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王金丹: 作品数：27 被引量：80H指数：6; 供职机构：温州医科大学更多>>; 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省科技厅公益性技术应用研究(分析测试)计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>

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Anti-HER2-ScFv-GFP融合蛋白靶向结合体外乳腺癌细胞表面受体的研究被引量：2: 2011年; 为了研究不同表达系统获得的携带绿色荧光抗HER2单链抗体(Anti-HER2-ScFv-GFP)是否既可靶向结合HER2阳性乳腺癌细胞表面,也可通过观察绿色荧光变化直接判断抗体结合乳腺癌细胞表面后细胞的动态变化,在前期成功构建两种表达系统的基础上,利用Ni^(2+)-NTA亲和层析法纯化来源于真核表达系统pFAST Bac to Bac HT A/Tn-5B1-4和原核表达系统pBAD His B/TOP10的融合蛋白Anti-HER2-ScFv-GFP,设置HER2阳性细胞SKBR3为实验组、HER2阴性细胞MCF7为对照组,分别与之混合24 h后,1×PBS洗脱细胞3次,激光共聚焦显微镜观察到两种不同表达系统获得的融合蛋白在HER2阳性细胞SKBR3表面分布均有绿色荧光,真核表达的蛋白结合效率明显高于原核表达的蛋白,SKBR3结合高浓度的融合蛋白后细胞表现出皱缩,绿色荧光明显增强,而两种不同来源的融合蛋白与HER2阴性MCF7混合后均易被洗脱。GFP标准品与SKBR3混合后也容易被洗脱。实验表明构建的携带绿色荧光抗HER2单链抗体同时具有靶向结合和报告作用两方面的功能。; 高国辉黄奇迪王金丹杨纪锋包兵兵胡孝渠

用于同时检测线粒体DNA A1555G和C1494T突变的试剂盒及其使用方法: 本发明提供一种用于同时检测与母系遗传药物性耳聋相关的线粒体DNAA1555G和C1494T突变的试剂盒及其使用方法。所述试剂盒包括提取样本基因组DNA的试剂、PCR扩增反应试剂、引物混合液、阳性对照模板、阴性对照模板。所...; 管敏鑫吕建新李智渊朱翌杨爱芬郑静唐霄雯王金丹; 文献传递

延伸因子2在肺动脉高压大鼠发病中的变化及葛根素的干预作用研究被引量：2: 2015年; 目的观察野百合碱葛根素联合用药后大鼠肺组织差异蛋白质组学的变化并探讨葛根素抑制肺动脉高压、肺血管重建的机制。方法随机将SD大鼠分为5组,正常组、溶剂组、2个时间模型组、实验组,每组10只。溶剂组,腹腔注射乙醇与0.9%氯化钠混合溶液(50 mg·kg-1体重)每晨1次,饲养3周。模型组,腹腔注射野百合碱(50 mg·kg-1体重)1次,分别饲养2,3周。实验组,注射野百合碱溶液后,每晨腹腔注射葛根素液(40 mg·kg-1体重)1次,饲养3周。制备模型并确定其制备成功,对各组肺组织的总蛋白质进行双向电泳,质谱鉴定差异蛋白质,并进行数据库检索与分析。结果葛根素可抑制野百合碱引起的肺动脉高压、肺血管重建与右心室肥大。延伸因子2在2周,3周野百合碱组中表达依次递增,与正常组有显著差异。在葛根素组呈下调趋势,与野百合碱组差别显著。结论延伸因子2可能与葛根素抑制肺动脉高压的机制相关。; 吴军王良兴龚玉强施孟如王金丹; 关键词：葛根素野百合碱肺动脉高压双向凝胶电泳

丁酸及其盐在制备治疗或预防胃溃疡药物中的应用: 本发明公开了一种丁酸及其盐在制备治疗或预防胃溃疡药物中的应用，属于医药领域。本发明通过如上应用指出，丁酸及其盐通过抗炎抗氧化，促进胃黏液分泌，上调抗凋亡蛋白BCL2，下调促凋亡蛋白BAX，对胃溃疡损伤具有积极的治疗及预防...; 王方岩刘佳明褚茂平姜勇王金丹付瑶阳陈筱筱; 文献传递

医学检验技术虚拟仿真平台的建设与探索被引量：17: 2019年; 虚拟仿真技术具有真实性、互动性、多样性等特点。医学检验技术虚拟仿真平台是将医学检验技术与虚拟仿真高效、有机地进行结合,为专业理论教学与实践教学带来便利。本项目基于学校现有的教学资源与附属医院的仪器设备设计出一个集检验科、大型仪器、实验项目、诊断流程为一体的医学检验虚拟仿真平台,为培养医学检验技术专门人才提供信息平台。; 何超翔王金丹楼哲丰谢克俭杨亭亭徐漫欢郑晓群; 关键词：检验科

温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9基因多态性分析被引量：7: 2014年; 目的:研究温州地区汉族人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性分布。方法:采用聚合酶链式反应和测序方法,对287例健康人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性进行分析。结果:温州地区汉族人群的CYP2C19*1、CYP2C19*2和CYP2C19*3三种等位基因的频率分别为65.16%、29.27%和5.57%;CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3、CYP2C19*2/*3、CYP2C19*2/*2和CYP2C19*3/*3基因型的频率分别为44.95%、33.45%、6.97%、4.18%、10.45%和0.00%,弱代谢率为14.63%;CYP2C9*1和CYP2C9*3等位基因频率分别为97.74%和2.26%,CYP2C9*1/*1和CYP2C9*1/*3的基因频率为95.47%和4.53%,未发现CYP2C9*3/*3。结论:温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9弱代谢率与已报道的汉族人群基本一致,与日本人群相近,显著高于欧美人群。; 周怀彬王金丹胡理怀温超玮吕建新; 关键词：P450 CYP2C19 CYP2C9 多态性汉族

应用微滴式数字PCR定量检测结直肠癌患者血浆循环游离DNA被引量：2: 2018年; 目的建立基于微滴式数字PCR(dd PCR)技术定量检测结直肠癌(CRC)患者血浆循环游离DNA(cfDNA)含量的方法,并初步探讨其临床应用。方法设计β-actin基因dd PCR特异性引物和探针,通过条件优化建立cfDNA定量检测方法;用不同浓度标准品验证所建方法的特异性、灵敏度、线性及重复性;并用该法检测39例CRC患者与40例健康人群血浆标本,比较CRC患者与对照组、术前与术后组血浆cfDNA浓度差异。结果所建方法无非特异性扩增,检测灵敏度为0.29 copies/μl,在模板浓度为10 pg/μl^10 ng/μl内线性良好(y=-2.34+33.17x,r^2=0.999),批内CV为9.85%,批间CV为11.04%;CRC患者血浆cfDNA结果 (7.20±5.15)copies/μl明显高于对照组(3.38±1.97)copies/μl(P<0.01);术后组血浆cfDNA浓度为(3.90±3.39)copies/μl,较术前组明显下降(P<0.01)。结论建立的dd PCR定量检测血浆cfDNA方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可为CRC患者的临床决策和病程监控提供一种无创手段。; 李绵绵蔡锚余坚刘平王金丹余玲玲; 关键词：结直肠癌 Β-ACTIN基因

用于同时检测线粒体DNA A1555G和C1494T突变的试剂盒及其使用方法: 本发明提供一种用于同时检测与母系遗传药物性耳聋相关的线粒体DNAA1555G和C1494T突变的试剂盒及其使用方法。所述试剂盒包括提取样本基因组DNA的试剂、PCR扩增反应试剂、引物混合液、阳性对照模板、阴性对照模板。所...; 管敏鑫吕建新李智渊朱翌杨爱芬郑静唐霄雯王金丹

外源性17β-雌二醇促进HER2阳性乳腺癌细胞的侵袭和增殖被引量：2: 2017年; 目的:研究外源性雌激素是否对乳腺癌中人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌细胞产生作用。方法:分别以乳腺癌细胞SKBR3和MCF-7为材料,选择17β-雌二醇(E2)为外源雌激素,配制10^(-5)、10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)、10^(-9)、10^(-10) mol/L的6种浓度培养环境,每种浓度培养时间设置24、48、72 h 3个梯度。检测HER2、ERα等标志物表达水平变化,分析E2对HER2阳性乳腺癌细胞增殖能力及侵袭性的影响。结果:在MCF-7中处理组HER2、ERα的转录水平都明显高于阴性对照组。在SKBR3细胞中仅HER2转录水平明显高于阴性对照组(P<0.05)。在蛋白水平SKBR3中HER2蛋白表达量增加(P<0.05);而在MCF-7中,ERα蛋白表达量随着时间的延长而增加,HER2几乎检测不到。在细胞增殖方面,MCF-7和SKBR3均随着E2浓度的上升细胞增殖率上升,差异有统计学意义(P<0.05)。而在侵袭性方面,MCF-7的侵袭性在72 h时较空白对照组增强(P<0.05),SKBR3侵袭性在24 h和48 h时较空白对照组增强(P<0.05),但是自身随浓度变化的规律不明显。结论:外源性雌激素对HER2阳性乳腺癌细胞的侵袭和增殖有促进作用。; 徐宝宝姜阳王金丹李昔琪何媛媛阮青青柳鹏程高国辉金龙金; 关键词：17Β-E2 肿瘤侵润

ABCG2基因rs2231142位点多态性与浙南地区人群原发性痛风的关系被引量：10: 2016年; 目的探讨三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2基因(ABCG2)rs2231142位点与浙南地区原发性痛风的相关性。方法收集浙南地区原发性痛风样本508例和正常健康体检样本558例,用微滴式数字化PCR技术进行基因分型,分析该位点多态性与痛风的相关性。结果痛风组尿酸、三酰甘油、胆固醇、尿素氮、肌酐以及收缩压水平显著高于正常组(P<0.05)。痛风组ABCG2基因rs2231142位点AA型和A等位基因频率显著高于正常组(P<0.05)。痛风组AA基因型/AC基因型尿酸、尿素氮和肌酐水平型显著高于痛风组CC基因(P<0.05)。结论 ABCG2基因rs2231142位点是浙南地区原发性痛风的易感基因位点,提示A等位基因提高了痛风患者的尿酸水平,携带AA基因型的个体更易患痛风。; 王金丹余玲玲黄德益施苏雪赵敏敏方丽丽李芳; 关键词：原发性痛风基因多态性易感性

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