沙莉
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用重组致密颗粒抗原6检测诊断弓形虫病的研究
- 2015年
- 目的以纯化的重组致密颗粒抗原6作为检测抗原,建立检测弓形虫IgM和IgG抗体的ELISA新方法,为临床治疗提供参考依据。方法 2007年1月-2011年12月对59份弓形虫阳性血清标本进行检测,并与进口弓形虫ELISA-IgM和IgG试剂盒进行比较,数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果 ELISA法优化检测条件为包被抗原浓度为40μg/ml;敏感度比较表明血清稀释度在1∶10~1∶80为优;特异性试验表明IgM阳性的抑制率为97.36%、IgG阳性的抑制率为97.98%;用rGRA6-IgM-ELISA对混合弓形虫IgM阳性和阴性血清的精密度检测表明,IgM阳性的变异系数（CV值）为2.76%,IgM阴性混合血清的CV值为0.45%;用rGRA6-IgG-ELISA对混合弓形虫IgG阳性和阴性血清的精密度检测表明,IgG阳性的变异系数（CV值）为2.89%,IgG阴性混合血清的CV值为1.65%;rGRA6-IgM-ELISA与进口试剂盒的总符合率为91.01%,rGRA6-IgG-ELISA与进口试剂盒的总符合率为94.59%。结论重组抗原rGRA6能被弓形虫感染患者血清IgM和IgG抗体所识别,用重组抗原rGRA6构建的试剂盒诊断弓形虫病具有较高的特异性、敏感性。
- 朱翔钮志林路文明丁宁玲吴燕王锋叶建中沙莉李扬龚婵聪黄金龙高胜兰
- 关键词：弓形虫酶联免疫吸附试验
- 截短序列和全序列HBcAg基因以及HBV C-S融合基因的克隆与表达
- 2015年
- 目的构建截短序列和全序列HBcAg基因和HBc-HBs Ag融合基因原核表达质粒,研究目的蛋白在大肠杆菌中的表达及其免疫原性。方法利用HBV全基因(adr亚型)质粒pUCm T-HBV分别扩增HBs Ag截短基因、HBcAg截短基因和HBcAg全基因,构建成重组质粒p SK-HBs、p SK-HBc和p KS-HBV C,经DNA序列测定鉴定后,分别将HBcAg截短基因、HBcAg全基因及HBc-HBs Ag融合基因亚克隆至表达质粒PET-30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达HBcAg截短基因、HBcAg全基因和HBc-HBs Ag融合基因产物,采用PAGE-SDS和免疫印迹法对表达产物进行鉴定。结果成功构建了含HBcAg截短基因、HBcAg全基因和HBc-HBs Ag融合基因的原核表达质粒;成功构建的质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中能大量表达HBcAg蛋白和HBc-HBs Ag融合蛋白,免疫印迹分析结果显示表达产物具有免疫原性。结论成功构建的原核表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)中能顺利表达HBcAg蛋白和HBc-HBs Ag融合蛋白,表达产物具有免疫原性,为慢性乙型肝炎特异性免疫治疗研究提供了实验基础。
- 朱翔路文明丁宁玲叶建中王锋沙莉李扬高胜兰
- 关键词：HBSAGHBCAG原核表达质粒
