王凯
- 作品数：3 被引量：7H指数：3
- 供职机构：天津大学化工学院更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 过表达嘌呤合成途径关键酶基因对重组酿酒酵母菌株生产cAMP的影响被引量：3
- 2014年
- 研究了环磷酸腺苷(cAMP)合成途径中的3个关键酶基因(磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷酸激酶基因ADK1)过量表达对重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)发酵向胞外分泌cAMP的影响,利用酿酒酵母游离型质粒YEplac195和磷酸甘油酸激酶PGK的强启动子PGK1p及终止子PGK1t构建含PRS1,PRS3,ADE4和ADK1的单基因表达载体,分别转入cAMP生产菌GA125,通过摇瓶发酵实验考察重组菌株与对照菌株的生长、cAMP生产及胞外腺嘌呤消耗情况.结果表明,在外加腺嘌呤条件下,与对照菌株相比,PRS1,PRS3和ADE4基因过表达菌株的cAMP产量分别提高4.17%,9.03%和6.06%,而ADK1过表达菌株的cAMP产量降低3.85%.
- 姬晓兵王凯陈洵
- 关键词：酿酒酵母环磷酸腺苷腺嘌呤
- 利用转录调控因子Bas1p和Bas2p协同作用提高酿酒酵母cAMP产量的研究被引量：3
- 2016年
- 【目的】研究转录调控因子Bas1p和Bas2p协同作用对重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)胞外c AMP产生的影响,初步优化发酵培养基。【方法】通过共整合表达策略,在c AMP产生菌酿酒酵母G5中超表达Bas1p和Bas2p,摇瓶发酵实验考察了Bas1p和Bas2p协同作用对菌株生长及胞外c AMP产生的影响,进一步考察了酵母粉和蛋白胨含量及前体物腺嘌呤对菌株生长和c AMP产生的影响。【结果】超表达Bas1p和Bas2p使菌株在1×YP培养基中发酵120 h时的c AMP产量较出发菌株提高51.4%,达到2 253.8μmol/L;将1×YP中的酵母粉和蛋白胨含量翻倍(即2×YP培养基)发酵120 h时的c AMP产量提高至4 450.4μmol/L;在2×YP培养基中添加0.5 g/L浓度的腺嘌呤时,c AMP产量进一步提高至5 314.3μmol/L。【结论】强化Bas1p和Bas2p的协同作用及相应地优化培养基组分有助于酿酒酵母胞外c AMP生产。
- 徐欢欢程丽娜王凯仇申珅邹少兰
- 关键词：酿酒酵母环磷酸腺苷腺嘌呤
- 整合过表达嘌呤代谢途径关键酶基因提高酿酒酵母菌株环磷酸腺苷产量被引量：5
- 2016年
- 调控嘌呤代谢途径关键酶基因表达水平,会影响经AMP→ADP→ATP而生成的c AMP(cyclic adenosine mnophosphate,c AMP)产量。将酿酒酵母编码磷酸核糖焦磷酸合成酶基因PRS1和PRS3、磷酸核糖焦磷酸氨基转移酶基因ADE4、腺苷酸激酶基因ADK1,分别置于磷酸甘油酸激酶基因PGK1的启动子PGK1p和终止子PGK1t控制下,利用整合载体YIplac211,在菌株GA125中进行整合表达,通过摇瓶实验考察所得菌株的环磷酸腺苷产量。结果表明,在加腺嘌呤条件下,120 h时的c AMP产量分别为(5 380.5±1.91)、(5 189.4±1.72)、(5 131.8±2.05)和(5 199.9±1.62)μmol/L,较菌株GA125分别提高9.8%、5.9%、4.8%和6.2%;此外,ADK1过表达导致一定的生长抑制,所有菌株的腺嘌呤消耗量在(0.399±0.01)^(0.447±0.02)g/L,葡萄糖利用和乙醇产生上彼此没有呈现明显差异。
- 王凯姬晓兵徐欢欢仇申珅邹少兰
- 关键词：酿酒酵母环磷酸腺苷腺嘌呤
