智强
- 作品数：15 被引量：26H指数：3
- 供职机构：安徽桑尼生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 二连体人干细胞因子基因的构建及其在昆虫细胞中的表达被引量：1
- 2002年
- 应用DNA重组技术构建两端为人干细胞因子 (hSCF) 1～ 16 5肽编码区 ,中间为柔性连接肽 (GGGGSGGGGSGG)编码区的头尾相连的二连体基因 (dSCF) ,并将其插入杆状病毒转移载体 pVL1392中 .重组转移载体 pVL1392 dSCF与野生型苜蓿夜蛾核型多角体病毒AcNPVDNA共转染草地贪夜蛾细胞Sf9,经胞内同源重组和 4轮筛选获得纯净的重组病毒AcNPV dSCF .重组病毒感染Sf9单层培养细胞时 ,主要以分泌形式表达二连体蛋白 ,经MTT比色法测得dSCF的表达量约为 1180units/3× 10 6cells .WesternBlotting鉴定了昆虫细胞表达的重组人二连体干细胞因子 (rhdSCF) ,两种主要产物的分子量分别为 4 0kDa、4 9kDa .
- 唐晶朱洁智强焦瑞清韩俊海秦浚川
- 关键词：昆虫细胞基因重组
- 重组人内抑素对内皮细胞增殖的影响
- 2002年
- 目的 探讨原核表达的可溶性重组人内抑素(rhEndo)对ECV 30 4内皮细胞和原代培养兔主动脉内皮细胞增殖的影响。方法 利用酶标仪进行噻唑蓝 (MTT)法检测 ,同时采用倒置相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪、半胱天冬酶 3活性分析观察该内抑素对碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)刺激的血管内皮细胞增殖的影响。结果 该rhEndo明显抑制ECV 30 4细胞的增殖 ,MultiCycleDNACycle软件分析表明细胞增殖阻滞在G1期 ,流式细胞仪检测发现该内抑素可诱导ECV 30 4细胞凋亡 ,且与半胱天冬酶 3活性增强有关 ,但对原代培养的兔主动脉内皮细胞增殖并未产生明显的作用。结论 内抑素可明显抑制ECV 30 4细胞增殖并诱导其发生凋亡 ,但对原代培养的兔主动脉内皮细胞增殖没有明显的影响 ,这将有利于与血管新生有关的疾病如癌症等的治疗。
- 任斌朱年春智强罗昭锋王玉珍
- 关键词：重组人内抑素内皮细胞增殖细胞增殖细胞凋亡
- MTT法检测重组人内抑素对人内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨观察重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖影响的方法。方法 采用MTT法观察不同浓度重组人胎儿内抑素是否对碱性成纤维细胞生长因子刺激的人血管内皮细胞系ECV增殖产生抑制作用。结果 MTT法分析显示细胞活力与光密度改变之间存在线性关系 ,重组人内抑素可抑制胎儿血管内皮细胞ECV的增殖 ,半数抑制浓度约为 3 5 0mg·L-1。结论 MTT法检测重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖的抑制作用准确可靠、操作简便。
- 智强任斌朱年春张礼秀刘建辉
- 关键词：内皮血管MTT法细胞增殖重组人内抑素血管生成抑制剂
- 重组人白细胞介素10对角朊细胞增殖及产生细胞因子的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 :研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对无血清培养的角朊细胞增殖和产生细胞因子的影响 ,探讨其治疗银屑病的作用机制。方法 :用四甲基偶氮唑蓝比色法 (MTT)测定其对细胞增殖的影响 ;小鼠胸腺细胞增殖法检测白细胞介素 1(IL 1) ;ELISA法检测白细胞介素 6 (IL 6 )、白细胞介素 8(IL 8)。结果 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞增殖与IL 1、IL 6及IL 8的分泌 ,并呈剂量依赖关系。结论 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞与细胞因子分泌 ,可能是治疗银屑病的作用机理之一。
- 陈飞虎陈敏珠李俊汪光宝智强
- 关键词：重组人白细胞介素10角朊细胞细胞因子银屑病
- rhIL-10对小鼠T淋巴细胞及NK细胞活性的影响被引量：2
- 1999年
- 目的 研究ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 对小鼠免疫功能的影响。方法 用 Ｍ Ｔ Ｔ 还原法检测 Ｃｏｎ Ａ 诱导的 Ｔ 淋巴细胞增殖试验，中性红染色法检测 Ｎ Ｋ 细胞活性。结果 ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 能抑制小鼠 Ｔ 淋巴细胞及 Ｎ Ｋ 细胞活性（ Ｐ＜ ００１） ，这种抑制作用随剂量增加而加强。结论 ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 能抑制小鼠 Ｔ 淋巴细胞及 Ｎ Ｋ 细胞活性，并呈剂量依赖关系。
- 陈飞虎路景涛陈敏珠智强
- 关键词：白细胞介素10T细胞NK细胞RHIL-10小鼠
- 重组葡激酶及其在大肠杆菌中高效表达与纯化被引量：2
- 2001年
- 目的 研究高效表达葡激酶载体的构建及其体外表达与产物的纯化。方法 用PCR方法扩增葡激酶cDNA ,插入质粒pET 2 2b中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导表达 ,表达产物用Q Poros和S Sepharose纯化。 结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为葡激酶重组质粒 ,体外表达产物经离子交换纯化后HPLC纯度达 98%以上 ,SDS PAGE和WesternBlot实验证实该产物为葡激酶。结论 成功构建了重组葡激酶表达载体 ,并经表达纯化获得高纯度葡激酶 ,为产业化和临床应用奠定了良好基础。
- 智强周青任斌朱年春赵丽萍
- 关键词：聚合酶链反应大肠杆菌质粒HPLC离子交换重组葡激酶
- 重组人白细胞介素-10对银屑病患者外周血单个核细胞的作用
- 2000年
- 陈英智强朱年春
- 关键词：银屑病外周血单个核细胞
- 肿瘤治疗新思路——抗血管生成来治疗实体瘤被引量：1
- 1999年
- 陈飞虎智强杨军
- 关键词：肿瘤抗血管生成
- rhIL-10对银屑病动物模型的治疗作用及免疫功能的影响被引量：8
- 2003年
- 目的 研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法 用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋巴细胞增殖、NK细胞活性及细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1、TNF α)水平。结果 rhIL 10 (5 ,2 0 ,80μg·kg-1·d-1,sc)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用 ,促进小鼠尾鳞片颗粒层的形成。对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及IL 2、IFN γ产生有抑制作用 ;对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNF α具有抑制作用 ;对NK细胞活性有抑制作用 ;对LPS诱导B淋巴细胞增殖有促进作用。结论 rhIL 10可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化 。
- 陈飞虎陈敏珠李俊智强
- 关键词：银屑病动物模型免疫细胞因子
- 重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备被引量：2
- 2000年
- 目的 制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法 应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目。结果 获得了 2株能分泌抗rhIL 10单克隆抗体的杂交瘤细胞系 (1D3、2A3) ,无血清培养液效价为 1∶5 12、1∶2 5 6 ,腹水效价 1∶10 5、1∶10 4 。单克隆抗体为IgG2 亚类 ,染色体数目 98～ 10 3条。 2株杂交瘤细胞体外传代培养6个月以上 ,ELISA检测抗体滴度无明显降低。结论 制备的 2株单克隆抗体效价高 。
- 陈飞虎盛晓蓉吴亦伦陈敏珠智强
- 关键词：重组人白细胞介素10单克隆抗体杂交瘤
