夏苗苗
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 枯草芽孢杆菌核黄素合成途径相关基因的修饰
- 在枯草芽孢杆菌的核黄素合成代谢途径中，核黄素操纵子（rib）表达水平与核黄素激酶/FAD合成酶（ribC）活性，是影响核黄素过量合成的关键因素。本文研究了rib操纵子表达元件的修饰和mRNA稳定子替换的效应，以及ribC...
- 夏苗苗
- 关键词：枯草芽孢杆菌核黄素基因点突变
- 枯草芽孢杆菌嘌呤核苷酸合成途径基因修饰及效应被引量：1
- 2015年
- 在核黄素操纵子过表达的枯草芽孢杆菌中,采用无标记基因敲除方法,分别敲除GMP还原酶基因(guaC)、腺苷琥珀酸合成酶基因(purA)、嘌呤操纵子(pur operon)阻遏蛋白编码基因簇(purR-yabJ),并且用cryⅢA mRNA稳定子替换嘌呤操纵子的mRNA前导区,构建了菌株LX35.采用实时定量PCR方法,测定其胞内嘌呤操纵子mRNA的相对水平.摇瓶发酵,测定其发酵液中的核黄素含量.结果显示,菌株LX35嘌呤操纵子的mRNA水平相对提高了53.33倍,核黄素产量提高了126.6%.使用cryⅢA mRNA稳定子,能够有效提高嘌呤操纵子的表达水平,有助于核黄素过量合成.
- 刘露夏苗苗班睿
- 关键词：核黄素实时定量PCR枯草芽孢杆菌
- 枯草芽孢杆菌核黄素操纵子与ribC基因的修饰与遗传效应被引量：2
- 2015年
- 【目的】研究核黄素操纵子(rib)组成型高表达,以及rib C基因低水平表达对枯草芽孢杆菌过量合成核黄素的影响。【方法】在染色体原位修饰启动子,用m RNA稳定子替换m RNA前导区,使rib操纵子组成型高表达;修饰rib C基因的启动子,降低rib C基因的表达水平。采用q RT-PCR方法,表征基因的相对表达水平;通过摇瓶发酵,测定重组菌的生物量和核黄素产量,表征相关基因修饰所表现的遗传效应。【结果】用gsi B m RNA稳定子替换核黄素操纵子的m RNA前导区,使其相对表达水平提高了约1 500倍。rib C基因启动子-35区的首个碱基由"T"突变为"C",使rib C基因的表达水平下降了97%以上。得到的重组菌株LX34在补加蔗糖20 g/L的LB培养基上摇瓶发酵36 h,可积累核黄素2.1 g/L,同时生物量没有明显下降。【结论】使用gsi B m RNA稳定子,能够有效地提高目标基因或操纵子的表达水平;启动子-35区首个碱基的点突变,能够有效降低rib C基因的表达水平;rib操纵子过量表达和rib C基因低水平表达,使细胞能够过量合成并积累核黄素。
- 夏苗苗刘露班睿
- 关键词：枯草芽孢杆菌核黄素
