金磊
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
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- 核酸染色剂SYBR-Gold染色特性分析
- 2015年
- 目的检测SYBR-Gold前染色与后染色的优缺点。方法采用前染色、后染色的方法使用SYBR-Gold对双链DNA进行染色检测,EB染色作为参照,琼脂糖凝胶电泳为检测手段,凝胶成像系统拍照观察。结果SYBRGold其前染色与后染色对于双链DNA检测能力均强于EB染色,但是SYBR-Gold预混凝胶前染色其分辨效果及DNA迁移速度受到DNA浓度的影响;SYBR-Gold预混样品的前染色方式对于目的基因的判读误差较大。结论 SYBR-Gold不适合预混样品前染色,DNA样品浓度过大(大于250ng)不适合预混凝胶前染色,SYBR-Gold后染色是理想的染色方式。
- 金磊
- 关键词：溴化乙锭琼脂糖凝胶电泳
- 预混指示剂的PCR系统使用与评测
- 2015年
- [目的]研究预混系统对于PCR以及其下游试验是否会产生影响。[方法]采用"dye"及"density"预混的PCR系统与正常PCR系统进行PCR以及下游试验,使用琼脂糖凝胶电泳及Nano Drop2000检测。[结果]预混系统与正常系统对于PCR产物的特异性以及质量未见明显差别。[结论]预混系统也完全适合于下游的转化、连接、酶切试验。
- 金磊
- 关键词：PCR
- 2种方法从大鼠晶状体中提取总RNA及评测被引量：1
- 2014年
- [目的]测评2种方法从大鼠晶体中提取总RNA的效果[方法]采用2种方法从大鼠晶状体中提取总RNA,通过测定总RNA的浓度以及A260/A280、A260/A230、琼脂糖凝胶电泳、RT-PCR方法对其进行评价.[结果]使用柱式法从大鼠晶状体中提取总RNA,其28S、18S亚基清晰可见,NanoDrop22000测定显示A260/A280、A260/A230均在1.8 ～2.0,可用于反转录聚合酶链反应等下游试验.Trizo1法提取结果显示总RNA降解较多,不适合进行下游试验.[结论]柱式法操作简便,全程可在常温下进行,总RNA质量高,适宜于实验教学及科研.Trizol法提取总RNA操作要求相对较高,且易受到苯酚污染及乙醇残留,但适合抽提大量样本的总RNA,对于实验教学有一定难度.
- 徐洪卫张晨光金磊
- 关键词：总RNATRIZOL法
- 酶切法鉴定质粒的亚型被引量：1
- 2015年
- 商品化质粒小量抽提试剂盒制备的质粒DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测可见2条亮带,分别回收2条亮带,使用限制性内切酶分别消化,再用琼脂糖凝胶电泳检测,依据质粒的亚型(超螺旋、线性、开环)在以琼脂糖凝胶为介质的电场中的移动速度不同,鉴定出制备的质粒DNA电泳图中的2条亮带分别是超螺旋质粒和开环质粒。
- 金磊
- 关键词：质粒超螺旋开环
- 核酸染料对DNA条带形态产生的影响分析被引量：2
- 2015年
- 使用核酸染料对DNA片段进行前染色时,DNA条带会出现弯曲、变形、拖尾等现象。这些现象是由核酸染料造成的,并且与核酸染料的浓度及DNA的上样量成正相关,另外,还与分子量大小、琼脂糖凝胶的质量与浓度、电压相关。选择合适的核酸染料及染色方式可以减少DNA条带形态改变的概率,得到较好的电泳结果。
- 金磊
- 关键词：琼脂糖凝胶电泳
