夏晓飞
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：山东宝来利来生物工程股份有限公司更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡α干扰素基因的人工合成、表达及抗病毒活性研究
- 2013年
- 为了获得具有抗禽源病毒活性的鸡α干扰素,对Genebank中发表的鸡源α干扰素基因进行密码子优化后,人工合成α干扰素基因片段489 bp,构建了表达载体PET-28a-IFN-α,连接转化到大肠杆菌菌株中,经PCR、酶切和测序鉴定后,诱导产生干扰素包涵体蛋白,破碎、纯化、透析复性、冻干浓缩后测定蛋白浓度,按禽流感H9EID50的浓度分别与不同剂量干扰素等量混合,接种鸡胚0.2μL,收集病毒,测定血凝价。结果显示:成功构建了原核表达载体pET-IFN-α,复性后蛋白浓度为472μg/mL,试验组(47.2μg和23.6μg)的血凝价与生理盐水对照组比较,差异极显著(P<0.01)。表明重组干扰素蛋白在鸡胚内具有较好的抑制或杀灭H9禽流感病毒的效果,为下一步抗病毒制品的研发奠定了基础。
- 程福亮夏晓飞聂兆晶陈甜甜石振飞刘洋庆王丽荣谷巍
- 关键词：抗病毒活性
- 鸡α干扰素基因的原核和真核表达载体的构建及鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的:为了构建鸡α干扰素基因真核和原核表达载体。方法:参照Genebank中发表的鸡源α干扰素基因进行密码子优化后,人工合成α干扰素基因片段489 bp,成功构建了干扰素基因克隆载体p MD18-T-IFN-α,经双酶切后,回收获得干扰素基因,分别与原核表达载体p ET-28a和真核表达载体p GAPZαA连接,转化到大肠杆菌Ressota和毕赤酵母中,分别进行PCR、酶切和测序鉴定。结果:成功构建了原核表达载体p ET-28a-IFN-α和真核表达载体p GAPZαA-IFN-α。结论:成功构建了鸡IFN-α基因的真核和原核表达载体,为鸡IFN-α干扰素的抗病毒活性研究提供了基础。
- 聂兆晶程福亮夏晓飞陈甜甜石振飞刘洋庆谷巍
- 关键词：真核原核抗病毒活性
- 猪产肠毒素大肠杆菌多重PCR快速检测试剂盒的研制及应用
- 2013年
- 为建立一种简单、快速、灵敏、准确的产肠毒素大肠杆菌检测方法,根据产肠毒素大肠杆菌LT、ST1、ST2保守基因序列分别设计合成了1对引物,建立了快速检测产肠毒素大肠杆菌的多重PCR方法,并对反应条件进行优化,组装成快速检测试剂盒。特异性检验表明参考菌株均可扩增出LT(282 bp)或ST1(183 bp)或ST2(360bp)的特异性条带,而非大肠杆菌均未扩增出任何条带。检测灵敏度达66 CFU,而且稳定性良好,保质期可达12个月以上。通过对临床样品的检测,证实该试剂盒具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性高等优点。
- 程福亮陈甜甜姜艳萍聂兆晶刘洋庆夏晓飞谷巍
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌试剂盒
