王玉涛
- 作品数：44 被引量：227H指数：8
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金澳门特别行政区科学技术发展基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 金刚烷胺与利巴韦林对不同甲型流感病毒株的体外作用敏感性比较被引量：2
- 2010年
- 目的评价金刚烷胺和利巴韦林对不同甲型流感病毒株的体外抑制作用,为临床选择抗流感病毒药物提供实验依据。方法分别接种甲型流感病毒标准实验株[H1H1(A/PR/8/34、A/FM1/47),H3N2(A/Aichi/2/1968)]和临床分离株[H1N1(A/Guangzhou/GIRD02/2009、A/Guangzhou/GIRD166/2009),H3N2(A/Guangzhou/GIRD18/2009、A/Guangzhou/GIRD26/2009)],于狗肾细胞(MDCK),采用空斑试验观察金刚烷胺和利巴韦林对甲1和甲3型流感病毒不同实验株和分离株的敏感性。对测试毒株的MP基因进行序列测定和分析,了解金刚烷胺的药物敏感性。结果金刚烷胺在MDCK细胞的半数毒性浓度(TC50)为335μg/ml,对部分甲型流感病毒标准实验株[A/FM1/47(H1N1)、A/Aichi/2/1968(H3N2)]及临床分离株[A/Guangzhou/GIRD02/2009(H1N1)]有抑制作用(半数有效浓度IC50分别为14.9、20.1、16.8μg/ml)。利巴韦林的TC50为2.05mg/ml,对测试的所有毒株均有抑制作用(IC50为6.8～37μg/ml)。金刚烷胺耐药毒株均为单位点突变(第31位的丝氨酸S置换为天冬酰胺N,S31N)。结论甲型流感病毒对金刚烷胺较易出现耐药,而利巴韦林体外对金刚烷胺敏感株和耐药株均有显著的抑制作用,临床抗流感病毒治疗时可考虑应用。
- 占扬清关文达王玉涛黄群娣招穗珊秦笙伍时冠赵韵诗杨子峰
- 关键词：金刚烷胺利巴韦林流感病毒体外
- 臭灵丹抗甲1型流感病毒FM1株感染小鼠的药效学研究被引量：4
- 2015年
- 【目的】观察臭灵丹抑制甲1型流感病毒FM1株感染的体内药效。【方法】采用小鼠流感病毒性肺炎模型,通过检测小鼠体质量变化和肺指数、肺组织病理变化确认药物的体内抗病毒药效。【结果】病毒对照组的肺指数较正常对照组显著升高(P<0.001),表明该模型复制成功;臭灵丹高、中、低剂量组均未能有效缓解流感病毒感染小鼠的体质量下降(P>0.05);臭灵丹高、中、低剂量组可显著降低流感病毒感染小鼠的肺指数(P<0.05)。小鼠肺组织病理检查结果显示:臭灵丹低剂量组可以缓解肺组织病理性炎症。【结论】臭灵丹对甲1型流感病毒FM1株感染小鼠的病毒性肺炎具有一定的抑制作用。
- 王玉涛李菁夏晓玲孙强明于浩飞杨子峰潘锡平张荣平王新华
- 关键词：小鼠
- 2009年1月-10月广州地区季节性甲型流感病毒的烷胺类药物耐药性分析
- 关文达占扬清张雪黄群娣招穗珊周荣陈荣昌钟南山杨子峰徐国荣李铭源奠自耀罗翌董婉妮王玉涛秦笙
- 香雪抗病毒口服液体外抗甲型流感病毒及炎症因子的作用机制研究
- 2023年
- 目的探讨香雪抗病毒口服液对甲型流感病毒的活性及其在炎症免疫应答中的潜在作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT)染色法检测香雪抗病毒口服液对MDCK细胞和A549细胞的细胞毒性作用。采用细胞病变抑制法(CPE)及空斑减少实验对香雪抗病毒口服液进行抗病毒活性检测。采用免疫荧光法检测NP蛋白。实时荧光定量PCR测定炎症细胞因子的表达情况。采用蛋白印迹实验检测香雪抗病毒口服液对炎症相关信号通路的蛋白表达的影响。结果香雪抗病毒口服液对甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)和A/Aichi/2/68(H3N2)均有一定的抗病毒抑制作用,半数细胞毒性浓度(TC50)分别为42.12、79.36 mg/mL,半数抑制浓度(IC_(50))分别为8.665、5.260 mg/mL,并可减少H1N1病毒空斑形成。香雪抗病毒口服液能呈剂量相关性地降低H1N1诱导的A549细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、视黄酸(维甲酸)诱导基因蛋白I(RIGI)、趋化因子(CC基序)配体5(CCL5)、巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1β)、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、白细胞介素-10(IL-10)、λ干扰素(IFN-λ)、β干扰素(IFN-β)、白细胞介素-8(IL-8)m RNA的表达(P<0.05、0.01、0.001)。在流感病毒单复制周期中,香雪抗病毒口服液在早期阶段0~2 h干预,具有良好的抗流感病毒效果。香雪抗病毒口服液能显著抑制Toll样模式识别受体3(TLR3)、RIG-I、黑色素瘤分化相关基因5(MDA-5)受体的表达,下调核转录因子-κB亚基p65(NF-κB p65)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、信号转导和转录激活因子1(STAT1)、STAT2、STAT3的磷酸化水平,且在20 mg/mL浓度下明显下调这些蛋白的表达。结论香雪抗病毒口服液不仅能有效抑制甲流感病毒在人宿主细胞中复制,降低流感病毒诱导的炎症因子表达,而且能显著抑制流感病毒诱导天然免疫信号通路的相关蛋白表达,表明香雪抗病毒口服液具有防治流感病毒的潜力。
- 李杰婷陈俏连赵昕杨子峰杨子峰
- 关键词：甲型流感病毒抗病毒核因子-ΚB信号通路
- 稳定表达呼吸道合胞病毒非结构蛋白NS1细胞的构建及其生物特性研究被引量：3
- 2011年
- 获得稳定表达RSV病毒NS1基因的HEp-2-NS1细胞株并对其生物学特性进行初步研究。采用RT-PCR方法从RSV病毒中获得NS1全长基因,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,重组载体与包装质粒PIK通过磷酸钙共沉淀法转染包装细胞293FT细胞,产生的逆转录病毒颗粒感染HEp-2细胞,经嘌呤霉素筛选后得到稳定表达细胞株,用QPCR、细胞病变染色法、RT-PCR和间接免疫荧光法检测细胞中NS1 mRNA和蛋白表达情况。结果表明重组逆转录病毒载体pBABE-NS1经双酶切及测序鉴定正确;筛选获得5株阳性单克隆细胞株,QPCR结果显示HEp-2-NS1细胞有NS1基因扩增,其中d株的相对表达量是正常细胞对照组的8 483倍;在外源干扰素作用下,HEp-2-NS1细胞仍对VSV病毒保持敏感,细胞感染病毒48h后染色结果显示全部死亡;对第3代及第30代细胞的RT-PCR和间接免疫荧光法检测结果显示,导入的NS1基因在HEp-2细胞中不仅能转录成相应的mRNA而且能成功稳定地表达。成功构建了稳定表达RSV病毒非结构蛋白NS1的HEp-2-NS1改造细胞株,为建立适用于临床分离的转基因细胞提供良好的基础。
- 秦笙王玉涛杨子峰陈俏连关文达伍时冠刘文宽郑兆广李海涛周荣
- 关键词：呼吸道合胞病毒非结构蛋白细胞
- 臭灵丹调控甲流病毒H3N2感染后多聚免疫球蛋白pIgR与炎症反应的体外实验研究被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨臭灵丹对甲型流感病毒H3N2感染黏膜免疫功能(多聚免疫球蛋白pIgR)及炎症反应的影响。方法:采用CCK-8法检测并选择臭灵丹对细胞的最大无毒浓度进行后续实验研究。采用CCK-8法检测预防模式、治疗模式、共同作用模式下臭灵丹抗病毒药效;16-HBE细胞按正常对照组、臭灵丹对照组、模型组、奥司他韦组及臭灵丹高、低浓度组。除正常对照组及臭灵丹对照组外,其余各组感染流感病毒H3N2后,应用CPE法检测病毒滴度,qPCR法检测细胞中IL-6、IP-10、MCP-1 mRNA表达,Western Blot检测pIgR、NF-κB p65、p-NF-κB p65、TLR1蛋白表达。结果:预防模式下,臭灵丹抗病毒药效选择指数高于其他模式。治疗模式下,与模型组比较,臭灵丹高浓度组细胞上清液病毒滴度显著降低,pIgR蛋白表达显著上调,臭灵丹各组均能显著降低IL-6、IP-10、MCP-1 mRNA及p-NF-κB p65、TLR1蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:在细胞实验中,预防模式下臭灵丹抗病毒药效最佳。臭灵丹可上调pIgR,能抑制甲流H3N2病毒复制且在病毒感染细胞中发挥更显著的pIgR上调作用,同时一定程度抑制病毒诱发宿主NF-κB通路及Toll样受体的激活及相应炎症因子产生;pIgR调控可作为“辛味”中药对流感早期防治机制研究的新切入点。
- 陈泽兴陈耀荣王玉涛马钦海黄婉怡
- 关键词：臭灵丹甲型流感人支气管上皮细胞
- 应用空斑形成法检测五种不同细胞对肠道病毒71型的敏感性被引量：5
- 2009年
- 目的:建立肠道病毒71型(EV71)的空班形成方法,并比较BGM、VeroE6、MRC-5、HEp-2及A549五种细胞对EV71病毒的敏感性.方法:将不同稀释浓度的EV71病毒接种到五种细胞,分别覆盖三种不同的培养物,孵育一定时间后固定染色,比较出斑效果;以新建空斑形成法测定五种细胞感染EV7124-96h后培养液滴度,计算空班形成单位(pfu).结果:在五种细胞中,BGM和VeroE6覆盖琼脂糖凝胶的EV71可形成针尖样空班;覆盖1%甲基纤维素的EV71可形成直径大约1mm圆形或类圆形空班,形成空斑单位最多,病毒滴度分别达2.87×109pfu/L和1.65×109pfu/L;覆盖1.2%艾维素的EV71在BGM细胞中可形成直径大约0.5mm类圆形空斑,在VeroE6细胞中形成针尖样空斑;其他细胞均形成针尖样空斑.结论:空斑形成方法可对肠道病毒进行定量检测,BGM及VeroE6细胞为EV71的敏感细胞.
- 杨子峰秦笙莫自耀关文达王玉涛
- 关键词：肠道病毒71型细胞
- 实验动物小鼠及西藏小型猪和猴的甲型流感病毒受体分布特征被引量：1
- 2015年
- 目的分析小鼠、西藏小型猪和猴的流感病毒sialic acid(SA)α-2,3-Gal[α-2,3-半乳糖唾液酸]受体和SAα-2,6-Gal受体在不同器官、组织分布特征,为流感病毒的组织嗜性及可能的跨种属传播提供基础数据。方法应用外源凝集素亲和组织化学染色法分析上述实验动物的流感病毒SAα-2,3-Gal受体和SAα-2,6-Gal受体的分布特点及特异性。结果除脑和心脏外,气管与支气管、肺脏、肾脏、脾脏、肝脏、小肠都有SAα-2,3-Gal和SAα-2,6-Gal受体分布,其中小鼠的SA-2,3-Gal受体主要分布在气管纤毛上皮细胞和基底细胞,SAα-2,6-Gal受体在气管纤毛上皮细胞有弥漫性表达;在肺实质,SAα-2,3-Gal受体弥漫性存在于肺泡。西藏小型猪的SAα-2,6-Gal受体主要分布在气管和支气管内上皮细胞的假复层纤毛上皮细胞,肺脏中,SAα-2,6-Gal主要分布在上皮细胞中而SAα-2,3-Gal主要分布在内皮细胞中,在肺泡内层SAα-2,6-Gal和SAα-2,3-Gal受体表达相似;猴的气管和支气管中,SA-2,3-Gal受体主要分布在气管无纤毛上皮细胞(主要是基底细胞),以及支气管部分纤毛和无纤毛上皮细胞;SAα-2,6-Gal受体在气管支气管纤毛细胞和无纤毛上皮细胞有弥漫性表达,且2种受体在肺细胞中均有分布。结论流感病毒SAα-2,3-Gal受体和SAα-2,6-Gal受体在不同器官中均有不同程度分布,其中主要分布在气管与支气管、肺脏等上、下呼吸道。
- 王玉涛赵瑾杨子峰李润峰杨春光李洪涛张奉学
- 关键词：小鼠西藏小型猪甲型流感病毒
- 一种病毒运送培养基的改良及其评价
- 2009年
- 目前我国临床实验室常用的病毒运送培养基多以商业化产品为主，但其效果未见相应的实验数据。本研究利用流感病毒PR8株、呼吸道合胞病毒Long株作为试验用病毒的代表，根据临床实际应用情况对病毒运送培养基的最适条件进行筛选和评价。
- 杨子峰秦笙王玉涛招穗珊黄群娣关文达周荣莫自耀
- 关键词：流感病毒培养基呼吸道合胞病毒LONG
- 冷氧等离子体杀灭甲型H1N1流感病毒的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的在自行设计的等离子体反应装置中,模拟冷氧等离子体对甲型H1N1流感病毒气溶胶的杀灭作用。方法以甲型H1N1流感病毒PR8株和2009年季节性甲型H1N1流感病毒临床分离株作为指示病毒株,将流感病毒悬液雾化成气溶胶状态(约3.5μm),通过装置有冷氧等离子发生器和普通紫外灯管(8W)的自制管道,分别作用30min,在管道上、下方的出口收集病毒气溶胶于基础培养基(MEM)培养液中;以空斑形成法检测收集的流感病毒滴度。结果无任何干预条件下,流感病毒悬液雾化经过管道后,PR8株平均存活率为23.0%,病毒滴度下降0.64logPFU,临床分离株平均存活率为35.7%,病毒滴度下降0.44logPFU;PR8株气溶胶颗粒经冷氧等离子和普通紫外灯作用后,平均病毒滴度分别下降2.19、5.83logPFU,相对杀灭率为99.35%、100.00%;临床分离株气溶胶颗粒经冷氧等离子和普通紫外灯作用后,平均病毒滴度分别下降2.15、1.95logPFU,相对杀灭率为99.3%、98.9%。结论冷氧等离子对于受测的甲型H1N1流感病毒气溶胶,均显示了较好的杀灭作用,与普通紫外灯效果基本类似。
- 王玉涛杨子峰招穗珊李润峰关文达秦笙曾广翘
- 关键词：流感病毒消毒
