熊石龙
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广州市属高校科技计划项目广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠GSK-3β慢病毒表达载体的构建及其在骨髓树突状细胞DC2.4中的表达被引量：1
- 2015年
- 【目的】构建pLVX-IRES-TDtomat-GSK-3β慢病毒表达载体，感染小鼠骨髓DC2．4细胞，建立过表达GSK-3β的小鼠DC2．4细胞系。【方法】利用RT-PCR方法扩增小鼠GSK-3β基因的编码区，并将其重组于表达载体pLVX-IRES-TDtomat中，经酶切、测序鉴定后包装成慢病毒，感染小鼠DC2．4细胞。实验分3组，分别为DC2．4细胞对照组，空病毒感染组，GSK313慢病毒感染组，用实时荧光定量PCR方法和Western Blotting方法检测各组GSK-313的表达水平。【结果】经酶切和测序鉴定结果证实pLVX-IRES-TDtomat-GSK-3β构建成功，并在包装细胞中高水平表达，慢病毒滴度高达1．26×108Tu／mL。GSK-3β慢病毒感染组的GSK-3β在mRNA表达水平和蛋白表达水平上均高于DC2．4细胞对照组及空病毒感染组。【结论】成功构建了表达GSK313基因的重组慢病毒载体，并可在DC2．4细胞中稳定表达，为后续DC2．4的免疫功能研究奠定了基础。
- 包杰熊石龙
- 关键词：蛋白激酶类
- TIPE2基因过表达慢病毒载体的构建及转染人脐静脉血管内皮细胞被引量：2
- 2017年
- 目的构建肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2（TIPE2）基因过表达慢病毒载体，包装慢病毒并体外感染人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）。方法设计TIPE2基因扩增引物，PCR扩增获得人源TIPE2目的基因片段并进行纯化，构建重组质粒GV287-TIPE2经琼脂糖凝胶电泳鉴定并进行测序鉴定。重组质粒GV287-TIPE2转染293T细胞构建GV287-TIPE2慢病毒载体，收获并浓缩病毒颗粒，实时定量PCR法检测病毒滴度。GV287-TIPE2过表达慢病毒体外转染HUVEC，荧光显微镜下鉴定转染效率，免疫印迹法检测转染细胞的TIPE2蛋白表达。结果PCR及测序鉴定证实重组质粒GV287-TIPE2中TIPE2基因目的片断插入位置和序列正确。包装的GV287-TIPE2慢病毒载体其病毒滴度为2．0×10^8TU／ml。GV287-TIPE2过表达慢病毒转染293T细胞后在荧光显微镜下可见绿色强荧光；收获病毒转染HUVEC后，在荧光显微镜下可见绿色荧光，且荧光强度不随培养时间延长而衰退。免疫印迹显示，GV287-TIPE2过表达慢病毒转染HUVEC后其TIPE2蛋白表达明显升高（P〈0．001）。结论成功构建GV287-TIPE2慢病毒载体，包装得到高浓度病毒液，转染HUVEC能稳定过表达TIPE2蛋白。
- 熊石龙万利龚芳范灿波毛欣茹
- 关键词：慢病毒人脐静脉血管内皮细胞
- 急性胰腺炎患者血清瘦素、血清淀粉样蛋白A及降钙素原的动态变化及临床意义被引量：11
- 2019年
- 目的观察急性胰腺炎患者瘦素(leptin)、血清淀粉样蛋白A(SAA)以及降钙素原(PCT)的动态改变,探讨其在急性胰腺炎早期病程中的临床实用价值.方法选取2012年3月至2012年12月本院收治的急性胰腺炎患者42例,其中轻型急性胰腺炎(MAP)患者32例,重症胰腺炎(SAP)患者10例,酶联免疫吸附法动态检测人院后第1、3、5、7天血清leptin、SAA及PCT的水平,与42例健康对照组比较,分析各指标在各组间的差异,并应用受试者工作特征(ROC)曲线评价各指标对急性胰腺炎的诊断价值.结果急性胰腺炎患者各个不同时间点leptin、SAA及PCT均显著高于对照组(P<0.01),且SAP组明显高于MAP组(P<0.01).入院首日leptin、SAA、PCT的最佳截断值分别为25.45μg/L、594.35 mg/L、3.585μg/L,以最佳截断值为准,3种指标的敏感度、特异性、阳性预测值和阴性预测值均在70.00%以上.结论血清leptin、SAA及PCT水平的变化反应了急性胰腺炎患者病情严重程度,对急性胰腺炎早期病程判断具有一定的临床意义.
- 熊石龙王治伟迟琼胡远明
- 关键词：瘦素血清淀粉样蛋白A降钙素原急性胰腺炎
- 2型糖尿病血管病变患者TIPE2与TF的检测及临床意义被引量：3
- 2019年
- 目的观察2型糖尿病(T2DM)血管病变患者外周血单个核细胞(PBMCs)内肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)、组织因子(TF)的表达与血浆肿瘤坏死因子(TNF)-α和TF水平的变化,并探讨其与T2DM血管病变的相关性。方法收集广州医科大学附属第二医院番禺院区2015年5月-2016年5月收治并确诊为T2DM患者78例,根据是否合并有血管病变分为血管病变(T2DM+V)组36例和非血管病变(T2DM)组42例,另择40例同期行健康体检者为对照(CON)组。收集患者年龄、性别等一般资料,采用高效液相色谱法测定糖化血红蛋白(HbA1c);全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等生化指标;实时荧光定量PCR检测PBMCs中TIPE2、TF mRNA的表达水平;ELISA法测定血浆TF和TNF-α浓度。比较3组间各指标的差异并分析TIPE2 mRNA与TF mRNA、TF及TNF-α的相关性。结果 3组间性别、年龄、血脂方面差异无统计学意义(P>0.05);CON组、T2DM组和T2DM+V组HbA1c依次升高,PBMCs中TIPE2 mRNA表达依次下降,TF mRNA表达则依次升高(P<0.05);血浆TF、TNF-α水平依次增高(均P<0.05);T2DM+V组内TIPE2 mRNA与TF mRNA及TNF-α均呈负相关(r分别为-0.340和-0.342,P<0.05)。结论 T2DM血管病变的发生发展与TIPE2的下降及TF的升高有关。
- 熊石龙吴一行龚芳何伟
- 关键词：糖尿病血管病变肿瘤坏死因子Α炎症
- D-二聚体在胰肾联合移植术后移植胰血栓形成的预测价值被引量：7
- 2022年
- 目的探讨D-二聚体在胰肾联合移植术后移植胰血栓形成的预测价值。方法选取2020年9月至2021年8月我院器官移植中心行胰肾联合移植术患者共54例,比较有移植胰血栓和无移植胰血栓患者术前1 d与术后1、3、7 d的D-二聚体水平变化情况;比较移植胰有血栓时和无血栓时的D-二聚体水平;绘制ROC曲线分析移植胰血栓形成时D-二聚体水平对胰肾联合移植术后移植胰血栓的诊断效能。结果胰肾联合移植术后患者中,有移植胰血栓组和无移植胰血栓组的术前1 d的D-二聚体水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05),术前1 d分别与术后1、3、7 d的D-二聚体水平组内比较差异均有统计学意义(P<0.05),术前1 d、术后1、3、7 d的D-二聚体水平组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。移植胰血栓形成时的D-二聚体水平与无血栓形成的术后D-二聚体水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。根据ROC曲线,D-二聚体预测移植胰动静脉血栓的最佳临界值为3.305 mg/L,AUC为0.828,灵敏度为88.9%,特异度为77.8%,约登指数为66.7%。结论胰肾联合移植术后D-二聚体水平较术前显著升高,发生移植胰血栓时血浆D-二聚体水平升高幅度更大,可将D-二聚体3.305 mg/L作为筛查胰肾联合移植术后移植胰血栓的“风险值”。
- 林岚刘路浩张磊熊石龙
- 关键词：D-二聚体胰肾联合移植血栓形成
