周丽娜
- 作品数：9 被引量：19H指数：2
- 供职机构：广东医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金东莞市科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 改良法体外分离培养成年大鼠骨髓间充质干细胞实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的寻找一个稳定、快速、获取大量高纯度的成年骨髓间充质干细胞(BMSCs)的实验方法,为组织工程种子细胞来源提供实验依据。方法使用全骨髓贴壁法分离成年大鼠BMSCs,设立含10%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养组为对照组,含10%FBS、10ng/mL表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12培养组为实验组,倒置显微镜下观察比较两组原代、传代后BMSCs的形态及生长情况,使用流式细胞仪检测实验组P6、P10细胞表面标记。结果实验组原代细胞达融合的时间为5～6d,对照组为7～9d。传代后实验组细胞贴壁伸展的时间为2h,而对照组为6h。对照组p1细胞达融合时间为5～6d,实验组P1细胞达融合时间为4d,流式细胞仪检测实验组P6、P10BMSCs,发现P6细胞92%细胞表达CD29,3.5%细胞表达CD44,有14%的细胞表达CD45;而P10BMSCs抗原表达具有较高的均一性,CD29/CD44强阳性表达,仅有2%的细胞表达CD45。结论 10%FBS、10ng/mL表皮生长因子(EGF)的DMEM/F12全骨髓贴壁法培养BMSCs能够稳定、简便、快速获取大量高纯度成年大鼠BMSCs,满足组织工程对种子细胞的要求。
- 周丽娜谢华
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养成年
- 成年大鼠骨髓间充质干细胞复合组织工程人工神经修复1cm坐骨神经缺损被引量：2
- 2015年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)作为组织工程化人工神经的种子细胞移植治疗外周神经损伤的效果。方法从成年大鼠的骨髓中分离培养得到BMSC,复合去细胞神经支架构建"组织工程化人工神经"。移植后分为BMSC+去细胞SD大鼠神经导管组(BMSC治疗组)和空细胞SD大鼠神经导管组(阴性对照组),每组各5只。比较两组大鼠术后2、4、8周损伤侧坐骨神经功能指数(SFI),术后8周损伤侧坐骨神经传导功能和小腿三头肌湿重恢复率等修复效果的指标。结果BMSC治疗组的坐骨神经修复术后2、4、8周损伤侧坐骨神经功能指数,术后8周损伤侧坐骨神经传导功能和小腿三头肌湿重恢复率均优于阴性对照组(均为P<0.05)。结论 BMSC复合去细胞神经支架的组织工程化人工神经可有效促进神经再生和功能恢复。
- 周丽娜崔晓军苏开鑫王晓红蔡雪彦郭金华纳青青
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经再生
- 人体解剖学在线网络课程的教学设计被引量：4
- 2009年
- 网络教学是现代教学发展的一个必然趋势,在线网络课程不仅仅是给学生提供一些学习资源,而是要营造一个"学生为主体,教师为主导"的理想的教学环境,调动学生的主动性和积极性,培养学生的创新精神和实践能力。
- 周丽娜谢华
- 关键词：人体解剖学网络课程教学设计
- 成年大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离被引量：5
- 2009年
- 目的应用全骨髓贴壁法和密度梯度离心法以不同培养条件,探讨体外获得高质量、高活性的成年大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法。方法取成年雄性SD大鼠双侧股骨,应用全骨髓贴壁法,分为10%国产TBD胎牛血清+DMEM组、10%国产TBD胎牛血清+DMEM/F12组、12.5%国产TBD胎牛血清+DMEM/F12组、10%进口以色列胎牛血清+DMEM/F12组4组,3只/组;应用密度梯度离心培养法,以10%进口以色列胎牛血清+DMEM/F12作为培养基,取3只大鼠作为一组。比较不同培养方法及培养条件对BMSCs生长增殖的影响。结果全骨髓贴壁法中10%进口以色列胎牛血清+DMEM/F12组原代细胞即可7～9 d达融合,传代到第4代细胞活力仍很好。其余3组原代细胞达融合的时间均超过10 d,且传代后细胞活力差,容易出现老化。密度梯度离心培养法原代贴壁细胞太少,无法达融合。结论本实验采用的培养方法中,10%进口以色列胎牛血清+DMEM/F12培养基的全骨髓贴壁分离法,是体外获取成年大鼠BMSCs最佳方法。
- 周丽娜谢华
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养
- MCSCs-exosomes对成年大鼠心肌细胞缺氧损伤的干预作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨来源于骨髓源性心肌干细胞的外切体(MCSCs-exosomes)对成年大鼠心肌细胞体外缺氧损伤诱导凋亡的干预作用。方法将体外培养的成年大鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧组和MCSCs-exosomes预处理组。随后进行形态学观察、细胞计数,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白(Bcl-2,bax)的表达变化,流式细胞仪检测凋亡率的变化。结果与对照组相比,缺氧组细胞凋亡相关指标均明显升高,细胞计数下降(P<0.01),Bcl-2/bax表达下调(P<0.01),凋亡细胞比例明显增多。而MCSCsexosomes预处理组可明显改善缺血缺氧损伤时的细胞活力,上调Bcl-2/bax的表达,降低凋亡细胞的比例(P均<0.05)。结论 MCSCs-exosomes预处理可以明显改善体外培养缺氧损伤诱导的成年大鼠心肌细胞的凋亡情况,其机制可能是通过抗凋亡途径减轻缺氧时细胞的损伤。
- 崔晓军张剑凯张智周丽娜郭金华王晓红马颖蓝
- 关键词：骨髓源性心肌干细胞成年大鼠心肌细胞缺氧损伤
- 干细胞外切体对大鼠心肌缺血再灌注损伤及Akt/GSK-3β通路的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨骨髓源性心肌干细胞来源的外切体对大鼠心肌缺血再灌注损伤及Akt/GSK-3β通路的影响。方法64只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、外切体干预组(Ex组)、外切体干预联合PI3K抑制剂组(Ex+L组)。再灌注后2 h各组取8只大鼠,ELISA法测定血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,Western blot测定检测心肌组织Akt和P-GSK-3β水平;其余8只大鼠存活4周后用Masson染色检测心肌组织中胶原纤维。结果与I/R组相比,Ex组血清CK-MB、LDH水平降低,心肌胶原纤维减少,心肌Akt和P-GSK-3β水平增加(均P<0.01)。结论骨髓源性心肌干细胞来源的外切体可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,这种保护作用可能与Akt/GSK-3β信号通路激活有关。
- 崔晓军周丽娜张智郭金华张剑凯王晓红李林科
- 关键词：骨髓源性心肌干细胞缺血再灌注损伤
- 体外定向诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞向许旺细胞样细胞分化的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨体外定向诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向许旺细胞样细胞转化的有效方法。方法分别进行成年大鼠许旺细胞原代培养和BMSC分离培养。根据诱导方法不同,分为化学诱导组和共培养诱导组。采用显微镜观察许旺细胞和BMSC的生长情况,分别采用免疫荧光化学染色法[检测神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体和S-100抗体等许旺细胞标志蛋白]和流式细胞术鉴定两种细胞;显微镜下动态观察两组细胞的形态和生长情况;共培养诱导组共培养3 d后,化学诱导组诱导作用4 h、1 d后分别采用免疫荧光化学染色的方法评估两组细胞的诱导分化情况。结果化学诱导组诱导后的细胞发生了明显的许旺细胞样细胞形态改变,预诱导4 h后即出现GFAP抗体表达阳性,维持诱导1 d后,GFAP抗体阳性表达率为(80.9±3.5)%,S-100抗体阳性表达率为(59.0±1.1)%。诱导2 d后分化细胞开始出现脱落死亡,3 d后大部分分化细胞脱落死亡。共培养诱导组共培养3 d后,被诱导的BMSC未出现类似化学诱导组明显的细胞形态改变,GFAP抗体阳性表达率为(89.8±2.4)%,S-100抗体阳性表达率为(80.9±1.7)%。共培养诱导组S-100、GFAP抗体阳性表达率均高于化学诱导组,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论共培养诱导法不仅对BMSC向许旺细胞样细胞定向分化具有明确的效果,而且对BMSC的存活和增殖均有促进作用,因此该法相对于化学诱导法更加安全和有效。
- 周丽娜崔晓军苏开鑫王晓红蔡雪彦郭金华雷林忠
- 关键词：骨髓间充质干细胞许旺细胞共培养分化
- 成年大鼠许旺细胞复合去细胞神经支架修复坐骨神经缺损被引量：1
- 2015年
- 目的探讨成年许旺细胞(SC)复合去细胞神经支架构建的组织工程化人工神经移植治疗外周神经损伤的效果。方法从Wallerian变性1周的成年SD大鼠远侧端神经中分离培养得到SC,复合去细胞神经支架构建组织工程化人工神经。移植分为SC+去细胞SD大鼠神经支架组(SC治疗组)和空细胞SD大鼠神经支架组(阴性对照组),每组各5只。比较两组大鼠术后2、4、8周损伤侧坐骨神经功能指数(SFI),术后8周损伤侧坐骨神经传导功能和小腿三头肌湿重恢复率等修复效果的指标。结果 SC治疗组术后2、4、8周损伤侧SFI,术后8周损伤侧坐骨神经传导功能和小腿三头肌湿重恢复率均优于或高于阴性对照组(均为P<0.05)。结论采用成年SC复合去细胞神经支架的人工神经移植治疗外周神经缺损,可有效促进损伤神经的功能恢复。
- 周丽娜崔晓军苏开鑫王晓红蔡雪彦郭金华纳青青
- 关键词：许旺细胞神经再生
- 塑化小脑高仿模型的制作被引量：1
- 2015年
- 在解剖实验教具中,塑化标本因具备无毒、无味、干净、耐用特性而收到肯定及不同程度的使用[1-2],其制作技术也在不断发展[3-4],但制作原理始终为以各种塑化剂替换标本内水分,实质上相当于具有标本形态的塑料块,有鉴于此,作者在借鉴相关经验[5]基础上,尝试以小脑标本为原型,用调色硅胶为填料翻制外观与真实标本高度相似的模型,以期代替塑化小脑标本的部分使用功能。1材料和方法1.1小脑标本原型制备选取固定良好、外形端正完整、
- 蔡雪彦苏开鑫崔晓军周丽娜纳青青雷林忠郭金华王晓红
- 关键词：脑标本分离胶石膏模翻模
