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七氟烷和异氟烷对神经干细胞增殖和迁移的影响: 目的:观察两种吸入麻醉药七氟烷和异氟烷暴露于胎鼠神经干细胞后，是否对神经干细胞的增殖和迁移产生影响。同时，观察这两种药物对神经干细胞发育调控基因(stat3，sox2，notch1和p21)和蛋白表达的影响。　　方法:神...; 刘劲; 关键词：七氟烷异氟烷吸入麻醉神经干细胞发育细胞增殖基因调控; 文献传递

邻苯二甲酸单乙基己基酯对神经干细胞增殖和迁移的作用被引量：3: 2016年; 目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对原代神经干细胞(NSC)和NE-4C小鼠细胞增殖和迁移的影响。方法原代NSC来源于孕15 d(E15)远交群SD胎大鼠脑皮质;NE-4C细胞为小鼠NSC。MEHP 0,1,10,100和1000μmol·L^(-1)处理72 h后,CCK-8法检测细胞活力;5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞迁移;Western蛋白印迹法检测糖皮质激素受体(GR)、Y性别决定区框2(Sox2)、信号传导与转录激活因子3(Stat3)等基因及蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示,与正常对照组相比,MEHP1000μmol·L^(-1)作用72 h后,NE-4C和NSC细胞活力明显减弱,分别为正常对照组的70.3%和40.0%。Ed U结果显示,与正常对照组相比,MEHP 100μmol·L^(-1)组细胞增殖率降低,分别为正常对照组的74.8%和12.0%(P<0.05)。Transwell实验发现,MEHP 100μmol·L^(-1)处理72 h后,NE-4C细胞的迁移率降低至(63.4±2.0)%(P<0.05)。MEHP 100μmol·L^(-1)组NE-4C中与增殖和迁移相关的基因GR,Stat3和Sox2的表达下调,分别为正常对照组的49.8%,26.0%和14.0%(P<0.05);在NSC中的相应基因也下调,分别为正常对照组的10.0%,14.0%和15.3%;在NE-4C中与增殖及迁移相关的蛋白GR,GRβ,p-Stat3和Sox2的表达下调,相对表达量分别为0.92±0.17,0.87±0.35,0.62±0.24和0.81±0.22(P<0.05);在NSC中相应蛋白表达也下调,相对表达量分别为0.82±0.20,0.56±0.12,0.53±0.20和0.84±0.36(P<0.05)。结论大剂量MEHP可抑制NSC的增殖和迁移能力,其机制可能是通过GR介导的Stat3及Sox2的作用实现。; 黄意湘马晓晓郝欣蕊刘劲廖双菊梅虹霞苏颖郑丽丹林函; 关键词：神经干细胞细胞增殖细胞迁移糖皮质激素受体

姜黄素通过抑制糖皮质激素受体促进大鼠神经干细胞增殖被引量：1: 2015年; 目的探讨姜黄素对大鼠神经干细胞增殖的影响及其可能机制。方法取孕15 d(E15)远交群(SD)大鼠的胎脑皮质,分离培养原代神经干细胞,进行神经干细胞标志蛋白神经上皮干细胞蛋白巢蛋白(nestin)和胚胎干细胞关键蛋白(SOX2)染色鉴定。姜黄素0,0.1,0.5,2.5,12.5和62.5μmol·L-1处理大鼠神经干细胞24 h后,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞毒性;MTT法检测细胞存活;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)增殖试剂盒检测神经干细胞增殖;荧光定量聚合酶链反应法(q RT-PCR)检测神经干细胞糖皮质激素受体(GR)、信号转导与激活因子3(Stat3)、Notch1和p21 m RNA表达;Western蛋白印迹法检测神经干细胞GR,Stat3和磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白表达。结果原代细胞经巢蛋白和SOX2蛋白染色鉴定为神经干细胞。LDH释放法检测结果显示,姜黄素12.5和62.5μmol·L-1对神经干细胞具有细胞毒性作用(P<0.05)。MTT结果显示,姜黄素0.5和2.5μmol·L-1增强神经干细胞活力,姜黄素62.5μmol·L-1降低神经干细胞活力(P<0.05)。Brd U结果显示,姜黄素0.1,0.5和2.5μmol·L-1促进神经干细胞增殖(P<0.05),姜黄素12.5和62.5μmol·L-1抑制神经干细胞增殖(P<0.05)。q RT-PCR结果显示,姜黄素0.5μmol·L-1组GR m RNA表达明显降低(P<0.05)。Western蛋白印迹法结果表明,姜黄素0.5μmol·L-1组GR,Stat3和p-Stat3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论姜黄素促进神经干细胞增殖,可能与其抑制GR m RNA转录及相关蛋白表达有关。; 马晓晓王春满张高龙左春龙黄意湘刘劲连庆泉林函; 关键词：姜黄素神经干细胞细胞增殖受体糖皮质激素

海马神经元腺苷A1受体在异氟醚麻醉诱发老龄小鼠认知功能障碍中的作用被引量：1: 2015年; 目的评价海马神经元腺苷A1受体在异氟醚麻醉诱发老龄小鼠认知功能障碍中的作用.方法腺苷A1受体基因敲除纯合子小鼠（基因敲除小鼠）和野生型小鼠各16只,雄性,18～ 22月龄,体重27～ 32 g,采用随机数字表法,将两种小鼠各分为2组（n=8）：对照组（C组）和异氟醚麻醉组（Ⅰ组）.Ⅰ组吸入1.4％异氟醚2h,载气为纯氧,C组仅吸入纯氧.麻醉后24 h进行Morris水迷宫实验,随后处死小鼠,采用免疫组化法测定海马组织β淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）斑块数量,采用Western blot法检测磷酸化tau（p-tau）蛋白和含2B亚基的NMDA受体（NR2B）的表达水平.结果与野生型小鼠的C组比较,野生型小鼠的Ⅰ组逃避潜伏期延长,海马组织Aβ1-42斑块数量增加,p-tau蛋白表达上调,NR2B表达下调（P＜0.05）;与野生型小鼠的Ⅰ组比较,基因敲除小鼠的Ⅰ组逃避潜伏期缩短,海马组织Aβ1-42斑块数量减少,p-tau蛋白表达下调,NR2B表达上调（P＜0.05）;基因敲除小鼠的Ⅰ组和C组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论海马神经元腺苷A1受体介导异氟醚麻醉诱发老龄小鼠认知功能障碍,其机制与促进Aβ沉积、tau蛋白磷酸化及抑制NR2B活性有关.; 林函王春满左春龙马晓晓黄意湘刘劲连庆泉; 关键词：受体腺苷A1 海马神经元异氟醚

七氟醚和异氟醚对大鼠大脑皮质神经干细胞增殖的影响被引量：2: 2013年; 目的评价七氟醚和异氟醚对大鼠大脑皮质神经干细胞增殖的影响。方法取孕15d的SD大鼠，分离皮层进行神经干细胞原代培养，以（1～2）×10^6个／ml的细胞密度稳定传代到第3代后，接种至多聚赖氨酸包被的6孔培养板中。采用随机数字表法，将其分为3组（n=24）：对照组（C组）、七氟醚组（S组）和异氟醚组（I组）。将培养板细胞置于暴露箱，s组通入4．9％七氟醚和5％CO2-95％O2的混合气体；I组通入2．8％异氟醚和5％CO2．95％O2的混合气体；C组通人5％CO2．95％02的混合气体。暴露6h后，取出培养板并于37℃细胞培养箱中继续培养2h。采用免疫细胞化学法和酶标法测定细胞增殖情况，采用实时荧光定量PCR法检测增殖相关基因：信号转导和转录激活子3（STAT3）、Sox2、Notchl和P21的mRNA表达水平。采用Westernblot法测定总STAT3蛋白和磷酸化STAT3（p-STAT3）蛋白的表达水平。结果与c组比较，s组和I组神经干细胞增殖率降低，p-STAT3蛋白表达下调，I组STAT3mRNA表达下调（P〈0．05），s组STAT3mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）。3组间Sox2mRNA、NotchlmRNA、P21mRNA及总STAT3蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论异氟醚和七氟醚均可抑制大鼠大脑皮质神经干细胞的增殖，其机制可能为七氟醚与抑制STAT3蛋白激活有关，而异氟醚不仅抑制了STAT3蛋白的激活，而且抑制了STAT3基因的转录。; 林函刘劲李纯王佩芳高雅静马晓晓王春满梅虹霞连庆泉; 关键词：异氟醚干细胞细胞增殖七氟醚

腺苷A1受体在异氟烷暴露导致老龄小鼠认知障碍中的作用: 目的研究异氟烷吸入暴露是否能够引起老龄小鼠认知功能障碍,及腺苷A1受体是否参与该过程。方法取体重在27-32g月龄18-22个月的腺苷A1受体全身敲除纯合子小鼠(A1R-/-)以及同窝野生型小鼠(A1R+/+),采用统计...; 王春满左春龙马晓晓黄意湘刘劲连庆泉林函; 关键词：ISOFLURANE POCD; 文献传递

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刘劲

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