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特异性miRNA-200b抑制剂对肝星状细胞生物学特性的影响被引量：2: 2015年; 目的观察特异性miRNA-200b抑制剂对肝星状细胞增殖、活化、胶原合成的影响.方法设计并合成miR-200b抑制剂,利用脂质体将miRNA-200b抑制剂转入肝星状细胞中,培养48 h后,收集肝星状细胞和上清液,采用qRT-PCR探针的方法检测miR-200b的表达水平、Westernblotting检测细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达、噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性和放射免疫法检测培养上清液中Ⅲ型前胶原和透明质酸含量.结果与阴性对照组相比,miRNA-200b抑制剂转染48 h后HSC-T6细胞miR-200b组表达下调82％;α-SMA蛋白表达降低（19±3）％（P＜0.05）;细胞增殖活性降低（33±5）％（P＜0.01）;培养上清中Ⅲ型前胶原和透明质酸含量分别降低（35±4）％和（31±2）％（均P ＜0.01）.结论 miRNA-200b抑制剂下调HSC-T6细胞中miR-200b表达,抑制肝星状细胞增殖与活化,减少细胞外基质的合成和分泌.; 付荣泉丁继光洪亮胡丹平吴金国

microRNA－21反义寡核苷酸对肝星状细胞胶原合成的影响被引量：1: 2015年; 目的：探讨microRNA－21（ miR－21）反义寡核苷酸对肝星状细胞胶原合成的影响。方法肝星状细胞分离和培养，利用脂质体2000将miR－21反义寡核苷酸转染活化的肝星状细胞中，转染48 h后，收集肝星状细胞，采用实时RT－PCR法和Western blotting分别检测细胞miR－21表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达；MTT法检测转染后细胞增殖活性。结果与无关反义寡核苷酸组相比，miR－21反义寡核苷酸转染后miR－21表达较无关对照组下调约76％（ P ＜0．01）；细胞增殖活性降低（26±3）％（ P ＜0．01）；Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分别降低（61±7）％和（48±6）％（均P ＜0．01）。结论 miR－21反义寡核苷酸能显著下调miR－21的表达，抑制肝星状细胞增殖及胶原的合成。; 付荣泉丁继光洪亮孙庆丰吴金国

慢性丙型肝炎患者CD4^+CD25^+Treg细胞对树突状细胞的作用: 2015年; 目的探讨慢性丙型肝炎(HCV)患者CD4+CD25+Treg细胞对外周血树突状细胞的作用。方法对35例HCV患者和35例健康对照各抽取外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),采用特异性免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg细胞,并体外诱导培养获得树突状细胞(DCs);将CD4+CD25+Treg细胞与DC共培养5d后,采用流式细胞仪检测DC表面标志CD83、CD80、HLADR的表达,同时酶联免疫吸附法检测上清液中IL-10和TGF-β含量。结果与健康对照组相比,HCV患者CD83、CD80和HLA-DR的表达均显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);HCV组患者CD4+CD25+Treg分泌IL-10和TGF-β的水平均高于健康组(P<0.01)。结论 HCV患者外周血Treg细胞能够抑制DC的成熟,细胞因子参与了免疫应答的调节。; 洪亮付荣泉丁继光孙庆丰吴金国; 关键词：慢性丙型肝炎调节性T淋巴细胞树突状细胞

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吴金国