,HMVEC共培养组DRGC增殖率显著增加,在培养12h后最为明显,增加39.07％ （P ＜0.01）,VEGF、NGF、PCNA、Cyclin D1、p-Flk-1、p-ERK1/2表达量明显增加（P＜0.05）.DMSO组与共培养组差异无统计学意义（P＞0.05）.与DMSO组比较,SU5416组DRGC增殖率显著降低,于培养12 h后下降最明显,降低23.93％（P＜0.01）.VEGF、NGF、PCNA、Cyclin D1表达量减少,Flk-1与ERK1/2磷酸化水平降低,p-Flk-1和p-ERK1/2相对表达量分别降低50.69％和23.12％ （P ＜0.01）.结论 Flk-1抑制剂可阻断HMVEC共培养对DRGC增殖促进作用,HMVEC共培养可能通过VEGF/Flk-1途径激活ERK/丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路,进而促进DRGC增殖.
- 原泉程扬杨亚帆孙立
- 关键词：背根神经节细胞共培养增殖
- 小鼠脊髓背根神经节细胞与人微血管内皮细胞共培养对细胞增殖的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 观察小鼠脊髓背根神经节细胞（DRGC）与人微血管内皮细胞（HMVEC）共培养对细胞增殖的影响,并探讨其机制.方法 分离培养小鼠DRGC,并与HMVEC进行共培养,设为DRGC组、HMVEC组、DRGC＋ HMVEC组.噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）及Western blot检测血管内皮生长因子（VEGF）、神经生长因子（NGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期蛋白D1（Cyclin Dl） mRNA及蛋白的表达.结果 细胞培养24h后,DRGC＋ HMVEC组相对于DRGC组和HMVEC组的细胞增殖率分别为136.29％和137.45％,细胞增殖能力显著提高（P＜0.05）.VEGF、NGF、PCNA和Cyclin Dl mRNA和蛋白的表达在DRGC＋HMVEC组中最高,与其他两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 共培养DRGC和HMVEC能够促进VEGF和NGF的表达,并可能通过调控PCNA和Cyclin D1的表达促进共培养体系细胞增殖能力.
- 原泉程扬杨亚帆孙立郭金明
- 关键词：神经生长因子血管内皮细胞生长因子增殖
