余江
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 糖原合酶激酶3β在轻型/重症急性胰腺炎细胞模型中的表达被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨糖原合酶激酶3β（GSK3β）在轻型/重症急性胰腺炎发病中的表达及作用方法 采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别构建轻型急性胰腺炎（MAP）和重症急性胰腺炎（SAP）的细胞模型,分别在2、4、8、12、24 h收集细胞培养基上清,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测淀粉酶、脂肪酶、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的表达变化,流式细胞术检测细胞凋亡率及坏死率,实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测GSK3β及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3、-8、-9 mRNA表达变化.结果 雨蛙素组和雨蛙素＋脂多糖组各时间点淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6较对照组均增高,且在大多数时间点,雨蛙素＋脂多糖组组比雨蛙素组水平更高,开始上调时间相同或更早（P＜0.05）.刺激24 h后,雨蛙素组凋亡率[（19.2±0.9）％]显著高于雨蛙素＋脂多糖组[（10.2±0.5）％,P ＜0.05].雨蛙素组坏死率[（5.8±0.3）％]显著低于雨蛙素＋脂多糖组[（13.6±0.7）％,P＜0.05].SAP组的坏死/凋亡比值是MAP组的5倍.GSK3β的mRNA水平在雨蛙素组中是2h短暂下调[相对表达量为（0.5±0.1）倍]后于8h显著上升[相对表达量为（3.0±1.1）倍,P ＜0.05],然后又逐步下降;而在雨蛙素＋脂多糖组中则是是8h才缓慢上调[相对表达量为（1.8±0.6）倍,P＜0.05],至24 h达到高峰[相对表达量为（3.6±0.3）倍,P＜0.05].GSK3β和Caspase-3 mRNA水平均有升高,但差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 采用单独雨蛙素、雨蛙素联合脂多糖刺激分别建立MAP和SAP细胞模型可行;GSK3β在MAP和SAP中可能通过促进腺泡细胞凋亡来起作用.
- 周斌刘勇陈珂玲余江李园
- 关键词：糖原合酶激酶3Β急性胰腺炎细胞模型凋亡
