张新晨
- 作品数:6 被引量:9H指数:2
- 供职机构:南京农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- PCV2亚临床感染仔猪淋巴结干扰素及其调控因子的变化
- PCV2 是猪圆环病毒病(PCVD)的主要病原,但并不是感染后所有猪只都表现出典型临床症状。干扰素是机体抵御病毒感染第一道防线,目前对PCV2 诱导干扰素的产生和调控报道甚少,本试验通过建立PCV2 亚临床感染模型,检测...
- 赵其岭张新晨吕英军
- 猪圆环病毒2型诱导PK-15细胞产生IFN-β的信号通路研究被引量:3
- 2016年
- 【目的】研究猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)感染PK-15细胞后调控β-干扰素(interferon-β,IFN-β)生成的信号通路,为猪圆环病毒病的发生机理和防治提供理论基础。【方法】将PK-15细胞随机分成5组:对照组、PCV2组、BX795(TBK1/IKKε抑制剂)组、BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)组和BX795+BAY11-7082(混合抑制剂)组。BX795组、BAY 11-7082组、BX795+BAY 11-7082组分别用0.5μmol BX795、5μmol BAY11-7082、0.5μmol BX795+5μmol BAY 11-7082预先处理1 h,然后感染PCV2。于感染后3、12、24、48和72 h收集细胞,提取RNA。用荧光定量PCR检测IFN-β、模式识别受体(TLR3、TLR9、RIG-1、MDA-5、DAI)、接头蛋白(TRIF、MyD88、Sting、MAVS、IRF3)的mRNA 含量。【结果】PCV2感染PK-15细胞后,IFN-β的mRNA 含量在48、72 h显著升高(P<0.01),表明PCV2感染可以诱导PK-15细胞生成IFN-β;TLR3的mRNA 含量在48 h显著升高(P<0.01),TLR9的表达量在48、72 h显著升高(P<0.01);TLR3和TLR9下游的接头蛋白MyD88和TRIF的mRNA 含量在48 h显著升高(P<0.01),表明PCV2激活了Toll样受体介导的NF-κB信号途径;MDA-5的mRNA 含量在48、72 h显著升高(P<0.01),RIG-1的mRNA 含量在72 h显著升高(P<0.01),MDA-5和RIG-1下游的接头蛋白MAVS、Sting、IRF3的mRNA 含量在48 h显著升高(P<0.01),表明PCV2激活了RIG-1样受体介导的IRF3信号途径;DAI的mRNA 含量在48、72 h显著升高(P<0.01),表明PCV2亦激活了DNA模式识别受体介导的IRF3信号途径;分别用BX795和BAY 11-7082抑制IRF3和NF-κB介导的信号通路,结果显示NF-κB抑制剂组的IFN-β的mRNA 含量与PCV2组相比无显著性差异(P>0.05),TBK1/IKKε抑制剂组的IFN-β的mRNA 含量与PCV2组相比明显下降(P<0.05),表明PCV2诱导IFN-β的产生主要由IRF3信号途径调控。【结论】PCV2感染可以诱导PK-15细胞中IFN-β表达量的上调,其上调主要与IRF3信号通路有关。
- 张新晨赵其岭陈萌萌孙嘉瑞鲍恩东张书霞吕英军
- 关键词:PK-15细胞IFN-Β接头蛋白
- PCV2人工感染对猪肺泡巨噬细胞干扰素信号通路的调控研究被引量:1
- 2016年
- 通过建立PCV2亚临床感染模型,探究感染仔猪肺泡巨噬细胞中干扰素的变化及其调控,为PCV2复制和发病机制研究提供补充。30日龄猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原和抗体均为阴性的仔猪15头,随机分成PCV2阴性对照0d组、PCV2感染14d组和PCV2感染28d组。感染后荧光定量PCR方法检测肺泡巨噬细胞中干扰素、模式识别受体和模式识别受体接头分子mRNA水平。结果显示,IFN-β和IFN-γmRNA转录水平在14和28d均显著高于对照组(P<0.05);模式识别受体RIG-1、MDA-5、TLR4和TLR9mRNA转录水平在14和28d显著升高(P<0.05);DAI mRNA转录水平在14d显著升高(P<0.05),但28d迅速下降;TLR3、TLR7和TLR8mRNA转录水平无明显变化。接头分子MAVS、MyD88、IRF3和IRF7mRNA转录水平在14和28d均显著高于对照组(P<0.05)。以上结果表明,PCV2亚临床感染仔猪后导致肺泡巨噬细胞内IFN-β和IFN-γ的表达量上调,其上调和PCV2激活的TLR4/TLR9/MyD88和RIG-1/MDA-5/DAI/MAVS/IRF3信号通路有关。
- 赵其岭张新晨陈萌萌孙嘉瑞鲍恩东张书霞吕英军
- 关键词:PCV2仔猪肺泡巨噬细胞干扰素模式识别受体
- 饲料中妥曲珠利高效液相色谱检测方法的建立被引量:2
- 2014年
- 建立妥曲珠利检测的高效液相色谱法,以检测饲料中妥曲珠利。饲料经乙腈提取、硅胶固相萃取柱净化后,以乙腈与0.2%冰乙酸混合溶液(体积比为30:70)为流动相,紫外检测器240 nm测定。结果表明:妥曲珠利的平均回收率为87.82%~105.06%,RSD小于10%;检测限为0.015μg·mL^(-1),配合饲料的定量限为0.25 mg·kg^(-1)。该方法灵敏度高,准确性和重现性良好,适用于配合饲料、浓缩饲料和预混饲料中妥曲珠利的检测。
- 杨迪宗昕如刘杰张新晨鲍恩东
- 关键词:饲料妥曲珠利高效液相色谱法固相萃取
- 三聚氰胺与三聚氰酸混合物对小鼠睾酮生成和调控的影响被引量:3
- 2016年
- [目的]本文旨在研究三聚氰胺与三聚氰酸混合物对小鼠睾酮生成和合成调控的影响。[方法]选40只4周龄雄性ICR小鼠随机分成4组,每组10只,分为三聚氰胺(MA)与三聚氰酸(CA)混合物(MC)低剂量组(MA、CA各1 mg·kg^(-1),MC2)、中剂量组(MA、CA各5 mg·kg^(-1),MC10)、高剂量组(MA、CA各25 mg·kg^(-1),MC50)和对照组(玉米油灌胃),连续灌服28 d;放射免疫法测定血清中睾酮含量,荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法分别检测与睾酮合成相关的蛋白(St AR、P450scc、P450 17α和17β-HSD)及其基因的表达变化,免疫组织化学方法检测睾丸间质细胞数量。[结果]MC10和MC50组小鼠血清中睾酮含量显著低于对照组(P<0.05);与对照组相比,混合物处理各组的St AR mRNA和17β-HSD mRNA表达量明显下调(P<0.05),MC10和MC50组的P450 17αmRNA表达量以及MC50组的P450scc mRNA表达量也明显降低(P<0.05);睾酮合成相关的蛋白表达与mRNA水平变化一致,混合物处理各组的17β-HSD蛋白表达明显低于对照组,MC50组的P45017α蛋白表达以及MC10和MC50组的St AR及P450scc蛋白表达也明显低于对照组(P<0.05);MC50和MC10组的小鼠睾丸间质细胞数量极显著低于对照组(P<0.01)。[结论]三聚氰胺与三聚氰酸混合物减少了间质细胞的数量并下调了睾酮合成相关蛋白的表达,导致血清中睾酮水平降低。
- 孙嘉瑞曹轶男张新晨赵其岭鲍恩东吕英军
- 关键词:小鼠睾丸间质细胞
- PCV2亚临床感染仔猪淋巴结干扰素及其调控因子的变化
- PCV2是猪圆环病毒病(PCVD)的主要病原,但并不是感染后所有猪只都表现出典型临床症状。干扰素是机体抵御病毒感染第一道防线,目前对PCV2诱导干扰素的产生和调控报道甚少,本试验通过建立PCV2亚临床感染模型,检测PCV...
- 赵其岭张新晨吕英军
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