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NLS和DMSO提高核糖体区打靶载体转染效率的研究: 非病毒载体因为安全性好、操作简便、免疫原性低等方面而优于病毒载体。但是较低的转染效率和治疗基因的短暂表达严重限制了其临床应用。我室构建的人核糖体区打靶载体pHrneo,可以高效定点整合到rDNA区/(定点整合率10~/(...; 石岩; 关键词：核定位信号 DMSO 皮肤成纤维细胞转染效率; 文献传递

Mini-Tn10转座子构建欧文氏杆菌突变体的研究被引量：1: 2010年; 构建细菌突变体是发现新基因、分析基因功能、了解某些生物机理的重要途径。本研究通过转座子Mini-Tn10对迄今报道草本纤维提取效率最高的菌株胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovor)变异菌株CXJZU120进行随机突变,获得5 523个突变体。采用非纤维素降解实效法和水解圈法等功能性鉴定,筛选出3个非纤维素降解活性降低或丧失的突变体,为深入研究非纤维素降解机理,寻找与非纤维素降解相关基因并构建新一代高效菌株奠定了基础。; 石岩刘正初徐君飞张居作李炫; 关键词：转座子突变体

改性沸石对微污染灌溉水中Cd(Ⅱ)的吸附机理研究: 随着人口快速增长,工业化及经济的飞速发展,重金属污染已成为全球最主要的环境问题之一。水体是重金属污染物扩散的主要途径,世界上的许多河流系统都出现了不同程度的污染,中国的河流水体也不例外。世界范围内大部分的河流都担负着农田...; 石岩; 关键词：活化沸石镉离子; 文献传递

β-甘露聚糖酶基因高效表达体系的构建被引量：2: 2009年; 为构建β-甘露聚糖酶基因高效表达体系,采用重叠区扩增基因拼接法将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CTC S-层蛋白启动子和欧文氏杆菌(Erwinia carotovora)CXJZ95-198 β-甘露聚糖酶基因完整开放阅读框定向连接,得到基因拼接体slp-man。将slp-man克隆到高效表达载体pET-28a+上,并转化到大肠杆菌(Escherichia coli)JM109中。结果表明,β-甘露聚糖酶基因高效表达体系构建成功,重组菌发酵11h酶活达到671.3U·mL-1,是欧文氏杆菌CXJZ95-198的1.48倍。; 李斌刘正初王溪森石岩; 关键词：Β-甘露聚糖酶基因重叠区扩增基因拼接法

核定位信号肽提高核糖体区打靶载体转染效率的研究(英文): 2009年; 核糖体区打靶载体(10～14kb)是中南大学医学遗传学国家重点实验室构建的一种具有定点整合能力的非病毒载体,具有安全性好及长期稳定表达的特点,但是较低的转染率成为其应用于临床的主要障碍.核定位信号肽可以促进非病毒载体进入细胞核,从而提高其转染效率.但是核定位信号肽提高外源基因表达的能力却严重受到其与DNA偶联方式及偶联剂的影响.采用偶联剂SPB可以通过静电作用将核糖体区打靶载体与SV40核定位信号肽有效结合,并且可以防止其被DNase降解.应用聚乙烯亚胺转染人原代皮肤成纤维细胞后,激光共聚焦显微镜观察显示,核定位信号肽可以在60min内携带12kb的质粒DNA进入细胞核.转染后48h,流式细胞仪检测GFP表达,结果显示转染率提高了4～5倍.聚乙烯亚胺是一种毒性小,而且价格低廉的高分子转染试剂,广泛被应用于体内基因治疗的研究中,上述研究将会促进核糖体区打靶载体在临床基因治疗中的应用.; 石岩刘雄昊梁德生冯劢邬玲仟杨俊林李卓赵凯潘乾龙志高夏家辉; 关键词：转染效率基因治疗聚乙烯亚胺

铝电解用TiB_2/Al_2O_3复合阴极的烧结与性能研究被引量：3: 2011年; 以氧化铝溶胶为粘结剂,采用冷压烧结法制备出铝电解用TiB2/Al2O3复合阴极材料,研究了烧结温度、烧结时间和溶胶添加量对复合阴极相对密度、电阻率和抗压强度的影响。结果表明:烧结温度的提高能够增加复合阴极的相对密度,同时有利于降低复合阴极电阻率。1 400℃烧结的复合阴极相对密度可达93.83%,电阻率最低为0.56μΩ.m。随着烧结时间的延长,复合阴极的电阻率先降低后增加。烧结时间为5 h时复合阴极电阻率最低,为0.72μΩ.m。当溶胶含量为25%,1 400℃烧结5 h时,复合阴极材料性能最佳,其电阻率可达0.72μΩ.m、抗压强度为38.70 MPa。; 韩硕李劼张凯吕晓军赖延清石岩; 关键词：铝电解 TIB2 烧结温度

β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因在大肠杆菌中共表达被引量：6: 2012年; 【目的】β-甘露聚糖酶和木聚糖酶都属于半纤维素酶,它们已经同时运用于工农业生产的许多领域。构建β-甘露聚糖酶和木聚糖酶共表达菌株并进行相关评价。【方法】通过设计一个共同的酶切位点,将菌株Bacillus subtilis BE-91中的β-甘露聚糖酶和木聚糖酶基因串联到表达载体pET28a(+)上,转化大肠杆菌构建了一株能够共表达β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的菌株B.pET28a-man-xyl。【结果】菌株诱导21 h后,发酵液中β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的酶活分别为713.34 U/mL和1455.83 U/mL,是胞内酶活的11.8倍和2.53倍。【结论】SDS-PAGE分析、水解圈活性检测和胞外酶与胞内酶酶活检测表明:两个酶均以功能蛋白独立分泌到胞外。此外,与β-甘露聚糖酶和木聚糖酶单独酶解半纤维素相比,复合酶的酶解效果更好。菌株的成功构建为复合酶制剂(半纤维素酶制剂)的研究和生产奠定基础。; 高海有刘正初段盛文成莉凤石岩冯湘沅郑霞郑科宋志姣; 关键词：Β-甘露聚糖酶木聚糖酶大肠杆菌共表达

欧文氏杆菌突变体的构建及枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶基因的克隆和表达: 纤维是人类生存的第二大必需物质,伴随石油、森林和土地资源的短缺以及人类生活质量的提高,开发非棉、非木纤维资源迫在眉睫。由于生物法提取草本纤维能有效降低传统方法和常规方法对环境造成的严重污染,提高产品质量,降低生产成本,因...; 石岩; 关键词：突变体枯草芽孢杆菌 Β-甘露聚糖酶克隆; 文献传递

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石岩