马会明
- 作品数:42 被引量:135H指数:7
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- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区科技厅科技攻关项目更多>>
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- 单次热应激处理对小鼠睾丸生精细胞的影响被引量:11
- 2016年
- 目的:探讨单次热应激对小鼠睾丸生精功能可复性研究。方法:C57雄性小鼠36只,随机按1、7、14 d各分为对照组(n=6)和热应激组(n=6)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别在43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取材。计算睾丸器官指数,HE染色观察睾丸组织结构变化,免疫组化染色检测早幼粒白血病锌指蛋白(PLZF)和联会复合体蛋白3(SCP-3)在睾丸组织中的定位及表达,Western印迹检测PLZF蛋白表达水平。结果:热应激组小鼠睾丸器官指数明显低于对照组(P<0.01)。HE染色可见,热应激组与对照组相比,热应激后第1天生精细胞排列松散,散落在生精小管中;第7天生精小管萎缩,排列疏松,生精细胞明显减少;第14天生精小管排列较为紧密,生精细胞数量增加,生精细胞层数增多。与对照组相比第1、7天热应激组SCP-3标记的精母细胞明显减少,第14天精母细胞数量开始恢复。Western印迹检测结果显示,PLZF蛋白在热应激处理后1 d表达量显著降低(0.19±0.02 vs 0.64±0.03,P<0.01),第7、14天又迅速增加(0.77±0.02、0.77±0.02),且显著高于对照组(P<0.01)。结论:小鼠睾丸热应激处理后可致生精功能发生障碍,随着时间的推移,这种损伤具有可复性。
- 马文智田洪成马会明杨晓霞裴秀英王燕蓉马良宏
- 关键词:生精功能可复性
- 枸杞籽油对小鼠睾丸支持细胞衰老模型的抗炎作用被引量:5
- 2020年
- 目的探讨枸杞籽油对小鼠睾丸支持细胞(TM4)衰老模型的抗炎作用及机制。方法以不同浓度(50、100、150、200 mmol/L)的D-半乳糖(D-Gal)以不同时间(24、36、48 h)体外作用TM4细胞,通过CCK-8法和β-半乳糖苷酶染色筛选最佳时间浓度的D-Gal建立TM4衰老模型,Western blotting检测衰老因子P16^INK4A、P21^Waf1/Cip1、γH2A.X以及半乳糖苷酶蛋白的表达。以不同浓度(1%、3%、5%、10%)枸杞籽油含药血清提前干预TM4细胞衰老模型,并用CCK-8筛选枸杞籽油含药血清最佳浓度。Western blotting检测细胞炎症因子白细胞介素-1(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)与血红素加氧酶(HO-1)的表达以及p-P65/P65的相对表达量;细胞免疫荧光(IF)定位NF-κB表达。结果D-Gal建立TM4衰老模型结果显示,与正常细胞比较,200 mmol/L浓度的D-Gal干预48 h对细胞增殖有抑制作用,其抑制率为(14.890±0.892)%,差异有统计学意义(F=12.820,P=0.004;t=17.230,P<0.001),同时β-半乳糖苷酶染色结果显示,与正常细胞比较,细胞蓝染阳性率上升(t=5.243,P<0.001)。P16^INK4A(t=2.364,P=0.033)、P21^Waf1/Cip1(t=2.908,P=0.011)、γH2A.X(t=2.511,P=0.025)蛋白表达以及半乳糖苷酶(t=2.299,P=0.037)表达在衰老模型组升高。枸杞籽油抗TM4衰老的结果显示,3%浓度的枸杞籽油含药血清干预衰老TM4细胞后活性上升(t=5.399,P<0.001)。与正常细胞比较,TM4细胞衰老相关蛋白P16^INK4A(t=7.211,P<0.001)、P21^Waf1/Cip1(t=8.248,P<0.001)、γH2A.X(t=4.145,P<0.001)以及半乳糖苷酶(t=7.288,P<0.001)表达下调;与模型组相比,3%浓度的枸杞籽油含药血清干预后炎症因子TNF-α(t=4.992,P<0.001)、IL-1β(t=2.921,P=0.011)、IL-6(t=4.985,P<0.001)的表达下调,HO-1(t=6.047,P<0.001)与IL-10(t=2.315,P=0.036)表达上调;衰老TM4细胞p-P65/P65相对表达量在3%浓度的枸杞籽油含药血清干预后下调(t=24.630,P<0.001)。结论3%枸杞籽油含药血清干预,对衰老TM4细胞�
- 杨张杰王宇欣陈冬梅赵帅虎娜马良宏马会明
- 关键词:NF-ΚB通路
- 基于Nrf2/HO-1信号通路探讨浓缩当归丸对缓解卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的影响
- 2023年
- 目的:探讨浓缩当归丸改善卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的作用及机制。方法:36只成年雌性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、雌二醇(E2)/地屈孕酮片组、浓缩当归丸高、中、低剂量组,每组6只。除正常组外,其余各组大鼠每日腹腔注射乙烯基环己烯(VCD)80 mg·kg^(-1)造模,连续14 d。从第15天起,模型组灌胃生理盐水2 mL·kg^(-1);雌二醇/地屈孕酮片组灌胃芬吗通0.3 mg·kg^(-1);浓缩当归丸高、中、低剂量组灌胃浓缩当归丸2.08、4.16、8.32 g·kg^(-1),每日1次,连续给药28 d。测定大鼠卵巢指数;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中相关激素E2、促卵泡激素(FSH)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)和抗缪勒管激素(AMH)水平,以及血清过氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量;硫代巴比妥酸(TAB)法检测血清丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色法观察卵巢形态学变化;免疫组化法(IHC)检测卵巢组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶^(-1)(HO^(-1))、SOD2、SOD1的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织中Nrf2、HO^(-1)、SOD2、SOD1蛋白的相对表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠卵巢中生长卵泡明显减少、卵泡颗粒层排列松散;大鼠体质量、卵巢指数和血清AMH、E2水平显著下降,LH、FSH水平均显著升高(P<0.01);SOD和GSH水平显著下降(P<0.01),MDA水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,E2/地屈孕酮片组和浓缩当归丸各组卵巢指数均明显增加(P<0.05,P<0.01),血清中E2水平明显升高(P<0.05,P<0.01),FSH、AMH、LH水平明显降低(P<0.05,P<0.01);卵巢内生长卵泡数量增多;血清中SOD活性增强,GSH含量升高,MDA含量明显下降(P<0.05,P<0.01);卵巢组织中Nrf2、HO^(-1)、SOD2、SOD1蛋白表达水平明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论:浓缩当归丸能够调节血清激素水平,且增加卵巢组织中Nrf2、HO^(-1)、SOD2、SOD1因子的表达,提高卵巢组织抗�
- 罗嘉琦杜小利陈冬梅陈冬梅陈苗邢莎莎刘文钊田瑞莹杨丽王静王静马会明
- 关键词:性激素活性氧
- 单次热应激对小鼠睾丸雄激素受体的影响被引量:3
- 2016年
- 目的探讨单次热应激对小鼠睾丸雄激素受体(AR)的影响。方法将6周龄C57雄性小鼠24只分为对照组(6只)和热应激处理组(18只)。小鼠睾丸热应激处理组给予单次43℃水浴,干预15 min,于1 d、7 d和14 d取睾丸,用免疫组织化学染色检测雄激素受体蛋白在睾丸组织中的定位及变化,蛋白印迹(Western Blot)检测睾丸中雄激素受体蛋白的表达,并进行统计学分析。结果免疫组织化学检测显示,AR定位在细胞的细胞核,在曲细精管的基底膜处以及间质细胞中表达,在第14天表达最强;Western blot检测显示,与对照组相比,热应激后雄激素受体蛋白的表达随着时间推移不断增多,且组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠睾丸经43℃水浴单次热应激15 min后,雄激素受体蛋白表达对生精细胞恢复有保护作用。
- 田洪成马良宏马会明杨晓霞耿芝马文智裴秀英王燕蓉
- 关键词:热应激小鼠睾丸雄激素受体
- 单次热应激对小鼠睾丸增殖细胞的影响被引量:2
- 2015年
- 目的明确单次热应激对小鼠睾丸增殖细胞的影响。方法 6周龄雄性C57小鼠36只,随机分为热处理组和对照组。小鼠热处理组单次43℃水浴,干预15 min,于1、7和14 d取材,HE染色观察睾丸结构形态,免疫组织化学染色检测增殖细胞定位及变化,Western Blot检测Ki67蛋白表达,并进行统计学分析。结果应激处理组生精小管排列疏松,曲细精管中细胞数量明显减少甚至消失,细胞散落在曲细精管中;免疫组化可见,增殖细胞呈现动态变化过程,单次热应激处理后1 d增殖细胞显著减少,第7、14天增殖细胞数量开始慢慢恢复;Western Blot可见KI-67表达量在热应激处理后7 d表达量显著降低,第14天表达量慢慢恢复,且各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠睾丸经43℃水浴单次热应激15 min后,增殖细胞的动态恢复是后期精子生成的结构基础。
- 田洪成马文智马会明蒲静杨晓霞张永芳王永峰王蒙蒙李昕马良宏裴秀英王燕蓉
- 关键词:热应激睾丸增殖细胞
- siRNA干扰AMH基因对人卵巢颗粒肿瘤细胞COV434中SCF表达的影响被引量:1
- 2015年
- 目的研究siRNA干扰AMH基因对人卵巢颗粒肿瘤细胞COV434中SCF表达的影响。方法针对AMH设计合成的4条siRNA分别转染COV434细胞,RT-PCR法检测AMH mRNA表达的变化,筛选出其中沉默AMH基因最高效的siRNA;用RT-PCR法联合免疫荧光化学法(IHC)检测该siRNA干扰AMH基因对COV434细胞中SCFmRNA和蛋白表达的影响。结果 14条siRNA均使细胞中AMH的mRNA表达降低(P<0.05),以AMH-4-siRNA沉默效果最好。2AMH-4-siRNA转染组的SCFmRNA表达量(1.3472)明显高于空白组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);空白组和阴性对照组SCFmRNA差异无统计学意义(P>0.05)。3 AMH-4-siRNA组SCF蛋白相对表达量(0.342±0.052)较空白组(0.246±0.065)和阴性对照组(0.248±0.072)显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),空白组与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论构建siRNA可有效干扰COV434细胞AMH的表达,应用siRNA干扰AMH基因能够促进人卵巢颗粒肿瘤细胞COV434中SCF的表达。
- 芦瑞萍胡蓉严丽丽王飞苗马会明郑梦雪
- 关键词:抗苗勒氏管激素RNA干扰干细胞因子
- 小鼠卵巢玻璃化冻融过程中重组人卵泡刺激素干预对血管内皮生长因子(VEGF)及整合素αvβ3表达的影响被引量:9
- 2015年
- 目的:观察重组人卵泡刺激素(r FSH)对小鼠卵巢血管内皮生长因子(VEGF)以及整合素αvβ3表达的影响。方法:将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、300 IU/L r FSH干预玻璃化冻存组(r FSH-VG)。通过对冻融卵巢内各级卵泡计数、免疫组织化学观察VEGF和整合素αvβ3在卵巢不同细胞中的定位,Western blotting检测VEGF、整合素αv和整合素β3蛋白表达量。结果:各级卵泡计数、VEGF及整合素β3的蛋白表达均为r FSHVG组优于VCG组(P<0.05),整合素αv的表达组间均无统计学差异(P>0.05)。结论:玻璃化冻融过程中添加r FSH可以上调VEGF及整合素β3蛋白的表达。
- 张红马文叶杨延周裴秀英吴昊常青马会明马文智孙苗于佳蔡玉芳王红燕黑常春赵承军王燕蓉
- 关键词:玻璃化冻存整合素ΑVΒ3
- 癌旁脂肪组织来源脂肪间充质干细胞的特征分析被引量:2
- 2015年
- 目的比较临床样本中肿瘤周围与肿瘤远端的脂肪组织来源的间充质干细胞生物学特征差异。方法流式细胞术鉴定两种来源脂肪间充质干细胞表面标志;Realtime-PCR检测两种来源脂肪间充质干细胞相关基因的表达变化。结果癌周脂肪组织中AMSCs表达更高的干细胞相关基因Oct4,Nanog,Rex1;生长因子IGF,HGF;趋化因子SDF-1。结论肿瘤微环境影响下的脂肪间充质干细胞可能增强结肠肿瘤细胞的侵袭能力。
- 陈冬梅刘淑丹马会明
- 关键词:脂肪间充质干细胞结肠肿瘤生物学特性
- 附睾/睾丸穿刺取精装置
- 一种附睾/睾丸穿刺取精装置,属于医疗器械领域,该装置包括用于安装睾丸固定器、穿刺针固定器和四通接头固定器的固定支架,带切割内芯按压式旋转的穿刺针,可调式负压吸引器、可调式注射泵和可挤压的带刻度小容器,后四者通过四通接头和...
- 陈耀平徐仙景万红马会明
- 文献传递
- 抗苗勒氏管激素(AMH)对离体人卵巢黄素化颗粒细胞干细胞因子(SCF)表达负调控的研究被引量:1
- 2011年
- 目的:研究人卵巢黄素化颗粒细胞中抗苗勒氏管激素(AMH)对干细胞因子(SCF)表达的影响。方法:收集15例年龄<35岁因男方因素行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者的卵巢颗粒细胞,经原代培养,加入不同浓度基因重组人抗苗勒氏管激素(rhAMH),分别于培养的第4日与第6日采用实时定量PCR(RT-PCR)和免疫组织化学检测空白对照组与各实验组SCFmRNA及蛋白的表达。结果:RT-PCR和免疫组织化学均证实人卵巢黄素化颗粒细胞在不同浓度rhAMH干预后,SCFmRNA及蛋白的表达显著减少(P<0.05),其中15 ng/ml rhAMH抑制作用最明显;实验组第4日与第6日颗粒细胞表达SCFmRNA及蛋白无明显差异(P>0.05)。结论:AMH可有效抑制人卵巢黄素化颗粒细胞SCF mRNA及蛋白的表达。
- 胡蓉王飞苗罗艳马会明吴昕
- 关键词:颗粒细胞