尹江
- 作品数：7 被引量：23H指数：3
- 供职机构：广州医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-181b/c靶向调控SRGN抑制乳腺癌细胞侵袭转移被引量：4
- 2014年
- 目的 研究糖蛋白丝甘蛋白聚糖（SRGN）的表达与乳腺癌细胞侵袭转移的关系,及小分子RNA在SRGN表达调控中的作用.方法 应用实时定量PCR和Western blot检测SRGN在侵袭转移增强的乳腺癌MCF-7/5-Fu细胞与亲本转移能力弱的MCF-7细胞中的表达差异,利用siRNA干扰技术结合体外Transwell实验检测SRGN对乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响.运用生物信息学软件预测可靶向SRGN的miRNA,并对接乳腺癌细胞MCF-7 vs MCF-7/5-Fu的miRNA差异表达芯片数据,同时利用miRNA定量PCR确定候选miRNA的表达差异.通过转染miRNA模拟物结合western blot实验验证候选miR-NA对SRGN靶向调节作用,最后通过Transwell实验检测候选miRNA对肿瘤细胞侵袭转移的影响.结果 SRGN在侵袭转移增强的MCF-7/5-Fu细胞中表达明显增高,干扰SRGN可抑制肿瘤细胞的侵袭转移.此外,miR181b/c在MCF-7/5-Fu细胞中表达明显降低与SRGN表达呈负相关,并且miR181 b/c可靶向抑制SRGN表达,进而抑制肿瘤细胞的侵袭转移.结论 miR181 b/c可靶向抑制SRGN表达,抑制乳腺癌细胞的侵袭转移.
- 张志杰邓印根尹江卢敏莹贺智敏
- 关键词：微RNAS蛋白聚糖类肿瘤浸润
- miRNA-34c对人前列腺癌PC3细胞增殖和侵袭能力的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 探讨miR-34对人前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭的影响及可能的分子机制.方法 利用化学合成的miR-34c mimics转染人前列腺癌PC3细胞,通过MTT、Transwell迁移实验检测过表达miR-34c后细胞增殖及侵袭能力的变化;采用荧光定量PCR检测酪氨酸激酶受体c-met mRNA的表达;利用Western blot检测c-met、细胞周期相关蛋白cyclin D1、上皮间质转化（EMT）相关标志物的表达情况.结果 miR-34c过表达后PC3细胞的增殖和侵袭能力均明显降低.生物信息学分析发现在酪氨酸激酶受体c-met 3 ＆#39;-UTR上有2个潜在的miR-34c结合位点,且过表达miR-34c明显抑制c-met mRNA和蛋白的表达.Western blot结果显示,过表达miR-34c的PC3细胞E-cadherin表达上调,N-Cadherin、cyclin D1表达下调.结论 miR-34c可能通过抑制c-met、cyclin D1、N-Cadherin的表达,上调E-cadherin的表达,对前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭起到抑制作用.
- 刘浩尹江贺智敏
- 关键词：微RNAS肿瘤浸润聚合酶链反应
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂对Her2阳性乳腺癌细胞侵袭转移的抑制作用和机制被引量：2
- 2017年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275和线性肟酸（SAHA）对HER2阳性乳腺癌细胞系BT474和SKBR3侵袭转移能力的影响和可能的作用机制。方法采用4μmol／LMS-275、50μmol／LSAHA分别处理BT474及SKBR3细胞，对照组加入适当体积的PBS，四唑氮化合物（MTS）法检测细胞存活率，流式计数检测细胞凋亡率，Transwell实验检测细胞侵袭转移能力，Western blotting检测相关蛋白表达水平。结果SAHA、MS-275处理的BT474细胞存活率分别为（39±11）％、（54±8）％，SKBR3细胞存活率分别为（62±6）％、（71±9）％；SAHA、MS-275处理BT474细胞的凋亡比例分别为对照组的（8．46±0．29）倍和（4．15±0．71）倍，SKBR3细胞的凋亡比例分别为对照组的（5．51±1．24）倍和（4．04±0．69）倍；BT474细胞对照组、SAHA处理组、MS-275处理组迁移至下室细胞数分别为184．7±18．8、104．3±7．1、131．3±9．1，SKBR3细胞对照组、SAHA处理组、MS-275处理组迁移至下室的细胞数分别为60．0±16．7、14．3±6．5、34．3±8．7；Western结果显示SAHA、MS-275能够抑制BT474、SKBR3细胞中Vimentin、Her2、β-eatenin、HDAC1的表达，上调H3的乙酰化水平及E-eaherin的蛋白表达水平。结论SAHA和MS-275抑制HER2阳性乳腺癌细胞系BT474和SKBR3侵袭转移作用，可能与其抑制Vimentin、Her2、β—catenin，上调E—eaherin表达有关。
- 尹江刘浩郑国沛谷依学贺智敏
- 关键词：肿瘤侵润肿瘤转移
- 肝细胞生长因子诱导人肝癌细胞上皮间质转化被引量：6
- 2015年
- 上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肿瘤侵袭转移密切相关.虽然肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)已被证实为肿瘤EMT的主要诱导剂,但是HGF诱导肿瘤EMT发生的分子机制尚不完全清楚.本研究旨在探讨Snail在HGF诱导肝癌细胞上皮间质转化中的作用.用HGF处理肝癌Hep G2和Hep3B细胞,显微镜观察细胞形态变化,划痕试验及Transwell试验检测细胞迁移能力,Western印迹检测Met,AKT的磷酸化及蛋白质表达的变化,Western印迹与real-time RT-PCR检测上皮细胞表面标志E-Cadherin和间质细胞表面标志NCadherin、Fibronectin的表达变化,以及EMT相关转录因子的表达变化.经HGF处理的Hep G2、Hep3B细胞,Met和AKT的磷酸化水平显著增强;相差倒置显微镜下观察细胞形态向间质型细胞形态转化;细胞划痕和Transwell试验检测细胞的迁移能力较对照组显著增强;Real-time RT-PCR和Western印迹实验显示HGF的诱导能上调间质标记蛋白的表达及下调上皮型标志蛋白的表达.进一步发现,HGF能上调转录因子Snail的表达,干扰Snail能逆转HGF对Hep G2和Hep 3B细胞EMT发生的诱导作用.由此可见,HGF可能通过诱导Snail的表达促进肝癌细胞EMT的发生.这为阐明肝癌细胞侵袭转移机制,以及肝癌的防治提供新线索.
- 宋莹刘浩尹江张志杰贺智敏
- 关键词：肝癌肝细胞生长因子SNAIL
- 低浓度二甲双胍诱导肝癌细胞衰老及其机制探讨被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨二甲双胍（Met）对肝癌细胞衰老的影响及其机制.方法 不同浓度（0、0.01、0.1、1、10和50 mmol/L） Met处理肝癌细胞HepG2细胞后,采用MTS法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡改变;通过衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-ga1）染色和衰老标记分子Dec1蛋白表达分析Met对细胞衰老的影响;蛋白质印迹法分析p-AMPK、p-ACC和AMPK蛋白的表达.结果 Met可以抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;高浓度（10和50 mmol/L）Met促进肝癌细胞凋亡;低浓度（0.01、0.1和1 mmol/L） Met作用后,肝癌细胞呈现典型的大而扁平的衰老形态,SA-β-ga1染色阳性细胞显著增多,细胞周期停滞于G0/G1期,衰老标记分子Dec1蛋白表达明显上调.此外,低浓度Met可以促进p-AMPK和p-ACC蛋白表达,而对AMPK蛋白表达无明显影响.结论 高浓度Met促进肝癌细胞凋亡;低浓度Met则诱导肝癌细胞衰老,其作用机制可能与激活AMPK信号通路有关.该研究为以后利用诱导肝癌细胞衰老这种方式提高肝癌综合治疗水平,提供了重要实验依据.
- 刘季芳邓敏尹江贺智敏
- 关键词：二甲双胍肝肿瘤细胞衰老细胞凋亡
- 内质网应激对乳腺癌细胞5-FU化疗敏感性影响的观察被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)状态对乳腺癌细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响。方法:MTS试验比较乳腺癌MCF-7细胞及其衍生的5-FU耐受细胞(MCF-7/5-FU)对5-FU的敏感性,电子显微镜观察MCF-7及MCF-7/5-FU细胞中的内质网含量情况,Real-time RT-PCR法检测MCF-7及MCF-7/5-FU细胞中基础水平的内质网应激标志的表达情况,5-FU刺激MCF-7和MCF-7/5-FU细胞后,Real-time RT-PCR法检测内质网应激标志的表达变化以反映内质网的应激状态。结果:耐药细胞MCF-7/5-FU对5-FU的耐药指数为16。相比于亲本细胞MCF-7细胞,MCF-7/5-FU细胞中的内质网含量明显更为丰富。GRP94和CHOP在MCF-7/5-FU中的表达量分别是MCF-7中表达量的2.1(t=9.288,P=0.003)和1.8倍(t=6.057,P=0.008)。比较最高剂量5-FU诱导和未加5-FU时CHOP和GRP94的表达量。在MCF-7细胞中,分别上调12.23(t=15.082,P=0.001)和2.54倍(t=6.196,P=0.038);在MCF-7/5-FU细胞中,分别上调5.45(t=15.451,P=0.003)和2.38倍(t=7.218,P=0.007)。比较在5-FU刺激下72和0h时CHOP以及GRP94的表达量。在MCF-7细胞中,分别上调12.04(t=15.093,P=0.001)和3.15(t=4.540,P=0.032)倍;在MCF-7/5-FU细胞中,分别上调4.20(t=4.363,P=0.005)和1.88倍(t=2.875,P=0.041)。说明5-FU能以剂量依赖性和时间依赖性上调CHOP和GRP94的表达,且在MCF-7细胞中诱导上调更为明显。结论:内质网应激参与乳腺癌细胞对5-FU化疗的敏感性,轻度的应激参与化疗耐受,而较强的应激则有利于化疗效果。
- 贾小婷尹江郑国沛刘季芳罗凯贺智敏
- 关键词：内质网应激5-氟尿嘧啶药物耐受
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SNDX-275对乳腺癌BT474细胞增殖抑制作用被引量：4
- 2015年
- 目的明确组蛋白去乙酰化酶抑制剂SNDX-275对ErbB2阳性乳腺癌BT474细胞的增殖抑制作用及其机制。方法以磷酸盐缓冲液（PBS）处理的BT474细胞作为对照组、SNDX-275处理的BT474细胞作为实验组，使用终浓度为0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 μmol/L的SNDX-275处理细胞，利用MTS实验、克隆形成实验检测细胞增殖能力。采用Western blotting实验检测ErbB2、ErbB3、p-Akt的蛋白表达，实时荧光定量PCR检测miR-125a、miR-125b的表达。MTS实验检测SNDX-275对转染miR-125抑制剂的乳腺癌BT474细胞的增殖抑制作用。结果MTS实验检测结果发现SNDX-275能明显抑制细胞的增殖且具有浓度依赖性，4.0 μmol/L的SNDX-275对细胞的抑制率约（68.00±4.45）%。平板克隆实验结果表明，SNDX-275能明显抑制乳腺癌BT474细胞克隆的形成。Western blotting结果显示SNDX-275明显抑制ErbB2、ErbB3、p-AkT的表达。实时荧光定量PCR分析发现，与PBS处理的BT474细胞对比，2 μmol/LSNDX-275 BT474细胞分别上调miR-125a、miR-125b约3.22±1.17倍、5.42±0.38倍，差异均具有统计学意义（t=4.338,P=0.049；t=21.805,P=0.002）。MTS实验结果显示，与PBS对照组相比，SNDX-275组和转染miR-125抑制剂组对乳腺癌细胞BT474的抑制率分别为（56.97±3.56）%、（10.67±2.21）%，两组之间差异具有统计学意义（t=-10.993，P=0.008）。结论SNDX-275通过上调miR-125a、miR-125b抑制ErbB2-ErbB3-Akt信号通路，进而抑制ErbB2阳性乳腺癌BT474细胞的增殖。
- 尹江刘浩邓敏贺智敏
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖微RNAS
