穆峰
- 作品数：5 被引量：8H指数：3
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺移植的基础研究与临床应用
- 陈钢蔡瑞君孟辉杨锡耀穆峰周霞
- 该组首先对实验犬供体肺NO、MDA、SOD与形态学变化的相关性研究进行了研究。然后对单肺移植术中的另侧自体肺在缺血再灌注过程中的损伤进行了研究。研究结果显示受体肺移植前与供体肺移植前无明显个体差异，缺血再灌注过程对移植肺...
- 关键词：
- 关键词：肺移植肺保存
- 外源性mIκBα基因抑制肝癌细胞HepG2的生长被引量：3
- 2004年
- 目的观察核转录因子的抑制基因mIκBα在肝癌细胞株HepG2的表达及对该细胞株生长的影响。方法将由293包装细胞产生的含mIκBα的Ad腺病毒上清(Ad-mIκBα)和含包装载体的腺病毒上清(Adv)感染HepG2细胞,观察感染后HepG2细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达和mIκBα蛋白表达,并观察细胞的平板集落形成数、软琼脂集落形成能力、细胞生长曲线、裸鼠成瘤实验。结果肝癌细胞感染腺病毒后GFP表达阳性,感染含mIκBαAd腺病毒的肝癌细胞有mIκBα蛋白表达;HepG2/Ad-mIκBα细胞形成的集落数明显比HepG2/Adv和HepG2细胞形成的集落数少(P<0.05);HepG2细胞、HepG2/Adv细胞在软琼脂内存活,并形成桑椹样细胞集落,而HepG2/Ad-mIκBα细胞在软琼脂上无生长;细胞生长曲线显示HepG2/Ad-mIκBα细胞生长速度较HepG2/Adv、HepG2亲本细胞有所减慢,但饱和密度无显著性差异。裸鼠接种4周后HepG2/Ad-mIκBα细胞成瘤率为80%,HepG2/Adv细胞成瘤率为100%,肿瘤形成率无显著性差异,HepG2/Ad-mIκBα细胞形成的肿瘤的体积比HepG2/Adv细胞形成的肿瘤的体积明显减小(P<0.05)。结论mIκBα基因可以抑制HepG2肝癌细胞的生长。
- 金吴东陈龙华穆峰
- 关键词：基因肿瘤肝细胞癌腺病毒载体
- mIκBα基因转染肝癌细胞HepG2的放射增敏作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨mIκBα基因是否增加肝癌细胞的放射敏感性。方法实验分3组:亲本细胞对照组、HepG2细胞转染Adv组、转染mIκBα基因的HepG2细胞-AdmIκBα组。在6GyX射线照射前后分别测定3组细胞下列指标:Westernblot检测肝癌细胞浆内IκBα值;电泳迁移率法测定肝癌细胞核内NF-κB活性;TUNEL染色法测定肝癌细胞凋亡指数。2Gy放射线照射后的肝癌细胞存活分数和用多靶单击模型确定的Do、Dq值判定肝癌细胞的放射敏感性。结果放射线照射前,Adv组与HepG2组细胞浆内IκBα呈低值,照射后更减低;而细胞核内NF-κB活性照射前为(+),照射后为(++),呈持续激活状态;细胞凋亡指数在照射前分别为1.4、1.6,照射后升高至8.9、11.7。AdmIκBα组在照射前、后细胞浆内IκBα均呈高值,均为Adv组的3倍;而细胞核内NF-κB活性在照射前、后均呈阴性;照射前细胞凋亡指数为18.2,照射后升高至88.3。3组中AdmIκBα组细胞存活分数最低,为0.301;而SER(放射增敏比)最大,为2.099;Do值最小,为1.468,Dq值最小,为0.709。结论用mIκBα基因转染肝癌细胞HepG2,可抑制肝癌细胞内NF-κB的抗凋亡活性,增强肝癌细胞的放射敏感性。
- 金吴东陈龙华穆峰
- 关键词：NF-ΚB
- 大肠杆菌内同源重组法构建含mIκBα基因的重组腺病毒及其在Hep G2细胞中的表达被引量：3
- 2005年
- 目的通过在大肠杆菌内同源重组,快速、有效地制备含人mIκBα基因的腺病毒重组体的方法,并观察其在肝癌细胞株Hep G2细胞中的表达.方法首先将目的基因mIκBα克隆进结合有绿色荧光蛋白报告基因的穿梭质粒 -pAdTrack-CMV中,将新形成的质粒pAdTrack-CMV-mIκBα用限制性内切酶PmeI线性化后,再与腺病毒骨架质粒-pAdEasy-1一同转化进大肠杆菌株BJ5183细胞中.用对卡那霉素抗性挑选重组体质粒-pAd-mIκBα,并通过限制性内切酶分析,确认重组.最后将线性化后的重组体质粒转染进腺病毒包装细胞株293细胞.腺病毒重组体Ad-mIκBα在7～10 d内产生.借助GFP的表达,测定和观察在293细胞中重组腺病毒的滴度及其在HepG2细胞中的表达.结果经PCR检测提示重组体腺病毒含有mIκBα基因.Ad-mIκBα的滴度是2.7×109PFU/ml.当MOI等于10时,在HepG2细胞中,Ad-mIκBα病毒可有效和稳定地表达,其感染效率24 h为57%,48 h达100%.结论运用在大肠杆菌内同源重组法能有效和方便地构建含目的基因mIκBα的腺病毒重组体Ad-mIκBα.该重组体能在293细胞中扩增,并有效地感染Hep G2细胞.为进一步研究mIκBα基因的功能和该基因治疗肝癌提供了一个良好的基因转导载体.
- 金吴东陈龙华穆峰
- 关键词：腺病毒载体基因治疗大肠杆菌
- 外源性mIκBα基因在肝癌细胞Hep G2中的表达及对其生长的影响
- 2006年
- 目的观察mIκBα基因对肝癌细胞生长的影响。方法同源重组法构建含mIκBα基因的重组腺病毒质粒,经293细胞包装成含mIκBα的重组腺病毒。用此腺病毒感染肝癌细胞Hep G2,测定感染效率。通过集落形成实验、细胞生长曲线等方法观察目的基因对肝癌细胞生长的影响。结果重组腺病毒含有mIκBα基因。重组腺病毒可在肝癌细胞中稳定地表达,感染的肝癌细胞形成的集落数明显少于对照组(p<0.01);重组腺病毒感染的肝癌细胞在软琼脂内存活,对照组细胞则无法存活;重组腺病毒感染的肝癌细胞生长速度减慢。结论含目的基因mIκBα的腺病毒重组体在293细胞中扩增并有效地转染Hep G2细胞;外源性mIκBα基因可以抑制肝癌细胞Hep G2的生长。
- 金吴东陈龙华穆峰
- 关键词：基因肝癌细胞腺病毒载体
