施志敏
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 镍对胚胎神经干细胞增殖和分化的调节
- 2006年
- 目的:观察T型钙通道阻断剂镍对胚胎神经干细胞的调节,分析T型钙通道在神经干细胞增殖和分化中的作用。方法:实验于2004-08/2006-01在南方医科大学神经生物学教研室完成。选取清洁级成年雌性Wistar孕鼠1只,分离大脑半球,制成单细胞悬液,利用无血清培养技术,在添加碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、B27supplement的DMEM/F12培养基中培养胚胎神经干细胞,当神经球增大至50～200个细胞/球时,即可传代。取第3代胚胎神经干细胞,在培养基中分别加入0,0.25,0.5,1.0mmol/L的氯化镍,以BrdU免疫荧光、四唑盐、流式细胞仪检测细胞增殖指数以及DCX和S-100β阳性细胞数。结果:①神经干细胞体外培养的鉴定:取原代和传代培养的细胞进行免疫荧光鉴定,发现均有细胞表达nestin抗原。传至第3代时,其阳性比例可达99%。②诱导分化及鉴定:分化2d后,镜下观察细胞长出突起,已初步具有神经元和胶质细胞形态。免疫荧光染色显示分化细胞呈现DCX和S-100β阳性。③细胞增殖检测结果:加入0.25,0.5,1.0mmol/L的氯化镍处理细胞,MTT检测其吸光度值分别为未加入氯化镍的62.09%,48.20%,34.85%,呈浓度依赖性降低(P均<0.001);免疫荧光检测BrdU阳性细胞数分别为未加入氯化镍的85.75%,74.25%,57.01%(P<0.05)。流式细胞仪检测加入0.5mmol/L氯化镍的单细胞悬液其增殖指数显著高于未加入氯化镍的单细胞悬液(66.11%,1.016%,P<0.001)。④镍对细胞分化的影响:单细胞悬液加入0.25,0.5,1.0mmol/L氯化镍后,BrdU阳性细胞数量减少(P均<0.001);DCX阳性细胞数分别比未加入氯化镍的单细胞悬液增加23%,52%,58%(P<0.05或0.01);S-100β阳性细胞数增加85%,105%,110%(P<0.05或0.01)。结论:T型钙通道阻断剂镍可抑制胚胎神经干细胞的分裂增殖,促进其分化,提示T型钙通道可能参与胚胎神经干细胞增殖分化的调节。
- 施志敏陈亮冯锦丽杨建明朱心红李晓文高天明
- 关键词：干细胞
- TRP通道阻断剂镧对胚胎神经干细胞增殖和分化的影响
- 干细胞是指能够相对无限或较长时间自我更新的细胞，并且新复制的细胞可以分化成一种以上的功能细胞系。而神经干细胞(neuralstemcell，NSC)则是指能够自我复制和具有神经定向分化能力的细胞。自然的NSC分裂分化活动...
- 施志敏
- 关键词：胚胎神经干细胞细胞增殖
- 文献传递
- 妊娠糖耐量异常合并睡眠呼吸暂停综合征孕妇病理生理的临床研究
- 阻塞性睡眠呼吸暂停在2型糖尿病患者中很常见,两者在临床、流行病学和发病机制方面具有相关性,且独立于肥胖之外。目前2型糖尿病对健康的危害已为人们所认识,而OSA对健康的危害及其所带来的医疗负担还远远没有被人们了解。国际糖尿...
- 施志敏
- 关键词：睡眠呼吸暂停综合征妊娠期糖耐量异常炎症因子白细胞介素-6肿瘤坏死因子-Α
- 文献传递
