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少根根霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达被引量：12: 2004年; 根据真菌Δ6 脂肪酸脱氢酶保守的氨基酸序列设计简并引物进行RT PCR ,获得一个 5 93bp的cDNA片段 ,再根据获得的部分序列设计基因特异性引物 ,通过cDNA末端扩增技术 (RACE)获得该cDNA的 3′和 5′序列 ,从而得到全长为 14 82bp的cDNA序列。序列分析结果表明 ,该序列具有一个长度为 1377bp、编码 4 5 8个氨基酸的开放阅读框 ,所编码蛋白质的大小为 5 2kD。与报道的Δ6 脂肪酸脱氢酶一样 ,推测的氨基酸序列具有膜整合脂肪酸脱氢酶特异性的 3个组氨酸保守区和疏水结构 ,在其氨基酸序列的N 末端具有类似于细胞色素b5的血红素结合区。该序列为一个新的编码Δ6 脂肪酸脱氢酶的基因 ,为了验证其功能 ,把开放阅读框序列RAD6亚克隆到表达载体 pYES2 0 ,构建重组表达载体pYRAD6 ,并转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达。通过气相色谱(GC)和气相色谱 /质谱 (GC MS)分析表明 ,该序列在酿酒酵母中获得表达。所编码的酶具有Δ6 脂肪酸脱氢酶活性 ,能将外源性的底物亚油酸转化为γ 亚麻酸 ,γ 亚麻酸的含量占酵母总脂肪酸的 3 85 %。; 张琦李明春孙颖马海庭任勇邢来君; 关键词：少根根霉 △^6-脂肪酸脱氢酶 Γ-亚麻酸酿酒酵母

Δ~6-脂肪酸脱氢酶对n-6和n-3途径中脂肪酸底物的偏好被引量：5: 2004年; 添加α 亚麻酸作为底物 ,经半乳糖诱导 ,在含有少根根霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的酿酒酵母总脂肪酸中检测到十八碳四烯酸的生成 ;同时添加亚油酸和α 亚麻酸时 ,检测到γ 亚麻酸和十八碳四烯酸生成 ,而且十八碳四烯酸的含量是γ 亚麻酸含量的 3 81倍 ,表明在酿酒酵母中少根根霉Δ6 脂肪酸脱氢酶不仅能催化α 亚麻酸生成十八碳四烯酸 ,而且偏好n 3途径中的底物α 亚麻酸。同样 ,在改变少根根霉Δ6 脂肪酸脱氢酶基因的转译起始密码子周边序列后所构建的转基因酵母中 ,也得到类似的结果。; 张琦李明春孙颖任勇孙红妍马海庭邢来君; 关键词：少根根霉酿酒酵母 Γ-亚麻酸偏好

黑龙江东部网区域稳定控制系统的研究与开发被引量：15: 1997年; 介绍黑龙江省东部电网区域稳定控制系统的主要技术。该系统由５个分站组成，在故障情况下采取切机措施以提高黑龙江省东部电网的稳定水平，利用微波通信实现实时数据通信和控制命令的传送，使用可灵活配置的监控软件完成各子站的监测任务并实现各子站的控制策略，并基于全球卫星定位系统（ＧＰＳ）提供的高精度时钟实现了对不同地点电压相量的同步测量。; 闵勇丁仁杰任勇任勇崔文进韩英铎何洋崔文进牟洪涛韩英铎贾伟; 关键词：电力系统区域稳定控制稳定控制

甘油氧化酶生产菌株的选育及甘油氧化酶酶学性质的研究: 甘油氧化酶(GlycerolOxidase，GLOX)在氧气存在的情况下，可将甘油氧化为甘油醛，同时产生过氧化氢。甘油氧化酶可以替代甘油激酶和甘油磷酸氧化酶对血液中甘油三脂进行测定。甘油氧化酶还可将乙二醇经由羟乙醛氧化为...; 任勇; 关键词：日本曲霉菌株选育酶学生物化学检验; 文献传递

深黄被孢霉△~6-脂肪酸脱氢酶基因导入大豆被引量：13: 2003年; 采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统成功地将深黄被孢霉△6 -脂肪酸脱氢酶基因导入大豆。从发芽 5 - 7d的大豆无菌苗切取子叶节外植体 ,经农杆菌浸染和共培养后 ,在含 5 0mg L卡那霉素的选择培养基上培养 2 - 4w后 ,从子叶节处诱导出抗性不定芽。将不定芽转移到伸长培养基上 ,4 - 6w后长至 2 - 3cm高的再生苗。再将再生苗切下转入生根培养基 ,2 - 6w生根。生根后的再生植株经逐步锻炼移入花盆中 ,部分移栽成活的T0 植株能正常开花结荚。从T0 植株上收获T1 种子 ,按株系种植。T0 和T1 代经PCR检测和DNA分子杂交分析。; 卜云萍王广科胡国武孙红妍任勇李航李明春邢来君; 关键词：深黄被孢霉大豆农杆菌介导法

根癌农杆菌介导深黄被孢霉△^6-脂肪酸脱氢酶基因转化大豆及其转基因植株再生被引量：6: 2003年; 采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统成功的将深黄被孢霉△6 脂肪酸脱氢酶基因导入大豆。从发芽 5～ 7d的大豆无菌苗切取子叶节外植体 ,经农杆菌浸染和共培养后 ,在含 50mg L卡那霉素的选择培养基上培养 2～ 4周后 ,从子叶节处诱导出抗性不定芽。将不定芽转移到伸长培养基上 ,4～ 6周后长至 2～ 3cm高的再生苗。再将再生苗切下转入生根培养基 ,2～ 6周生根。生根后的再生植株经逐步锻炼移入花盆中 ,部分移栽成活的T0 植株能正常开花结荚。从T0 植株上收获T1种子 ,按株系种植。T0 和T1代经PCR检测和DNA分子杂交分析。; 卜云萍王广科胡国武孙红妍任勇李航李明春邢来君; 关键词：大豆 △^6-脂肪酸脱氢酶基因转基因植株

转译起始密码子周边序列的改变对Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因表达的影响被引量：7: 2004年; 将少根根霉中Δ6_脂肪酸脱氢酶基因 (RAD6 )的起始密码子周边序列作适当的修改 ,并把修改后获得的片段(RAD6_1 )亚克隆到表达载体pYES2 0 ,构建重组表达载体pYRAD6_1。经测序验证 ,把pYRAD6_1转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达分析 ,同时以空载体pYES2 0和出发序列所构建的pYRAD6作为对照。通过气相色谱 (GC)和气相色谱质谱 (GC_MS)分析表明 ,在pYRAD6和pYRAD6_1转化的酿酒酵母中生成γ_亚麻酸 ,而pYES2 0中没有检测到。其中 ,pYRAD6_1转化的酿酒酵母γ_亚麻酸表达量占细胞总脂肪酸含量的 5 2 3% ,而对照pYRAD6转化的酿酒酵母中表达量只占 2 6 4 %。; 张琦李明春孙颖马海庭邢来君孙红妍任勇; 关键词：△^6-脂肪酸脱氢酶基因酿酒酵母少根根霉

甘油氧化酶发酵条件及酶学性质的研究: 2004年; 日本曲霉 (AspergillusjaponicusAj113)发酵生产甘油氧化酶 (GlycerolOxidaseEC 1 1 3 - )的最适产酶条件 :初始pH 6 0- 6 5 ,温度 2 9± 1℃ ,培养时间 36h ,5 0 0ml三角瓶发酵液的装量为 10 0ml;酶的最适作用pH为 5 0 ,该酶在pH9 5 ,温度 30℃以下时稳定性较好 ;0 0 5mol L的硼砂 -碳酸钠缓冲液 (pH9 5 )对酶有较好的保存效果 ,Zn2 + 、Cu2 + 、Fe3+ 、Ca2 + 离子对酶有激活作用 ,Hg2; 李明春任勇张琦张颖慧邢来君; 关键词：酶学性质

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任勇