刘洁
- 作品数：14 被引量：54H指数：5
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- 新型表皮生长因子受体抑制剂抗T790M型非小细胞肺癌作用被引量：1
- 2016年
- 目的观察7个FCN系列表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂对H1975细胞体内外抗肿瘤作用。方法采用非小细胞肺癌(NSCLC)H1975细胞(T790M突变)和人表皮鳞癌A431细胞(WT-EGFR)体外增殖抑制试验对7个FCN系列化合物进行筛选,得到抗肿瘤活性强且选择性更好的化合物。通过细胞划痕实验、流式细胞术分别测定化合物对细胞迁移能力、细胞周期和凋亡的影响,通过H1975细胞裸鼠移植瘤实验明确化合物在体内对肿瘤生长的影响。结果 H1975细胞增殖实验筛选出高活性化合物FCN12、FCN14和FCN15,半数抑制浓度(IC50)分别为(103.33±12.10)、(115.17±7.69)和(128.63±32.72)nmol·L^(-1);经A431细胞增殖实验筛选出FCN12、FCN14,两者的体外抗细胞增殖抑制活性与对照药AZD9291相当(IC50>2μmol·L^(-1)),并可将H1975细胞阻滞于G1期;与对照药相比,FCN12、FCN14可明显增加细胞凋亡率(P<0.01)和抑制细胞的迁移(P<0.05),且呈浓度依赖性;体内移植瘤实验结果显示FCN12、FCN14可以明显抑制肿瘤的生长并缩小肿瘤体积(P<0.01)。结论新型EGFR抑制剂FCN12、FCN14对EGFR耐药型NSCLC具有显著的体内外抗肿瘤活性。
- 廖杨梅傅洁民刘洁董志
- 关键词：受体表皮生长因子蛋白酪氨酸激酶类抗肿瘤活性
- β-石竹烯对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障的保护作用被引量：5
- 2016年
- 目的观察β-石竹烯在局灶性脑缺血再灌注损伤模型中对大鼠血脑屏障的影响。方法采用中动脉栓塞法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,分别设假手术组、模型组、β-石竹烯组(34、102、306 mg·kg^(-1))和尼莫地平(4 mg·kg^(-1))组。2,3,7-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定大鼠的脑梗死体积,伊文思蓝法观察大鼠血脑屏障通透性的改变。免疫组化法观察缺血核心区皮质水通道蛋白-4(AQP-4)的阳性表达。Western blot法检测缺血核心区claudin-5水平变化和occluding的表达。结果再灌24 h后,β-石竹烯组较模型组可不同程度地改善神经缺损症状,降低神经行为学评分,减小脑梗死体积,减少缺血侧EB含量,减少AQP-4的表达,增加claudin-5和occluding的表达(P<0.05,P<0.01)。结论β-石竹烯可通过减少AQP-4的表达,上调claudin-5和occluding的表达来减轻脑缺血再灌注所导致的脑水肿,降低血脑屏障损伤。
- 李然然董志曹光秀刘洁
- 关键词：脑缺血再灌注血脑屏障
- 人胚胎干细胞对A549、HepG2细胞增殖与凋亡的影响被引量：1
- 2018年
- 本研究以探讨人胚胎干细胞（human embryonic stem cells,h ESCs）对肿瘤细胞A549、Hep G2增殖与凋亡的影响为目的,以h ESCs、A549细胞、Hep G2细胞作为研究对象,采用transwell小室在体外分别建立h ESCs与A549、Hep G2细胞的非接触式共培养的方法,设置Co-A549、Co-Hep G2作为实验组,单独培养的A549、Hep G2细胞作为对照组,采用CCK-8法检测细胞增殖水平,Hochest33258染色和流式细胞术检测细胞的凋亡,q RT-p CR和Western blotting检测Bcl2、Bax及Caspase-3的m RNA转录水平和蛋白表达水平。CCK-8检测显示,实验组细胞的增殖受到显著抑制（p〈0.05）,Hochest33258染色观察到实验组细胞出现核固缩、变形,流式细胞术检测到实验组细胞的凋亡率显著高于对照组（p〈0.05）,q RT-p CR和Western blotting显示h ESCs可上调实验组细胞Bax、Caspase-3的表达,下调Bcl2的表达（p〈0.05）。由此我们得到人胚胎干细胞对肿瘤细胞A549、Hep G2有明显的增殖抑制作用并可诱导A549、Hep G2肿瘤细胞的凋亡的结论,为干细胞治疗肿瘤的研究奠定了实验基础。
- 霍本念刘洁刘洁张婷刘梦楠王薛
- 关键词：人胚胎干细胞凋亡
- 胚胎干细胞与急性髓系白血病细胞KG1a的共培养研究
- 目的： 体外研究人胚胎干细胞H9与急性髓性白血病细胞KG1a建立共培养体系后，KG1a细胞所发生的变化，并探讨其作用机制。 方法： 体外将人胚胎干细胞H9和白血病细胞KG1a建立接触式共培养体系，细胞计数试剂盒-8...
- 刘洁
- 关键词：胚胎干细胞急性髓系白血病共培养
- 知母皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用被引量：8
- 2018年
- 目的在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型中,初步研究知母皂苷对水通道蛋白4(aquapo rin-4,AQP-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)表达的影响。方法 240只SD大鼠分为6组(40只/组):假手术组、模型组、知母皂苷低、中、高剂量组(SA,10,20,40mg·kg^(-1))和尼莫地平组(12mg·kg^(-1))。采用"插线法"造模。再灌注48 h后,观察每组大鼠的神经症状,并进行神经行为学评分;测定脑梗死范围、脑含水量;采用伊文思蓝法对各组血脑屏障的通透性进行检测;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)对各组TNF-α、IL-6和IL-1β的含量进行测定;采用Western blot法对各组AQP-4的含量进行测定;采用HE染色法观察各组大鼠脑组织病理形态的变化。结果知母皂苷组能改善造模后造成的神经功能缺损、脑组织病理形态学改变;降低脑含水量、脑梗死面积和血脑屏障的通透性;下调AQP-4、TNF-α、IL-6、IL-1β的表达。结论知母皂苷对脑缺血/再灌注SD大鼠能起到一定的保护作用,这可能是由于AQP-4和TNF-α、IL-6、IL-1β表达下调,从而维持血脑屏障的稳定性有关。
- 丁玲胡毅刘洁李艳张作文
- 关键词：知母皂苷脑缺血再灌注水通道蛋白4白介素-6白介素1Β
- 姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注apoE及RXR、LXR表达的影响
- 目的：本研究旨在从在体实验和离体实验两部分，分别观察中药姜黄素（ Curcumin， Cur）对在体实验中大鼠局灶性脑缺血再灌注（ischemia/reperfusion，IR）模型，以及对离体实验中原代星形胶质细胞（ ...
- 刘洁
- 关键词：姜黄素载脂蛋白B
- 山奈酚对脑缺血再灌注大鼠神经元超微结构及TLR4/NF-kB的影响
- ：观察山奈酚对脑缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)大鼠海马神经元超微结构的影响,研究其对TLR4(Toll-like receptor4,TLR4)/NF-kB(nuclear factor-...
- 向丽董志李然然曹光秀刘洁
- 关键词：脑缺血再灌注山奈酚海马神经元超微结构TOLL样受体
- 姜黄素对缺氧再灌注时体外培养星形胶质细胞载脂蛋白E及类视黄醇X受体、肝X受体表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:本研究旨在观察在姜黄素(Curcumin)对离体缺血再灌注模型中,原代培养新生SD大鼠的大脑皮层星形胶质细胞载脂蛋白E(Apolipoprotein E,Apo E)、类视黄醇X受体(Retinoic X receptor,RXR)和肝X受体(Liver X receptor,LXR)的影响。方法:选取新生SD大鼠,对其大脑皮层的星形胶质细胞进行原代培养,用糖氧剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/Reoxygenation)方法来构建离体的脑缺血再灌注模型。运用免疫荧光法观察神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达来鉴定星形胶质细胞。本实验将培养的细胞分为7组:正常对照组;模型组;姜黄素剂量组:2.5umol/L,5umol/L,10umol/L,20umol/L;尼莫地平阳性对照组:0.5umol/L。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)两个指标分别对细胞的活力以及细胞的毒性进行评定。用ELISA法对原代细胞条件培养液中Apo E和RXR、LXR的含量进行测定,并用蛋白质印迹法(Western Blot)对星形胶质细胞Apo E和RXR、LXR的表达水平进行测定。结果:姜黄素可使细胞活力明显增高,LDH释放量显著降低,并使APOE及LXR、RXR的表达上调。其中20umol/L效果最为明显,而最低剂量2.5umol/L几乎为无效剂量。结论:姜黄素对糖氧剥夺再灌注条件下离体星形胶质细胞具有保护作用,此保护作用可能是通过上调APOE及LXR、RXR的表达所引起的。
- 刘洁董志
- 关键词：姜黄素星形胶质细胞载脂蛋白E肝X受体
- 一种人胚胎干细胞与前列腺癌细胞共培养制备抗前列腺癌药物的方法
- 本发明提供一种人胚胎干细胞与前列腺癌细胞共培养制备抗前列腺癌药物的方法。人胚胎干细胞能在体外培养、具有发育全能性的干细胞，具有高度的自我更新、无限增殖以及多向分化的能力。发明人意外发现，将人胚胎干细胞和前列腺癌细胞进行直...
- 冯涛杨鑫玥卢杨霍本念刘洁何雪梅张婷郑良栋
- 淫羊藿苷对中动脉阻塞大鼠脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B表达的影响被引量：8
- 2015年
- 目的:探讨淫羊藿苷对中动脉阻塞模型大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸激酶受体B(Trk B)表达的影响及其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:本研究采用插线法制作大鼠中动脉阻塞模型(MCAO)。成年雄性SD大鼠被随机分为四组:假手术组;缺血再灌注组;淫羊藿苷高剂量组:100 mg/kg,淫羊藿苷中剂量组:50 mg/kg,淫羊藿苷低剂量组:25mg/kg和剂量为10 mg/kg的尼莫地平阳性对照组。观察淫羊藿苷对神经功能缺损评分和脑含水量的影响,运用蛋白质印迹法(Western Blot)检测BDNF蛋白和Trk B的表达;苏木精伊红(H&E)染色观察脑组织的形态学改变;并运用细胞凋亡检测(TUNEL法)的方法检测海马CA1区神经元的凋亡情况。结果:50mg/kg和100 mg/kg的淫羊藿苷均可改善MCAO大鼠神经损伤症状;降低其脑含水量;减轻脑缺血再灌注损伤的脑组织形态学改变及CA1区神经元凋亡;上调BDNF和Trk B的表达。其中100 mg/kg效果最为明显,而最低剂量25 mg/kg几乎为无效剂量。结论:淫羊藿苷对脑缺血再灌注具有保护作用,此作用可能是由上调BDNF与Trk B的表达引起的。
- 刘洁董志廖杨梅曹光秀李然然
- 关键词：淫羊藿苷脑缺血再灌注脑源性神经营养因子酪氨酸激酶受体B
