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负压封闭引流技术治疗小儿大腿鞭炮爆炸伤一例被引量：1: 2012年; 爆炸伤指由于爆炸形成的人体损伤，分化学悱爆炸和物邢性爆炸两类。最近笔者利用负压封闭引流手术（vaccumsealing drainage，VSD）成功治疗小儿筚使炮蝶炸伤患者1例，效果良好，现报道如下。; 薛峰吴军成刘萌萌孙良栾保华霍然; 关键词：负压封闭引流技术小儿大腿引流手术伤患者

兔外周血间充质干细胞的体外分离培养及诱导成骨被引量：7: 2009年; 背景:研究证明外周血中存在间充质干细胞,但含量极少。目的:拟从兔外周血中提取间充质干细胞,并诱导其向成骨细胞分化。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/12在山东省立医院中心实验室完成。材料:新西兰大白兔6只,购自山东省农科院。α-MEM培养基、L-DMEM培养基为Hyclone公司产品。方法:每隔2d从兔背部不同部位切去3cm×3cm的全层皮肤(保留背部肌层),所切皮肤做原位移植后包扎,每只兔连续创伤4次。分别于创伤前及末次创伤1周后从股静脉取外周血,采用密度梯度离心法获取间充质干细胞,设立2组,分别加入含体积分数为10%胎牛血清的α-MEM培养基或L-DMEM培养基。细胞传至第2代以1×105/cm2密度接种于12孔板,加入含成骨诱导剂的H-DMEM培养液进行成骨诱导。主要观察指标:创伤前后细胞形态观察,成纤维样细胞集落形成率,成骨诱导效果。结果:创伤前所获得的细胞首次换液后,未见有梭形细胞贴壁;创伤后所获得的细胞接种24h即可见有短梭形及多角形细胞贴壁,五六天后出现细胞集落。与L-DMEM培养基组比较,α-MEM培养基组外周血成纤维样细胞集落形成率明显升高(P<0.05)。外周血间充质干细胞成骨诱导后,呈梭形、三角形或多角形,有突起,可见两三个核仁和细胞分裂相,增殖速度缓慢,诱导7d后碱性磷酸酶阳性率达80%以上,诱导21d后茜素红染色形成钙结节。结论:皮肤损伤刺激后可成功从兔外周血中获取间充质干细胞,且具备成骨分化特性,α-MEM培养基较L-DMEM培养基更适合外周血间充质干细胞的体外生长。; 孙良栾保华李中华王小霞刘萌萌; 关键词：培养基成骨诱导

丹红注射液与黄芪注射液对重症脓毒症患者肾功能及微循环的影响被引量：9: 2015年; 目的观察丹红注射液与黄芪注射液对重症脓毒症患者肾功能及微循环的影响。方法选择重症脓毒症患者121例,随机分为常规治疗组34例、丹红注射组51例和黄芪注射组36例。常规治疗组给予抗感染、补液和营养支持等常规治疗,丹红注射组给予常规治疗+丹红注射液20 m L静滴、1次/d,黄芪注射组给予常规治疗+黄芪注射液30 m L静滴、2次/d,连续治疗5 d。分别在治疗前及治疗1、3、5 d检测各组血浆内皮素(ET)、血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平,并观察其舌下微循环相关参数[总血管密度(TVD)、灌注血管密度(PVD)、灌注血管比例(PPV)、微血管流动指数(MFI)]变化,比较各组治疗前后急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分及28 d病死率。结果与治疗前比较,3组治疗后血浆ET、SCr、BUN水平均明显降低(P均<0.05),丹红注射组、黄芪注射组各指标降低更明显(P均<0.05);黄芪注射组治疗后1、3 d血浆ET水平高于丹红注射组,BUN、SCr水平低于丹红注射组(P均<0.05)。丹红注射组、黄芪注射组治疗后1 d PVD、PPV、MFI显著升高(P均<0.05)。3组治疗前后APACHEⅡ评分及28 d病死率比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论丹红注射液和黄芪注射液能在一定程度上改善重症脓毒症患者肾功能及微循环状态,但二者并不能改善患者预后。; 孙良李丕宝孙先义; 关键词：脓毒症丹红注射液黄芪注射液内皮素肾功能微循环

兔外周血间充质干细胞的分离培养及诱导分化被引量：2: 2009年; 目的研究间充质干细胞(MSCs)在创伤修复中的作用并为MSCs作为组织工程种子细胞奠定实验基础。方法抽取创伤后兔外周血,用密度梯度离心法分离纯化单个核细胞;α-MEM培养基培养,并测定细胞生长曲线;应用成骨和成软骨诱导剂定向诱导,检测分化能力。结果原代培养的MSCs呈圆形、梭形、多角形,传代纯化后呈均一的长梭形。其生长曲线均呈典型的"S"形。外周血MSCs成骨诱导后7d碱性磷酸酶染色阳性;21d出现钙沉积,茜素红染色呈阳性。成软骨诱导2周后Ⅱ胶原免疫细胞化学染色阳性。结论皮肤损伤刺激后可从外周血中获取MSCs,体外分离培养的MSCs具备向成骨及成软骨细胞分化特性;可用于组织工程种子细胞的研究。; 栾保华孙良李中华王小霞刘萌萌; 关键词：外周血间充质干细胞分化

脱细胞基质软骨支架的制备被引量：5: 2015年; 背景:脱细胞基质材料去除了天然材料中的细胞成分,保留了基质成分,有效降低了天然材料的免疫原性,同时能够保持材料的机械强度。目的:拟利用洗脱方法去除兔肋软骨中的细胞基质,制备天然生物支架材料。方法:取新西兰大白兔肋软骨,清除周围组织后随机分组处理,以未经处理的肋软骨作为正常对照组;48 h处理组以去污剂-酶化学消化48 h;96 h处理组以去污剂-酶化学消化96 h,3组均通过苏木精-伊红染色及电镜观察脱细胞效果。同时收集诱导第7天的兔骨髓间充质干细胞3×109 L-1,与同种异体肋软骨脱细胞基质体外复合培养,于第3,7天取复合物行电镜观察细胞在脱细胞基质表面的黏附生长情况。结果与结论:新鲜肋软骨标本每个软骨陷窝内均有排列紧密的二三个软骨细胞,去污剂-酶化学消化后软骨陷窝内的细胞逐渐脱失,至消化处理96 h后,软骨陷窝内的细胞完全脱失。共培养第3天时,脱细胞基质表面有大量骨髓间充质干细胞分布,细胞为多角形,有伪足伸出,锚定在基质表面,部分区域可见细胞在基质表面增殖分裂;第7天时,脱细胞基质表面大部分均为细胞覆盖,细胞呈扁平状,有多个足突充分伸展,细胞之间互相连接,分泌大量细胞外基质沉积在基质表面,呈冰霜样改变,表明制备的脱细胞基质具有良好的细胞相容性。; 孙良李丕宝栾保华; 关键词：干细胞软骨细胞生物材料脱细胞基质软骨支架

参麦注射液联合胰岛素强化治疗脓毒症患者应激性高血糖的临床观察被引量：5: 2016年; 目的:观察参麦注射液联合胰岛素强化治疗脓毒症患者应激性高血糖的疗效。方法:回顾性收集156例脓毒症且确诊为应激性高血糖患者资料,按用药不同分为对照组(78例)和观察组(78例)。所有患者及时确定病原菌并给予相应的抗感染治疗、改善通气状态、给予充分液体复苏支持、适当给予免疫治疗和营养支持等常规治疗;在此基础上,对照组患者按不同的血糖水平给予不同剂量的胰岛素[1 U/ml,静脉微量泵入,速度为0.1 U/(kg·h)];观察组患者在对照组治疗的基础上加用参脉注射液40 ml,加入胰岛素混合溶液中,静脉微量泵入。观察两组患者终点事件、血糖达标时间、胰岛素总用量、基础指标[急性生理与慢性健康(24APACHE-Ⅱ)评分、机械通气时间、ICU住院天数、低血糖发生例次]及不良反应发生情况。结果:观察组患者终点事件总发生率显著低于对照组,血糖达标时间显著短于对照组,胰岛素总用量显著少于对照组,机械通气时间显著短于对照组,ICU住院时间显著少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗前,两组患者24 APACHE-Ⅱ评分差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者24 APACHE-Ⅱ评分显著降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗期间均未见明显不良反应发生。结论:在常规治疗的基础上,参麦注射液联合胰岛素强化治疗脓毒症患者应激性高血糖疗效较好,能减少达标血糖所用时间胰岛素总用量,降低终点事件总发生率和24 APACHE-Ⅱ评分,缩短机械通气时间、减少ICU住院天数,且安全性较好。; 孙良李丕宝孙先义; 关键词：参麦注射液胰岛素脓毒症应激性高血糖

间充质源性软骨种子细胞与脱细胞软骨复合培养构建软骨组织被引量：1: 2011年; 目的兔外周血间充质源性软骨种子细胞与同种异体脱细胞软骨体外复合培养,构建新型软骨组织,为临床修复器官缺损及再造提供实验基础。方法提取兔外周血间充质干细胞,行体外诱导培养14 d获得软骨种子细胞,显微镜下观察细胞生长特性,制作细胞爬片行甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色。联合去垢剂—酶法获得兔脱细胞肋软骨支架,软骨种子细胞与同种异体脱细胞软骨支架体外复合培养7 d获得复合软骨,脱细胞软骨及复合软骨固定后行扫描电镜观察及组织学HE、甲苯胺蓝染色。结果兔外周血间充质干细胞体外诱导培养14 d,胞浆内较多软骨细胞特异性Ⅱ型胶原分泌;兔脱细胞软骨呈乳白色,结构完整、孔隙均匀,仍保存大量酸性黏多糖及胶原成分,其孔隙率(61.31±8.45)%,孔径长度(32.80±5.15)μm。支架与软骨细胞黏附良好,并伴有多量基质分泌。结论间充质源性软骨种子细胞与同种异体脱细胞软骨体外复合培养可构建新型软骨组织,本研究为临床修复器官缺损及再造提供了实验依据。; 刘萌萌栾保华孙良李中华王小霞; 关键词：间充质脱细胞软骨组织

主动脉瘤致大咯血一例: 2015年; 1临床资料患者男，82岁，因“突发咯血2小时”就诊，既往有“高血压、冠心病、房颤”等病史，此次入院前2小时无明显诱因突然出现咯血，次数不详，总量约500ml，为鲜红色，伴有憋喘，呼吸困难，急来我院就诊。; 孙良李丕宝孙先义; 关键词：大咯血主动脉瘤高血压冠心病就诊

兔肋软骨脱细胞基质的制备: 2011年; 背景:研究表明新西兰兔软骨组织可作为组织工程支架材料,其中关节软骨及耳软骨的脱细胞基质的研究较多,但采用肋软骨作为组织工程软骨支架的研究较少。目的:制备新西兰兔肋软骨脱细胞基质,探讨天然软骨支架作为组织工程支架的可行性。方法:用联合去垢剂-酶法获得软骨支架,根据脱细胞过程中TritonX-100第2次处理时间0,24,48,96h分为4组。脱细胞完毕后各组支架固定行扫描电镜采集图像观察计算支架孔隙率、孔径长度,并对支架进行苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,并将脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下观察其相容性。结果与结论:兔肋软骨脱细胞基质呈乳白色,大小均一,染色示支架结构完整,仍保存大量酸性黏多糖及Ⅱ型胶原成分,扫描电镜观察经一定时间的脱细胞处理后可得到结构完整,孔隙均匀的天然软骨支架,其孔隙率为(61.31±8.45)%;孔径长度为(32.80±5.15)μm,符合正态性分布,各组脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下7d后生物相容性良好,周围软组织无明显充血、化脓等炎症排斥反应出现。结果显示,兔肋软骨脱细胞支架具有良好的基质组成,有较完整、均匀的孔隙结构及孔径分布,可作为组织工程支架材料。; 刘萌萌张健栾保华孙良李中华王小霞; 关键词：软骨脱细胞生物相容性

阿魏酸钠对老年冠心病患者血管内皮保护作用及对妊娠相关血浆蛋白A水平、核转录因子-κB活性的影响被引量：2: 2017年; 目的探讨阿魏酸钠对冠心病患者妊娠相关血浆蛋白(PAPP)-A水平、核因子(NF)-κB活性的影响。方法选择冠心组患者92例,其中包括不稳定型心绞痛患者36例,急性心肌梗死患者29例和稳定型心绞痛患者27例。并选取健康志愿者(健康组)70例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PAPP-A水平及NF-κB活性。结果与健康组相比,冠心病患者PAPP-A水平及(健康组)NF-κB活性明显增噶高(P<0.01)。阿魏酸钠治疗后冠心病患者PAPP-A水平及NF-κB活性均明显下降(P<0.01)。且不稳定型心绞痛患者与急性心肌梗死患者PAPP-A水平与NF-κB活性正相关(P<0.01)。结论阿魏酸钠通过抑制炎症反应,减少氧化应激反应,而能够对心血管起到保护作用。; 刘娜孙良李丕宝孙先义; 关键词：阿魏酸钠冠心病核因子-ΚB活性

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孙良

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