- 基质金属蛋白酶9在慢性粒细胞白血病患者骨髓间充质干细胞中表达及其对造血干细胞黏附的影响被引量：3
- 2009年
- 背景:骨髓微环境中持续存在的肿瘤干细胞改变了骨髓基质细胞及细胞外基质的特征,从而参与了造血干细胞恶性转化的过程。目的:探讨慢性粒细胞白血病患者骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶9的表达,及其对造血干细胞黏附的影响。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-09/2008-02在北京协和医学院基础学院完成。材料:骨髓标本来源于4例慢性粒细胞白血病患者和4例健康志愿者,由解放军第三○九医院血液科提供。脐血由北京脐带血造血干细胞库提供,293T细胞由南开大学孔德领教授馈赠。方法:分别采集健康志愿者和慢性粒细胞白血病患者的骨髓,Ficoll法体外分离培养获得骨髓间充质干细胞。将脐血分装,离心弃上清,吸取中间层,同法分离培养获得脐血单个核细胞。取处于对数生长期的骨髓间充质干细胞,按1×107L-1接种于96孔板,培养至近100%融合时再将脐血单个核细胞按1×105/孔接种于同一培养板中,孵育1h后对收集未黏附细胞,计算黏附率。取第2代骨髓间充质干细胞,ELISA法检测细胞培养上清中可溶性形式细胞间黏附分子1的质量浓度。构建MPP-9-siRNA干扰载体,以脂质体法转染包装293T细胞,扩增病毒后进行骨髓间充质干细胞转染。主要观察指标:健康供者与慢性粒细胞白血病患者之间的5项指标比较,病毒转染前后慢性粒细胞白血病患者自身的3项指标比较。结果:与健康供者比较,慢性粒细胞白血病患者骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶9mRNA及蛋白表达水平明显升高,细胞间黏附分子1的蛋白表达无明显差异,培养上清中可溶性形式细胞间黏附分子1的质量浓度明显升高(P<0.05),对脐血单个核细胞的黏附率明显降低(P<0.05)。与未转染的骨髓间充质干细胞比较,病毒转染后骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶9mRNA表达明显降低,细胞间黏附分子1的蛋白表达未受影�
- 朱希山张斌刘瑞豆晓伟刘慧英赵春华
- 关键词：骨髓间充质干细胞基质金属蛋白酶9慢性粒细胞白血病
- P73α增加人骨髓间充质干细胞对DNA损伤物质顺铂的敏感性
- 2010年
- 目的探讨体外培养的骨髓间充质干细胞中P73α蛋白与细胞抗DNA损伤特性之间的关系。方法 XTT实验检测外源过表达P73α蛋白骨髓间充质干细胞的损伤敏感性和损伤诱导的凋亡。结果反转录病毒能介导hMSCs中外源性P73α的表达,过表达P73α导致细胞对化疗药物顺铂的敏感性显著增加,P73α转染细胞中增加的化疗敏感性是由于细胞凋亡的增加。此外,顺铂和P73α能共同活化细胞中促凋亡因子BAX和P21。结论 P73α蛋白是人骨髓间充质干细胞化疗敏感性的重要决定因子。
- 梁伟路春华李静赵春华章静波
- 关键词：人骨髓间充质干细胞顺铂化疗敏感性BAX
- 干扰p73基因对脂肪间充质干细胞向神经细胞分化的影响
- 2011年
- 目的研究抑制p73蛋白的表达,对体外培养的脂肪来源间充质干细胞向骨、脂肪和神经细胞方向分化的影响。方法①流式细胞仪研究抑制p73的表达对人脂肪源间充质干细胞免疫表型影响;②体外转染的脂肪间充质干细胞向成骨和脂肪方向诱导,观察抑制p73的表达对其分化能力的影响;③体外诱导脂肪间充质干细胞神经细胞分化,实时定量PCR分析抑制p73的表达对其向神经细胞分化的影响。结果抑制p73的表达,对脂肪间充质干细胞的免疫表型以及成骨和成脂分化无明显影响,但影响细胞在体外向神经细胞分化的能力。结论 p53家族蛋白成员p73在脂肪间充质干细胞体外向神经细胞的分化的过程中起重要的作用。
- 梁伟夏海龙李静赵春华
- 关键词：脂肪源间充质干细胞神经细胞分化P73神经分化
