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人角膜基质间充质干细胞外泌体的分离制备及鉴定: 2021年; 目的制备人角膜基质间充质干细胞(human corneal stromal mesenchymal stem cells,HC-MSCs)外泌体并进行生物学鉴定。方法采用组织块培养技术获得HC-MSCs,利用超速离心法从HC-MSCs培养上清中分离制备外泌体,通过蛋白免疫印迹、透射电镜、纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定。结果分离的纳米囊泡表达外泌体特异性标志蛋白CD63,CD81和TSG101,在透射电子显微镜下可见其呈圆形、卵圆形和杯盘状囊泡,直经113.3 nm。结论从HCMSCs培养上清中可分离出具有典型结构及特征的外泌体,为HC-MSCs外泌体的作用机制及其在眼科的转化应用研究奠定坚实的基础。; 刘先宁汪耀潘士印肖湘华银勇王亚妮刘睿朱秀萍赵明; 关键词：外泌体

自噬与青光眼关系的研究进展被引量：1: 2014年; 自噬是溶酶体降解或再循环利用细胞器、蛋白质等胞内物质成分的过程,在细胞内环境稳态中发挥重要作用.近年来的研究表明,自噬与众多眼病包括青光眼的发生和发展有着密切联系.自噬可能是导致小梁网细胞功能异常的重要因素之一,其对视网膜神经节细胞发挥保护作用还是促进其死亡,仍存在争议.目前与青光眼有关的自噬基因的研究主要是OPTN基因,其编码的蛋白质optineurin与正常眼压性青光眼的发生发展相关.通过调控自噬而保护视网膜神经节细胞免于损伤可能是青光眼视神经保护的一种新方法.; 黄昌泉汪耀吴仁毅; 关键词：自噬青光眼小梁网细胞视网膜神经节细胞

异种去细胞角膜基质浸提液对CHL细胞毒性的实验研究: 2016年; 目的通过鸵鸟去细胞角膜基质浸提液对中国仓鼠肺纤维细胞（CHL）毒性的实验观察，筛选出浸提液的最大无毒浓度，为进一步完成该去细胞角膜基质材料的染色体畸变实验奠定基础。方法采用细胞培养的方法，将鸵鸟去细胞角膜基质材料制备成浸提液，用浸提原液、1：2，1：4稀释的浸提液与传代培养的CHL细胞共同培养，同时设立阴性、阳性对照，参考MTT比色法评价24h后对细胞生长的影响。结果1：4稀释的浸提液既无毒性，又具有促进细胞生长的作用。结论采用CHL细胞进行细胞毒性试验，依据分级结果并结合细胞形态学特征可筛选出鸵鸟去细胞角膜基质浸提液进行CHL细胞染色体畸变实验的基准无毒浓度。; 刘先宁汪耀肖湘华潘士印银勇安娜朱秀萍; 关键词：细胞毒性试验

人角膜基质间充质干细胞的分离培养及表型鉴定被引量：2: 2019年; 目的建立人角膜基质间充质干细胞(HCS-MSC)体外分离培养、传代和鉴定等方法。方法无菌条件下,取眼科临床角膜移植术后剩余的供体角膜缘组织,去除上皮和内皮组织,将基质组织切成1mm×2mm的组织块,采用无动物源性血清的间充质干细胞培养液进行组织块贴壁法培养,倒置显微镜下动态观察细胞的生长形态及贴壁状态,将传代培养后的第三代细胞采用流式细胞分析法进行表型鉴定,液氮冷冻保存。结果采用人角膜缘基质组织块贴壁法培养,于培养后第7天开始向周围呈放射状长出细胞,14天左右长满培养皿,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于2~4天达90%融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90,CD29和CD105阳性率>95%,CD34和CD-HLA-dr阳性率<3%。结论采用人角膜缘基质组织可分离培养出间充质干细胞,为角膜组织修复、重建及对抗免疫排斥反应等奠定基础。; 刘先宁汪耀朱秀萍程燕潘士印肖湘华银勇安娜王亚妮刘睿; 关键词：体外分离培养表型鉴定

17α-己酸羟孕酮对人外周血单个核细胞抵抗地塞米松的逆转作用研究: 2014年; 目的探讨17α-己酸羟孕酮对外周血单个核细胞抵抗地塞米松的逆转作用。方法分离健康男性外周血单个核细胞,利用白介素2(IL-2)和IL-4以及植物血凝素刺激外周血单个核细胞,建立地塞米松抵抗的炎症细胞实验模型;单用地塞米松和地塞米松与17α-己酸羟孕酮联合应用于该模型,酶联免疫吸附法检测细胞的IL-2值的改变。结果地塞米松对植物血凝素诱导人外周血产生的IL-2呈现显著的浓度依赖性的抑制作用;用IL-2(13ng·mL-1)和IL-4(6.5ng·mL-1)刺激,再用植物血凝素(15μg·mL-1)刺激外周血单个核细胞可以作为评价地塞米松抵抗的细胞实验模型;在17α-己酸羟孕酮的浓度为10-11,10-10,10-7和10-5 mol·L-1时,可显著提高地塞米松对人外周血产生的IL-2的抑制率,降低地塞米松的IC50(半数抑制浓度)值至少100倍以上。结论 17α-己酸羟孕酮逆转外周血单个核细胞对地塞米松的抵抗,可作为地塞米松等糖皮质激素的增敏剂。; 汪耀王养正Changqing Lee肖湘华杨华刘先宁安娜朱娟莉朱秀萍; 关键词：地塞米松糖皮质激素抵抗外周血单个核细胞

大鼠视神经损伤引起视网膜神经节细胞发生类似paraptosis的死亡: 目的目前普遍认为视神经损伤视网膜神经节细胞(RGCs)的死亡主要是凋亡(apoptosis),近年发现还存在自噬,但并不能完全解释视神经损伤后RGCs的病理变化.本研究通过大鼠视神经损伤模型探索RGCs存在其他细胞死亡...; 汪耀张红兵徐琨刘先宁赵俊宏朱秀萍王养正

雌激素对视网膜主要细胞功能的影响被引量：1: 2015年; 雌激素通过与雌激素受体（ER）结合而发挥生理功能,ER亚型和特异性激动剂和拮抗剂的研究进展为进一步认识雌激素作用机制提供了可能.雌激素可能通过对视网膜血管内皮细胞、色素上皮细胞、神经节细胞、光感受器细胞和M＆#252;ller细胞等主要视网膜细胞功能的影响,改善血视网膜屏障、保护视网膜光感受器细胞、视神经,减轻氧化应激反应对视网膜色素上皮细胞损害.详尽研究ER各亚型在视网膜主要细胞的分布及特异性激动剂和拮抗剂对这些细胞的作用将为眼底病的防治开拓一个新的领域.; 张红兵张仙娇汪耀王亮

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汪耀